R547是一種有效的，ATP競爭性CDK1/2/4抑制劑，K_i為2 nM/3 nM/1 nM，對CDK7和GSK3α/β作用效果稍弱，而抑制其他激酶活性。Phase 1。R547被鑒定為一種二氨基嘧啶化合物，是一種強(qiáng)效的選擇性atp競爭性CDK抑制劑。R547能有效抑制CDK1/cyclinB、CDK2/cyclinE和CDK4/cyclinD1(Ki=1-3nM)，對一組>120個不相關(guān)激酶無活性(Ki> 5000 nm)。R547有效抑制耐藥的腫瘤細(xì)胞系的增殖獨(dú)立地位,組織學(xué)類型、視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤蛋白,或與IC50s < 0.60μM p53狀態(tài)。R547可降低細(xì)胞成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤蛋白在特定CDK磷酸化位點(diǎn)上的磷酸化水平，其磷酸化水平與誘導(dǎo)細(xì)胞周期阻滯的濃度相同，這表明R547可能是一種臨床應(yīng)用的藥物動力學(xué)標(biāo)志物。R547抑制腫瘤細(xì)胞株的增殖，在所有19個被檢測的細(xì)胞株中都是活躍的，而與組織來源、多藥耐藥(MDR)、p53或視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤狀態(tài)無關(guān)。R547擁有兩個5和6-fluoro替換最終以一個較低的抑制劑,個位數(shù)摩爾效力對CDKs (Ki = 0.001, 0.003,和0.001μM CDK1, CDK2,到,分別)和優(yōu)秀的細(xì)胞力量(IC50 = 0.08μM HCT116細(xì)胞株)。R547口服劑量為每天40 mg/kg，在結(jié)腸、肺、乳腺、前列腺和黑色素瘤人腫瘤異種移植模型中顯示出顯著的TGI(79-99%)。R547同樣有效(TGI, 61-95%)，當(dāng)劑量為40毫克/公斤靜脈注射每周一次。這些劑量的R547是無毒的，并沒有導(dǎo)致體重減輕。在為期3周的研究過程中，R547沒有顯示出明顯的毒性跡象，在研究結(jié)束時進(jìn)行的尸檢中也沒有發(fā)現(xiàn)任何大體的病理變化。在HCT116人結(jié)直腸腫瘤異種移植裸鼠模型中，R547抑制腫瘤生長達(dá)95%。當(dāng)口服和靜脈注射的劑量達(dá)到或低于最大耐受劑量時，R547在所有測試的模型中均可引起顯著的TGI。R547在腫瘤異種移植模型的有效暴露下抑制腫瘤視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤蛋白的磷酸化，為臨床應(yīng)用提供了一種藥效學(xué)生物標(biāo)志物。本文報道的R547分子提示，該分子是一種很有前途的評價實體腫瘤治療的分子。R547 (Ro 4584820) 是一種有效的，ATP競爭性CDK1/2/4抑制劑，Ki為2 nM/3 nM/1 nM，對CDK7和GSK3α/β作用效果稍弱，而抑制其他激酶活性。Phase 1。

Target	Value
CDK4/CyclinD1 (Cell-free assay)	1 nM(Ki)
CDK1/CyclinB (Cell-free assay)	2 nM(Ki)
CDK2/CyclinE (Cell-free assay)	3 nM(Ki)

R547是二氨基嘧啶化合物，是一種有效的選擇性ATP競爭性CDK抑制劑。R547有效抑制CDK1/cyclinB，CDK2/cyclinE，和CDK4/cyclinD1(Ki=1-3nM)，而對120多個不相關(guān)激酶沒有活性(Ki>5,000nM)。R547有效抑制腫瘤細(xì)胞系的增殖，且獨(dú)立于多重耐藥狀態(tài)，組織學(xué)類型，成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤蛋白，或p53狀態(tài)，IC50s <0.60 μM。R547在誘導(dǎo)細(xì)胞周期阻滯的相同濃度下，降低細(xì)胞內(nèi)成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤蛋白在特定CDK磷酸化位點(diǎn)的磷酸化，顯示出臨床應(yīng)用的潛在藥物動力學(xué)標(biāo)志。R547抑制腫瘤細(xì)胞系的增殖，并且不受組織來源，多藥耐藥性(MDR)，p53，或成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤狀態(tài)影響，對所有測試的19種細(xì)胞系均有效。 R547具有5-氟和6-氟取代基，對CDKs(對CDK1，CDK2，和CDK4的Ki分別為0.001，0.003，和0.001 μM)具有低的個位數(shù)納摩爾級的抑制效能，并且具有優(yōu)良的細(xì)胞內(nèi)效能(IC50=0.08 μM，HCT116細(xì)胞系)。

R547以口服和靜脈注射劑量給藥對多種成熟的人腫瘤具有顯著的抑制活性(P < 0.01)。R547以40 mg/kg 每天的劑量口服給藥，在結(jié)腸癌，肺癌，乳腺癌，前列腺癌，和黑色素瘤人腫瘤異種移植物模型中表現(xiàn)出顯著的TGI(79-99%)。R547以40 mg/kg i.v.每周一次的劑量給藥時同樣有效(TGI，61-95%)。R547的這些劑量沒有毒性，并且不會引起體重?fù)p失。在3周的研究期間，R547沒有表現(xiàn)出顯著的毒性信號，在研究結(jié)束的尸檢中沒有任何明顯的病理學(xué)。在HCT116人結(jié)腸腫瘤異種移植的裸鼠模型中，R547抑制高達(dá)95%的腫瘤生長。R547以等于或低于最大耐受劑量口服或靜脈注射給藥時，在所有測試模型中引起顯著的TGI。R547對腫瘤異種移植模型有效暴露，會抑制腫瘤中成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤蛋白的磷酸化，這為臨床應(yīng)用提供了藥效生物指標(biāo)。這些報道表明，R547 對于固體腫瘤的治療是一個有希望的分子。