背景及概述[1][2]
由Pharmacyclics公司和楊森制藥（Jassen）共同研制的依魯替尼（Ibrutinib，商 品名Imbruvica）作為口服的布魯頓酪氨酸激酶（BTK）抑制劑類首創(chuàng)新藥，于2013年2月被 FDA授予突破性治療藥物資格，并分別于2013年11月13日和2014年2月12日批準為MCL和CLL 的治療藥物。
異構體檢測方法[1]
依魯替尼是單一對映體，控制其原料藥中的雜質含量特別是其對映異構體的含量對于降低其不良反應具有重要的意義。
專利CN 104407067A公開了一種對依魯替尼及其異構體進行HPLC檢測的方法，但該方法存在一些弊端，如①運行時間較長，單針運行時間 35min以上；②未列出異構體雜質的計算方法，也未進行方法學驗證；③未進行異構體的檢 測限和定量限的確定，異構體雜質在依魯替尼原料藥中的百分比（即ee值）也未知。由此可見，現(xiàn)有技術的檢測結果并不能真實反應藥物中異構體雜質的含量?；诖?，CN201710424005.0提供一種依魯替尼對映異構體檢測方法及其質量控制標準。
一種依魯替尼對映異構體的檢測方法，其包括如下步驟：
1）系統(tǒng)適用性試驗溶液的制備：以甲醇為溶劑，將依魯替尼對映異構體對照品配 制成濃度為0.5mg/mL的異構體儲備溶液；另取依魯替尼對照品，按照質量體積比5:1（W/V） 加入所配制的異構體儲備溶液，再加甲醇溶解至溶液中依魯替尼的濃度為0.5mg/mL，作為 系統(tǒng)適用性試驗溶液；
2）對映異構體對照品溶液的制備：以甲醇為溶劑，將依魯替尼對映異構體對照品 配制成濃度為0.25mg/mL的異構體母液；然后精密量取該異構體母液，以甲醇為溶劑，按體 積比1:100進行稀釋，將稀釋后的溶液作為對映異構體對照品溶液；
3）供試品溶液的制備：精密稱取依魯替尼待測樣品，以甲醇為溶劑配制成濃度為 0.5mg/mL的溶液，作為供試品溶液；
4）色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗：采用菲羅門手性柱（LUX Cellulose-4，規(guī)格250×4.6mm）；以正己烷-丙二醇-二乙胺（90:10:0.1，V/V/V）為流動相，流量1.2ml/min；檢測波長 為260nm；取步驟1）制備的系統(tǒng)適用性試驗溶液進行系統(tǒng)適用性試驗，依魯替尼與依魯替尼 對映異構體的分離度應>5.0，理論塔板數(shù)按依魯替尼峰計應不低于5000；
5）依魯替尼對映異構體測定：取步驟2）所制備的對映異構體對照品溶液及步驟3）所制備的供試品溶液各10μL，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標法以峰面積計算對 映異構體的含量。
本發(fā)明還提供了一種依魯替尼對映異構體的質量控制標準，其中依魯替尼對映異構體的含量測定按上述檢測方法進行，所測得依魯替尼對映異構體的含量不得超過0.5％。 若為更加嚴格的控制產品質量，保證用藥安全性，該對映異構體檢查的標準可提高為不得過0.1％。
本發(fā)明檢測方法具有較高的準確度、精密度，耐用性強，可以準確反映依魯替尼原料藥中對映異構體的含量，適合工業(yè)上用于依魯替尼對映異構體的檢查及質量控制，可以為質量標準的制定提供合理的依據(jù)，以便能夠更好的控制和掌握產品質量，并有利于提高臨床用藥的安全性。
無定型制備[2]
以乙二醇單甲基醚做良性溶劑制備無定型依魯替尼
準確稱取依魯替尼3.0g，置于30mL容積的單口圓底燒瓶中，然后向其中加入6mL乙二醇 單甲醚，在45℃下攪拌至溶液澄清。然后另取200mL容積的單口圓底燒瓶，并加入18mL去離 子水和攪拌磁子，維持體系處于45℃，并在攪拌過程中將制備的依魯替尼乙二醇單甲醚溶 液逐滴滴入攪拌的水中，滴加完畢后繼續(xù)在45℃下攪拌2h，然后過濾出固體，將濾出的固體加入100mL去離子水中打漿1h，過濾出打漿的固體，并采用去離子水洗滌后，真空干燥固體 至恒重，得到固體依魯替尼2.55g，收率為85%。PXRD測試圖如附圖1所示，可見所制備的依魯替尼為無定型產品。
制劑[3]
含有依魯替尼和人血清白蛋白(HSA)的組合物，制備的依魯替尼和HSA的重量比為約1:200。
在小瓶中，將依魯替尼(2mg)溶解于甲醇(3.5ml)中，得到澄明的溶液。在圓底燒瓶中，將HSA粉末(400mg)(購買自SeraCare Life Sciences的不含天然脂肪酸的人血清白蛋白，產品代碼：HS-455-80，其含有脂肪酸<0.2mg/gm)溶解于8ml水中。在0℃下，在快速攪拌下，將依魯替尼甲醇溶液緩慢滴加到裝有HSA溶液的燒瓶中。添加完成后，得到澄明的溶液。然后，在真空下除去溶液中的甲醇，得到澄明的溶液。用0.22微米水相過濾器過濾澄明的水溶液。將得到的澄明的水溶液凍干過夜，得到白色固體。
主要參考資料
[1] CN201710424005.0 一種依魯替尼對映異構體的檢測方法
[2] CN201710985299.4 一種無定型依魯替尼的制備方法
[3] CN201780050924.4 依魯替尼制劑