凝血酶來(lái)源于牛血漿；Thrombin from bovine plasma
分子量： 37KD
簡(jiǎn)介：凝血酶（Thrombin）來(lái)源于牛血漿，分子量37KD，是由兩條肽鏈（31KD和6KD）通過(guò)二硫鍵組成的。凝血酶是凝血酶原（凝血因子Ⅱ）激活后形成的蛋白質(zhì)水解酶，其催化纖維蛋白原（Fibrinogen）水解掉A肽和B肽，由此形成纖維蛋白單體，單體進(jìn)一步聚合，在血小板、紅細(xì)胞和白細(xì)胞等參與下形成血凝塊。 
物理性狀及指標(biāo)： 
外觀：………………………………白色凍干粉或塊狀物 
溶解性：…………………………… 生理鹽水
純度：………………………………SDS-PAGE檢測(cè)圖譜無(wú)雜蛋白條帶 
比活度：……………………………不得低于 2000 單位/mgpr

凍干粉儲(chǔ)存條件：2-8℃，避光防潮密閉干燥

儲(chǔ)液配置:

儲(chǔ)備溶液可在生理鹽水中以100單位/ml的濃度制備。由于凝血酶溶液吸附到玻璃上，因此建議將溶液等份放入塑料管中，并在-20°C下儲(chǔ)存。

產(chǎn)品特點(diǎn)： 
1、純度高：SDS-PAGE檢測(cè)圖譜無(wú)雜蛋白條帶； 
2、比活高：比活力不低于 2000 單位/mgpr；可以PK最好的進(jìn)口產(chǎn)品，目前沒(méi)有檢索到更高比活的國(guó)產(chǎn)同類產(chǎn)品； 
3、不含有其他蛋白酶活性； 
4、滅活病毒：生產(chǎn)過(guò)程中采用S/D法和干熱法兩步滅活病毒； 
5、性價(jià)比及其突出，尤其對(duì)于工業(yè)客戶，國(guó)內(nèi)產(chǎn)品的價(jià)格，國(guó)際頂尖產(chǎn)品質(zhì)量。 
使用說(shuō)明： 
（一）融合蛋白切割 
由于凝血酶具有切割序列專一性強(qiáng)，水解效率高的特點(diǎn)，它被廣泛地應(yīng)用于基因工程產(chǎn)品的開發(fā)，其應(yīng)用之一是作為工具蛋白酶用于重組融合蛋白質(zhì)的特異性斷裂，尤其適用于生物工程制藥業(yè)及基因工程、生物化學(xué)、分子生物學(xué)等研究。 
凝血酶是一種廣泛用于切割標(biāo)簽的蛋白酶，能夠有效切質(zhì)量比僅為1:2000的蛋白。切割可在20℃到37℃之間切割0.3到16小時(shí)。凝血酶最佳的切割位點(diǎn)是X4-X3-P-R[K]-X1'-X2',這里X4 和 X3 是疏水氨基酸而X1'和 X2'是非酸性氨基酸，一些經(jīng)常使用的識(shí)別位點(diǎn)是L-V-P-R-G-S,L-V-P-R-G-F,和MY-P-R-G-N。在X4-X3-P-R-G-X2'之間切割比在X4-X3-P-K-L-X2'更有效。其他識(shí)別位點(diǎn)是 X2-R[K]-X1', 這里X2 或者 X1'是甘氨酸，例如A-R-G和G-K-A，這里切割發(fā)生在第二個(gè)殘基后。在凝血酶切割位點(diǎn)和N末端標(biāo)簽之間插入五個(gè)甘氨酸殘基可改善切，通過(guò)這一"甘氨酸連接肽"只需較少酶量就可達(dá)到完全切割,而且也可以避免可能發(fā)生的錯(cuò)誤切割。有效的消化緩沖液是20mM Tris-HCl緩沖液,含150mM氯化鈉,pH8.0。凝血酶可從切割產(chǎn)物中用p-氨基瓊脂糖親和純化,或者苯甲脒瓊脂糖移去。 
（二）血小板聚集試驗(yàn) 
凝血酶與血小板表面的凝血酶受體結(jié)合，活化血小板，使血小板粘附和聚集。 
血小板聚集實(shí)驗(yàn)參照文獻(xiàn)：兔血用塑料管收集和用ACD(86 mmol／L檸檬酸鈉，111 mmol／L葡萄糖，53 mmol／L檸檬酸)0.15體積比抗凝，200 g離心10 min，離心2次，取上清，800g離心15 min。沉淀中加Tyrode—Hepes緩沖液(140 mmol／L NaCl，5 mmol／L KCl，1 mmol／L MgCl2，10 mmol／L Hepes，10mmol／L葡萄糖，pH 7.4)調(diào)節(jié)至血小板數(shù)為(3～4)×1011／L。血小板聚集用血液凝集儀來(lái)測(cè)定。血小板懸液(0.2ml )與藥物溫育1 min，然后用凝血酶(500 u／L)作用5 min，記錄聚集情況。

【注意】
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