背景及概述^[1][2]

長(zhǎng)春胺是由Latnaya等于1950年首次從小蔓長(zhǎng)春花中分離得到的一種生物堿。從化學(xué)結(jié)構(gòu)上看，長(zhǎng)春胺屬于象牙胺-長(zhǎng)春胺類生物堿，在自然界中普遍存在于夾竹桃科植物中。該類生物堿中的大多數(shù)化合物對(duì)細(xì)胞增殖及心腦血管和神經(jīng)系統(tǒng)功能具有藥理活性，引起了藥物化學(xué)家的廣泛興趣，近幾十年來(lái)，相繼有許多具有比長(zhǎng)春胺更高生物活性和更小毒副作用的衍生物被合成出來(lái)，其中最為著名的就是阿樸長(zhǎng)春胺酸乙酯，也稱為長(zhǎng)春西?。╲inpocetine）。

該化合物由匈牙利的GedeonRichter藥物公司研發(fā)并于1978年上市，目前在臨床上用于治療缺血性中風(fēng)和其他由腦血管病變引起的疾病。同時(shí)，長(zhǎng)春西汀也是此類生物堿家族中被研究得最為深入和廣泛的化合物。

長(zhǎng)春西汀的藥理作用機(jī)制研究近10年來(lái)取得了較大的進(jìn)展，主要包括：1）與PBBS高效結(jié)合；2）對(duì)線粒體轉(zhuǎn)移孔復(fù)合物有一定的作用；3）阻斷Nav1.8離子通道；4）抑制Aβ25-35和Aβ-40的氧化還原作用；5）抑制內(nèi)嗅區(qū)NMDA的損傷；6）阻斷IKK通路和NGF逆向胞漿輸送。這些機(jī)制為長(zhǎng)春西汀對(duì)腦卒中、老年癡呆、耳鳴、眩暈、眼底疾病等的治療提供了依據(jù)。同時(shí)，盡管上述基礎(chǔ)研究很有意義，長(zhǎng)春西汀在諸多疾病的臨床應(yīng)用中的循證依據(jù)仍顯得有所不足，有待隨機(jī)、雙盲、多中心臨床試驗(yàn)進(jìn)一步探討其臨床療效和不良反應(yīng)。

制備^[2]

長(zhǎng)春西汀的方法包括如下步驟：

1)制備阿樸長(zhǎng)春胺

在50mL干燥潔凈的單口燒瓶中投入NMP15mL和長(zhǎng)春胺5g，攪拌5-10分鐘得到均勻的混合物，外置冰水浴降溫至0-5℃，滴加二氯亞砜1.62mL，控制內(nèi)溫不超過(guò)20℃，半小時(shí)滴加完畢。撤去冰浴，約30min升溫至常溫(RT，20-25℃)，攪拌反應(yīng)30min。用HPLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)，原料長(zhǎng)春胺剩余量小于1％時(shí)結(jié)束反應(yīng)。再降溫至0-5℃，滴加純化水10mL，控制內(nèi)溫不超過(guò)30℃，20分鐘滴完，加完純化水后，再降溫至0-5℃，滴加氨水調(diào)pH＝7-8，控制內(nèi)溫為15℃，攪拌熟化2小時(shí)，抽濾，濾餅用水淋洗一次，收集濾餅，干燥，即得阿樸長(zhǎng)春胺，重量為4.7g，純度為97％。

反應(yīng)液過(guò)程中監(jiān)測(cè)長(zhǎng)春胺剩余量用HPLC檢測(cè)方法，HPLC條件設(shè)置如下：色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(4.6x150mm；5μm)，以0.2mol/L醋酸銨緩沖溶液(用冰醋酸調(diào)節(jié)pH至6.0)-乙腈(v/v＝45：55)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)280nm。

