背景及概述[1]
R547（[4-氨基-2-[(1-甲磺?；哙?4-基)氨基]嘧啶-5-基](2,3-二氟-6-甲氧基苯基)甲酮）是CDK1、2、4、7和9的有效抑制劑，在臨床前模型中顯示出廣泛的抗腫瘤活性。該Ia期研究評估了安全性，藥代動力學(xué)（PK）和藥效學(xué)（PD）終點。方法是：R547（[4-氨基-2-[(1-甲磺?；哙?4-基)氨基]嘧啶-5-基](2,3-二氟-6-甲氧基苯基)甲酮）給予90或180分鐘輸注D1，D8（21天周期）。結(jié)果顯示41例患者在劑量范圍8.6-195 mg / m2耐受R547（[4-氨基-2-[(1-甲磺?；哙?4-基)氨基]嘧啶-5-基](2,3-二氟-6-甲氧基苯基)甲酮）。
不良反應(yīng)[1]
主要相關(guān)事件為惡心（54％），疲勞（34％），嘔吐（34％），頭痛（34％）和低血壓（32％）。
藥代動力學(xué)[1]
PK：20個患者的平均AUC，PK接受≥155mg/ m 2 R547（[4-氨基-2-[(1-甲磺酰基哌啶-4-基)氨基]嘧啶-5-基](2,3-二氟-6-甲氧基苯基)甲酮）超過異種移植研究中有效的暴露。在等效劑量下，180分鐘的時間產(chǎn)生相等的AUC，但Cmax減少30％。
PD：對于患者，在R547（[4-氨基-2-[(1-甲磺?；哙?4-基)氨基]嘧啶-5-基](2,3-二氟-6-甲氧基苯基)甲酮）后1.5至24小時觀察到pRB /總RB比率的暴露依賴性降低。
制備[2]
步驟1：4-氨基-2-乙基硫烷基嘧啶-5-羧酸甲氧基甲基酰胺（8）的制備
向4-氨基-2-乙硫基嘧啶-5-羧酸（7）（1.00g，5.02mmol）和二異丙基乙胺（2.79g，21.58mmol，4當(dāng)量）的DMF（20mL）溶液中加入1-羥基苯并三唑（在0℃下，加入1.09g，8.07mmol，1.5當(dāng)量）和O-苯并三唑-1-基-N，N，N，N-四甲基脲六氟磷酸鹽（3.06g，8.07mmol，1.5當(dāng)量）。攪拌15分鐘后，加入N，O-二甲基羥胺鹽酸鹽（790mg，8.10mmol），將反應(yīng)物在0-20℃下攪拌2小時。將得到的反應(yīng)混合物用H2O處理，并用EtOAc萃取。將合并的有機(jī)萃取液用鹽水洗滌，用Na2SO 4干燥并濃縮。將粗產(chǎn)物在硅膠上用己烷/ EtOAc（1：1）純化，得到8，為白色固體（1.19g）：4-氨基-2-乙基硫烷基嘧啶-5-羧酸甲氧基甲基酰胺（8），產(chǎn)率98％。
第2步（4-氨基-2-乙基硫基嘧啶-5-基）（2-甲氧基苯基）-甲酮（10c）的制備
在30分鐘內(nèi)向1.6M的正丁基鋰的己烷溶液（51.0mL，81.6mmol）中加入2-碘苯甲醚（20.0g，85.47mmol）的無水THF（130mL）溶液，攪拌混合物在-78℃下再進(jìn)行40分鐘，得到澄清溶液。將一部分新制備的2-甲氧基苯基鋰試劑（70.0mL，~30mmol，~3.5當(dāng)量）緩慢加入到酰胺8（2.07g，8.54mmol）的無水THF（30mL）溶液中并攪拌混合物在-78℃下保持1-2小時直至完全消耗酰胺8，將所得混合物用NH4Cl水溶液淬滅并用EtOAc（3x）萃取。將合并的有機(jī)萃取液用鹽水（2x）洗滌，用Na2SO4干燥并蒸發(fā)。將殘余物在硅膠上用己烷/ EtOAc（80/20（60/40））純化，得到10c，為淺黃色固體（1.85g）
第3步（4-氨基-2-乙磺酰基嘧啶-5-基）（2-甲氧基苯基）-甲酮（11c）的制備
冷卻的10c溶液（2.66g，9.19mmol）在氯仿（120mL）中分三份加入3-氯過氧苯甲酸酸（約77％純度，5.20g，?23mmol，2.5當(dāng)量）和將混合物在0℃下攪拌1小時。 稀釋所得混合物用CH 2 Cl 2（80mL）洗滌，用10％硫代硫酸鈉水溶液洗滌（2×30mL）和鹽水（2×20mL），用Na2SO4干燥，和蒸發(fā)。 將殘余物在硅膠上用己烷/純化。EtOAc（60/40），得到11c，為白色固體（2.30，收率78％）：
第4步：[4-氨基-2-[(1-甲磺酰基哌啶-4-基)氨基]嘧啶-5-基](2,3-二氟-6-甲氧基苯基)甲酮的制備
將11c（43.1mg，0.134mmol）和4-氨基-1-哌啶羧酸乙酯（30.0mg，0.174mmol，1.3當(dāng)量）在i-PrOH（4mL）中的懸浮液在100-110℃下在微波輻射下加熱。 1小時濃縮所得混合物，并將殘余物在硅膠上用CH2Cl2 / MeOH（95/5）純化，得到26，為淺黃色固體（47.1mg）：[4-氨基-2-[(1-甲磺?；哙?4-基)氨基]嘧啶-5-基](2,3-二氟-6-甲氧基苯基)甲酮：白色固體；熔點218-219℃。
主要參考資料
[1] Diab S, Eckhardt S, Tan A, et al. A phase I study of R547, a novel, selective inhibitor of cell cycle and transcriptional cyclin dependent kinases (CDKs)[J]. Journal of Clinical Oncology, 2007, 25(18_suppl): 3528-3528.
[2] Chu X J, DePinto W, Bartkovitz D, et al. Discovery of [4-amino-2-(1-methanesulfonylpiperidin-4-ylamino) pyrimidin-5-yl](2, 3-difluoro-6-methoxyphenyl) methanone (R547), a potent and selective cyclin-dependent kinase inhibitor with significant in vivo antitumor activity[J]. Journal of medicinal chemistry, 2006, 49(22): 6549-6560.