成人免费xx,国产又黄又湿又刺激不卡网站,成人性视频app菠萝网站,色天天天天

堿性蛋白酶的應用

2020/10/26 11:48:35

背景及概述[1][3]

堿性蛋白酶(Alkaline Protease)屬內肽酶中的絲氨酸蛋白水解酶類,可以在 堿性條件下水解蛋白質肽鍵,其最適作用pH一般為9~11,主要應用于加酶洗滌 劑工業(yè),在制革、絲綢、飼料、醫(yī)藥、食品、環(huán)保等工業(yè)也有廣泛的應用。該酶種最早在豬的胰臟中發(fā)現。

目前,在世界范圍內蛋白分解酶是工業(yè)酶中用得最多的一種酶,約占酶總量的60%,其中堿性蛋白酶就占25%。它在商業(yè)中的巨大應用前景及在基礎研究中的重要作用,吸引著國際國內的許多公司及研究單位競相對其進行多方面的研究。堿性蛋白酶又稱絲氨酸蛋白酶。

一類最適pH在9~11范圍的蛋白酶。常見的有兩種,一為Novo蛋白酶,另一為Carsberg蛋白酶,兩者的性質和構造相近,分別含275和274個氨基酸殘基,由一條多肽鏈構成。在pH6~10下穩(wěn)定,低于6 或大于11時很快失活。其活性中心含絲氨酸,故稱絲氨酸蛋白酶。當遇可作用于絲氨酸的試劑-二異丙基氟磷酸(DFP)時即失活。對金屬螯合劑 EDTA、重金屬和巰基試劑不敏感,Ca2+對酶的穩(wěn)定有利,耐熱性強,在55℃下 放置30min仍保持大部分活力,故適宜作為洗滌劑酶。

本酶作用位置要求在水解點的羧基側具有芳香族或疏水性氨基酸,如酪氨酸、苯丙氨酸或丙氨酸等。除上述兩種外,另有一種較新的種類,來自嗜堿性的芽孢桿菌(Bacillus sp),最適pH為12,在pH5~12范圍內極為穩(wěn)定,故十分適用于洗滌劑要求。

產堿性蛋白酶的微生物有地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)、解淀粉芽孢桿 菌(B. amyloliquefaciens)、短小芽孢桿菌(B.pumilus)、嗜堿芽孢桿菌(B. alcalophilus)、灰色鏈霉菌(Streptomyces griseus)、弗氏鏈霉菌(S.fradiae)和某些鐮孢霉(Fusarium spp)等。在我國,多選用地衣芽孢桿菌“2709”菌株和短小芽 孢桿菌“289”、“209”菌株生產堿性蛋白酶。

制劑[2]

堿性蛋白酶微膠囊粉:

將海藻酸鈉與蒸餾水按照2.3∶100g/mL的比例用磁力攪拌器進行混合均 勻,攪拌溫度為20℃,攪拌時間為2h,轉速為800r/min。接著,將堿性蛋白酶固體粉末與蒸餾水按照1.15∶100g/mL的比例用磁力攪拌器進行混合均勻,攪拌溫度為20℃,攪拌時間為10min,轉速為700r/min。然后,將CaCl2固體粉末與蒸餾水按照2∶100g/mL的比例用磁力攪拌器進行混合均勻,攪拌溫度為20 ℃,攪拌時間為2min,轉速為700r/min。

將壁材溶液與芯材溶液按照體積比為1∶1的比例用磁力攪拌器混合均勻,攪拌溫度為20℃,攪拌時間為5min,轉速為 800r/min。采用50mL注射器吸入40mL的已混合均勻的壁材芯材溶液,放置于 注射泵上,設定微膠囊造粒機的泵流量為5.01mL/min,微量攪拌器轉速為40%, 電極電壓為1550V,振動頻率為1900Hz,銳孔孔徑為200μm的條件下,將包埋好的微膠囊噴射到固定液CaCl2中。

待造粒過程結束,將已均勻分散到CaCl2固定液中的微膠囊靜置1h,使其充分沉淀、固定成型。將含有堿性蛋白酶微膠囊 的固定液進行真空抽濾,其中真空水循環(huán)泵的工作條件為功率180W,電壓 220V,流量60L/min,揚程8M,真空度0.098Mpa,單頭抽氣量10L/min, 抽濾完成后收集濾紙上的微膠囊顆粒。

將收集好的堿性蛋白酶微膠囊分裝到冷凍 盤中,物料厚度為8mm,放置在條件為-80℃冷凍庫中預凍5h;然后將冷凍盤在-55℃的條件下真空冷凍干燥24h,然后進行成品包裝,得到粒徑為2000微米、含水量為8%、包埋率為90.424%的微膠囊粉。

制備[4]

CN201210144483.3提供一種生產堿性蛋白酶的方法,這種堿性蛋白酶適合于生產大豆肽。本發(fā)明采用如下技術方案:一種利用高地芽孢桿菌生產堿性蛋白酶的方法,其生產關鍵技術如下;選用高地芽孢桿菌為堿性蛋白酶發(fā)酵菌種,采用培養(yǎng)基配方為每升液體培養(yǎng)基含有:豆粕40?80克,蔗糖30?70克,吐溫?800. 3?0. 7克,葡萄糖20克,氯化鈣 0. 7克,硫酸鎂 0. 4克,氯化鉀 0. 3克。

