產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
Bio-FIREFLYGLO螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)系統(tǒng)是一種輝光型定量檢測(cè)試劑盒,具有高靈敏度和發(fā)光信號(hào)穩(wěn)定的特點(diǎn),可以滿(mǎn)足高通量檢測(cè)螢光素酶在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的表達(dá)。相比于美侖輝光型FIREFLYGLO 螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒(MA0519),本品發(fā)光信號(hào)強(qiáng)度大幅度提升,有效提高了檢測(cè)靈敏度,可以用于檢測(cè)ADCC Reporter Bioassay或細(xì)胞中螢火蟲(chóng)螢光素酶(firefly luciferase)報(bào)告基因的表達(dá)。
操作說(shuō)明:
數(shù)據(jù)展示:
圖1. Bio-FIREFLYGLO發(fā)光體系在光強(qiáng)以及線(xiàn)性效果對(duì)比進(jìn)口P品牌(螢光素酶水平檢測(cè))。
(A)Bio-FIREFLYGLO螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒對(duì)比進(jìn)口P公司,在絕對(duì)光強(qiáng)上趕超競(jìng)品P。(B) 單一時(shí)刻光強(qiáng)-Firefly螢光素酶濃度標(biāo)曲線(xiàn)性良好(R2=0.9996)。
圖2. Bio-FIREFLYGLO發(fā)光體系在光強(qiáng)以及線(xiàn)性效果對(duì)比進(jìn)口P品牌(細(xì)胞水平檢測(cè))。
(A)細(xì)胞濃度梯度光強(qiáng)穩(wěn)定性和(B)細(xì)胞濃度-光強(qiáng)標(biāo)曲示例。在細(xì)胞培養(yǎng)基環(huán)境中,原位追蹤檢測(cè)Firefly Luciferase發(fā)光情況。由圖可知,在絕對(duì)光強(qiáng)上趕超競(jìng)品P;而且,單一時(shí)刻光強(qiáng)-細(xì)胞數(shù)標(biāo)曲線(xiàn)性良好(R2=0.9998)。
圖3. Bio-FIREFLYGLO發(fā)光體系在不同培養(yǎng)基發(fā)光情況。美侖Bio-FIREFLYGLO發(fā)光體系在常用培養(yǎng)基如:DMEM、RPMI1640、DMEM/F12都可以正常發(fā)光,均與對(duì)照檢測(cè)效果相近。
圖4:293T細(xì)胞中TNFα濃度梯度誘導(dǎo)NF-κB通路檢測(cè)效果,Meiluncell Bio-FIREFLYGLO對(duì)比競(jìng)品P。歸一化處理后,TNFα濃度梯度誘導(dǎo)NF-κB通路檢測(cè)結(jié)果與競(jìng)品無(wú)明顯差異。
圖5:使用PWL110檢測(cè)螢光素酶發(fā)光情況。Jurkat-luc2p-NFAT-RE-hyg細(xì)胞經(jīng)過(guò)PMA以及離子霉素藥物處理,激活螢火蟲(chóng)螢光素酶,使用PWL110檢測(cè)不同藥物濃度下處理后的發(fā)光情況,計(jì)算出EC50=3.278ug/ml。
圖6:使用PWL110進(jìn)行CD20抗體的ADCC效應(yīng)檢測(cè)。效靶細(xì)胞比例為6:1,EC50=34.76ng/ml。靶細(xì)胞為Raji,效應(yīng)細(xì)胞為Jurkat-luc2p-NFAT-RE- FcγRIIIa-high affinity(V158)。
圖7:AML12細(xì)胞轉(zhuǎn)染IL6-promoter-Luc熒光素酶報(bào)告基因質(zhì)粒,加入LPS誘導(dǎo)IL-6炎癥通路。Meiluncell Bio-FIREFLYGLO對(duì)比競(jìng)品P檢測(cè)結(jié)果無(wú)明顯差異。
保存條件:
全新試劑盒-20℃保存,一年有效;
溶解分裝后的Bio-FIREFLYGLO Luciferase Substrate于-70℃避光保存一年,或-20℃短期保存不超過(guò)一個(gè)月。
運(yùn)輸條件:-10℃干冰運(yùn)輸。
注意事項(xiàng):
1、檢測(cè)儀器選擇:能夠檢測(cè)化學(xué)發(fā)光的儀器都適用本試劑盒的檢測(cè),但是針對(duì)相同的樣品,不同檢測(cè)器本底信號(hào)值和測(cè)量值均可能不同;且對(duì)于同一樣本檢測(cè),不同儀器的數(shù)值不可橫向比較。為防止孔間干擾,推薦使用不透明白色或黑色細(xì)胞培養(yǎng)板。
2、由于發(fā)光信號(hào)會(huì)受到檢測(cè)環(huán)境如培養(yǎng)基組分、溫度等影響,所以應(yīng)確保同組內(nèi)不同樣本檢測(cè)條件一致。
3、酶促反應(yīng)對(duì)溫度較為敏感,加樣檢測(cè)前務(wù)必將檢測(cè)試劑以及細(xì)胞培養(yǎng)板平衡至室溫。
4、為保證螢光素酶檢測(cè)試劑穩(wěn)定性,適量分裝后建議-70℃長(zhǎng)期避光保存或者短期存放于-20℃不超過(guò)一個(gè)月,并盡快使用,盡量避免多次反復(fù)凍融。
5、如需同時(shí)檢測(cè)多個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)板,請(qǐng)盡量確保每個(gè)細(xì)胞板加入檢測(cè)溶液后孵育時(shí)間一致,再進(jìn)行數(shù)據(jù)讀取,以獲得的檢測(cè)結(jié)果。
關(guān)鍵字: 報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒;螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒;報(bào)告基因;單酶報(bào)告基因檢測(cè);
大連美侖生物技術(shù)有限公司,是集研發(fā)、生產(chǎn)、銷(xiāo)售于一體,專(zhuān)業(yè)為科研機(jī)構(gòu)和各大制藥、試劑公司提供科研用原料藥和高端實(shí)驗(yàn)試劑的專(zhuān)業(yè)供應(yīng)平臺(tái)。公司技術(shù)力量雄厚,生產(chǎn)工藝先進(jìn)。擁有強(qiáng)大的科研團(tuán)隊(duì)和獨(dú)立的質(zhì)控中心,全部按照ICH及藥典等相關(guān)規(guī)定進(jìn)行檢測(cè),確保產(chǎn)品質(zhì)量符合要求。
美侖致力于打造中國(guó)自己的原料藥試劑品牌,成為您科研試劑采購(gòu)的一站式平臺(tái)。原料藥自產(chǎn)幾十種,主要產(chǎn)品有兩性霉素B、硫酸博萊霉素、絲裂霉素C,鹽酸阿霉素、鹽酸表阿霉素、鏈脲佐菌素等。經(jīng)營(yíng)幾千種,常備庫(kù)存超過(guò)3000種,經(jīng)營(yíng)的原料藥均來(lái)自GMP認(rèn)證廠家,部分已經(jīng)通過(guò)FDA(美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局)認(rèn)證,依托國(guó)內(nèi)外優(yōu)質(zhì)廠商資源,提供實(shí)驗(yàn)室級(jí)別至工業(yè)化放大