產(chǎn)品簡介：

Bio-FIREFLYGLO螢光素酶報(bào)告基因檢測系統(tǒng)是一種輝光型定量檢測試劑盒，具有高靈敏度和發(fā)光信號穩(wěn)定的特點(diǎn)，可以滿足高通量檢測螢光素酶在哺乳動物細(xì)胞中的表達(dá)。相比于美侖輝光型FIREFLYGLO 螢光素酶報(bào)告基因檢測試劑盒（MA0519），本品發(fā)光信號強(qiáng)度大幅度提升，有效提高了檢測靈敏度，可以用于檢測ADCC Reporter Bioassay或細(xì)胞中螢火蟲螢光素酶(firefly luciferase)報(bào)告基因的表達(dá)。

操作說明：

數(shù)據(jù)展示:

圖1. Bio-FIREFLYGLO發(fā)光體系在光強(qiáng)以及線性效果對比進(jìn)口P品牌（螢光素酶水平檢測）。

(A)Bio-FIREFLYGLO螢光素酶報(bào)告基因檢測試劑盒對比進(jìn)口P公司，在絕對光強(qiáng)上趕超競品P。(B) 單一時刻光強(qiáng)-Firefly螢光素酶濃度標(biāo)曲線性良好（R²=0.9996）。

圖2. Bio-FIREFLYGLO發(fā)光體系在光強(qiáng)以及線性效果對比進(jìn)口P品牌（細(xì)胞水平檢測）。

(A)細(xì)胞濃度梯度光強(qiáng)穩(wěn)定性和(B)細(xì)胞濃度-光強(qiáng)標(biāo)曲示例。在細(xì)胞培養(yǎng)基環(huán)境中，原位追蹤檢測Firefly Luciferase發(fā)光情況。由圖可知，在絕對光強(qiáng)上趕超競品P；而且，單一時刻光強(qiáng)-細(xì)胞數(shù)標(biāo)曲線性良好（R²=0.9998）。

圖3. Bio-FIREFLYGLO發(fā)光體系在不同培養(yǎng)基發(fā)光情況。美侖Bio-FIREFLYGLO發(fā)光體系在常用培養(yǎng)基如：DMEM、RPMI1640、DMEM/F12都可以正常發(fā)光，均與對照檢測效果相近。

圖4：293T細(xì)胞中TNFα濃度梯度誘導(dǎo)NF-κB通路檢測效果，Meiluncell Bio-FIREFLYGLO對比競品P。歸一化處理后，TNFα濃度梯度誘導(dǎo)NF-κB通路檢測結(jié)果與競品無明顯差異。

圖5：使用PWL110檢測螢光素酶發(fā)光情況。Jurkat-luc2p-NFAT-RE-hyg細(xì)胞經(jīng)過PMA以及離子霉素藥物處理，激活螢火蟲螢光素酶，使用PWL110檢測不同藥物濃度下處理后的發(fā)光情況，計(jì)算出EC50=3.278ug/ml。

圖6：使用PWL110進(jìn)行CD20抗體的ADCC效應(yīng)檢測。效靶細(xì)胞比例為6:1，EC50=34.76ng/ml。靶細(xì)胞為Raji，效應(yīng)細(xì)胞為Jurkat-luc2p-NFAT-RE- FcγRIIIa-high affinity(V158)。

圖7：AML12細(xì)胞轉(zhuǎn)染IL6-promoter-Luc熒光素酶報(bào)告基因質(zhì)粒，加入LPS誘導(dǎo)IL-6炎癥通路。Meiluncell Bio-FIREFLYGLO對比競品P檢測結(jié)果無明顯差異。

保存條件：

全新試劑盒-20℃保存，一年有效；

溶解分裝后的Bio-FIREFLYGLO Luciferase Substrate于-70℃避光保存一年，或-20℃短期保存不超過一個月。

運(yùn)輸條件：-10℃干冰運(yùn)輸。

注意事項(xiàng)：

1、檢測儀器選擇：能夠檢測化學(xué)發(fā)光的儀器都適用本試劑盒的檢測，但是針對相同的樣品，不同檢測器本底信號值和測量值均可能不同；且對于同一樣本檢測，不同儀器的數(shù)值不可橫向比較。為防止孔間干擾，推薦使用不透明白色或黑色細(xì)胞培養(yǎng)板。

2、由于發(fā)光信號會受到檢測環(huán)境如培養(yǎng)基組分、溫度等影響，所以應(yīng)確保同組內(nèi)不同樣本檢測條件一致。

3、酶促反應(yīng)對溫度較為敏感，加樣檢測前務(wù)必將檢測試劑以及細(xì)胞培養(yǎng)板平衡至室溫。

4、為保證螢光素酶檢測試劑穩(wěn)定性，適量分裝后建議-70℃長期避光保存或者短期存放于-20℃不超過一個月，并盡快使用，盡量避免多次反復(fù)凍融。

5、如需同時檢測多個細(xì)胞培養(yǎng)板，請盡量確保每個細(xì)胞板加入檢測溶液后孵育時間一致，再進(jìn)行數(shù)據(jù)讀取，以獲得的檢測結(jié)果。