發(fā)酵條件為:培養(yǎng)溫度為37°C,初始pH值為pH10.0,攪拌速度300 rpm,充氣速度1vvm,發(fā)酵時間3天。發(fā)酵液再經過壓濾機過濾、超濾濃縮、添加穩(wěn)定劑和防腐劑,包裝后即為商品堿性蛋白酶。本發(fā)明生產的堿性蛋白酶水解大豆分離蛋白得到的大豆肽產品具有如下特性:通過高效液相色譜法分析,大豆肽分子量分布為:分子量MW≤1000 Da的短肽占80.7%,MW≤2000 Da的肽占91%。產品符合國家標準(GB/T22492?2008)中的大豆肽一級標準。大豆肽分子量分析參照QB/T22492?2008方法,結果見附圖1。

應用[5-6]

一、利用堿性蛋白酶催化水解蛋白質制備發(fā)泡劑母液

發(fā)泡劑是制備氣泡混合輕質土以及泡沫混凝土等土木工程輕質材料的必備原材料,發(fā)泡劑性能的優(yōu)劣是影響氣泡混合輕質土以及泡沫混凝土性能的決定性因素,而制備性能優(yōu)良的復合型發(fā)泡劑需要先制備發(fā)泡劑母液。

CN201811148311.7提供一種利用堿性蛋白酶催化水解蛋白質制備發(fā)泡劑母液的方法,該方法可以催化水解原料蛋白,顯著減少水解時間,解決了現有堿水解、酸水解和鹽水解等方法水解效率低的問題。該方法包括以下步驟:1)將原料蛋白、堿性蛋白酶和水置于容器中攪拌均勻得到混合液,并調節(jié)pH值至9~13;2)將步驟1)得到的混合液加熱保溫反應,反應一定時間后重新調節(jié)pH值至9~13,重復數次即可制得到發(fā)泡劑母液。

二、提取蝦殼蛋白

蝦殼中蛋白質的提取主要是利用酸除去蝦殼中的鈣,然后用堿將蝦殼中的 蛋白質提取出來,調節(jié)提取液pH,使蛋白質沉淀析出,或用鹽析法將蛋白質回收。另一種方 法是使用蛋白酶將蝦殼中的蛋白質水解出來,所得水解液可以進一步調配制成蝦油,或者 經噴霧干燥制成蛋白粉。

用堿法提取蛋白的過程中會帶來嚴重的環(huán)境污染,而單純用酶法 來水解蛋白質由于酶的不能回收利用,也存在著嚴重的浪費。CN201710186400.X提供了一種利用磁性固定化堿性蛋白酶 提取蝦殼蛋白的方法,該方法簡單易操作,穩(wěn)定性好,水解蛋白效果好,提取所需成本低。包括如下步驟:

1、制備磁性固定化堿性蛋白酶:

1.1、將磁性殼聚糖微球加入pH=9-12的硼砂緩沖液中,再加入堿性蛋白酶,磁性 殼聚糖微球、堿性蛋白酶和硼砂緩沖液的比例為1mg:100-400U:0.1-1ml,在0-10℃下反應 2-5h,得到混合產物;

1.2、向混合產物中加入戊二醛,使戊二醛的終濃度為0.005-0.01g/ml,在0-10℃ 下反應2-5h,過濾,將濾渣用硼砂緩沖液洗滌,干燥,得到磁性固定化堿性蛋白酶;

2、提取蝦殼中的蛋白:

2.1、將蝦殼粉加入到濃度為50-90g/L乙酸溶液中,蝦殼粉與乙酸溶液的質量體積 比為1g:6-14ml,在55-75℃下反應1-5h,得混合液;

2.2、將混合液過濾,向濾渣中加入堿性溶液至體系呈中性,過濾,再用蒸餾水洗滌 濾渣,干燥,得改性蝦殼粉;

2.3、測定改性蝦殼粉中蝦殼蛋白的含量;

2.4、將改性蝦殼粉加入到pH為9-12的硼砂緩沖液中,接著加入磁性固定化堿性蛋 白酶(磁性固定化堿性蛋白酶的活性可以通過Folin-酚法進行測定),磁性固定化堿性蛋白 酶與蝦殼蛋白的比例為10-20U:1mg,在溫度為45-60℃下攪拌酶解1-5小時,酶解結束后,用 吸鐵石分離出磁性固定化堿性蛋白酶,將分離出的磁性固定化堿性蛋白酶洗滌后保存?zhèn)?用,再將所得的酶解液過濾,將濾液進行冷凍干燥,得到蝦殼蛋白多肽,即為蝦殼蛋白粉

主要參考資料

[1] 微生物學詞典

[2] CN201410083413.0 一種堿性蛋白酶微膠囊粉及其制備方法

[3] CN201210417021.4 堿性蛋白酶高產菌株及其所產的堿性蛋白酶

[4] CN201210144483.3 一種利用高地芽孢桿菌生產堿性蛋白酶的方法

[5]CN201811148311.7 利用堿性蛋白酶催化水解蛋白質制備發(fā)泡劑母液的方法

[6]CN201710186400.X 一種利用磁性固定化堿性蛋白酶提取蝦殼蛋白的方法

免責申明 ChemicalBook平臺所發(fā)布的新聞資訊只作為知識提供,僅供各位業(yè)內人士參考和交流,不對其精確性及完整性做出保證。您不應 以此取代自己的獨立判斷,因此任何信息所生之風險應自行承擔,與ChemicalBook無關。文章中涉及所有內容,包括但不限于文字、圖片等等。如有侵權,請聯系我們進行處理!
閱讀量:4407 0

歡迎您瀏覽更多關于堿性蛋白酶的相關新聞資訊信息