2)制備長(zhǎng)春西汀粗品

在50mL干燥潔凈的單口燒瓶中，阿樸長(zhǎng)春胺1.8g和無(wú)水乙醇20mL，加熱至乙醇回流，溶清后，快速加入乙醇鈉乙醇溶液0.70mL(1mol/L)，攪拌回流反應(yīng)1小時(shí)。取樣用HPLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)，當(dāng)阿樸長(zhǎng)春胺含量少于3％時(shí)停止回流。適當(dāng)冷卻，減壓移除全部溶劑，再重新加入新鮮無(wú)水乙醇20mL，回流溶清后再快速補(bǔ)充乙醇鈉乙醇溶液0.18mL，再回流反應(yīng)30分鐘后補(bǔ)充10mL乙醇，趁熱過(guò)濾除去不溶物，收集濾液，自然冷卻降溫結(jié)晶，抽濾，淋洗，收集濾餅，即為長(zhǎng)春西汀粗品，干重約1.3g，純度約99％。

3)精制長(zhǎng)春西汀

長(zhǎng)春西汀粗品1.3g加純化水30mL左右，常溫下攪拌2小時(shí)，過(guò)濾、用5mL×2純化水和3mL×2無(wú)水乙醇淋洗，抽干即得水洗產(chǎn)品。水洗產(chǎn)品再加無(wú)水乙醇20mL，回流溶清，加活性炭約50mg，再回流20分鐘，過(guò)濾，減壓蒸除部分乙醇后緩慢降溫重結(jié)晶，固體再過(guò)濾、用乙醇淋洗、抽干、干燥，即得精致長(zhǎng)春西汀1.0g，其純度為99.5％。

藥理作用^[1，3]

本品為腦血管擴(kuò)張藥，能抑制磷酸二酯酶活性，增加血管平滑肌松弛信使cGMP的作用，選擇性地增加腦血流量。此外還能抑制血小板凝集，降低人體血液黏度，增強(qiáng)紅細(xì)胞變形力，改善血液流動(dòng)性和微循環(huán)，促進(jìn)腦組織攝取葡萄糖，增加腦耗氧量，改善腦代謝。

1）阻斷IKK信號(hào)通路，發(fā)揮獨(dú)特抗炎作用。

長(zhǎng)春西汀長(zhǎng)時(shí)間用于腦血管疾病和認(rèn)知損害疾病的治療，有研究認(rèn)為其具有獨(dú)特的抗炎作用。Jeon等[2-3]研究發(fā)現(xiàn)，無(wú)論在體內(nèi)和體外研究中，長(zhǎng)春西汀均具有抗炎作用；在多種類型細(xì)胞（血管平滑肌細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和上皮細(xì)胞）中，長(zhǎng)春西汀能夠抑制腫瘤壞死因子-α（TNF-α）誘導(dǎo)的核因子-κB（NF-κB）活化以及隨后激發(fā)的炎癥促進(jìn)因子活化等；長(zhǎng)春西汀還能夠抑制單核細(xì)胞黏附和趨化，而這些都是炎癥中的關(guān)鍵過(guò)程；在TNF-α或脂多糖（LPS）誘導(dǎo)的小鼠肺部炎癥模型中，長(zhǎng)春西汀可強(qiáng)烈地抑制TNF-α或LPS誘導(dǎo)的炎癥促進(jìn)因子（TNF-α、IL-1β和巨噬細(xì)胞炎癥蛋白-2）水平上調(diào)，減輕多核白細(xì)胞的間質(zhì)性滲出。

2）阻斷Nav1.8鈉離子通道，調(diào)節(jié)神經(jīng)生理活動(dòng)長(zhǎng)春胺和長(zhǎng)春西汀能夠作用于多 個(gè)離子通道，尤其是產(chǎn)生河豚毒素（tetrodotoxin）敏感性傳導(dǎo)作用的鈉離子通道，但其分子基礎(chǔ)至今尚未明了。

3）與外周型BZO結(jié)合，發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用

為驗(yàn)證長(zhǎng)春西汀是否與外周型苯二氮（benzodiazepine，BZO）連接位點(diǎn)（PBBS）結(jié)合，從而作為潛在的配體，對(duì)2只獼猴進(jìn)行正電子發(fā)射X線斷層攝影術(shù)（PET）檢測(cè)，結(jié)果顯示，經(jīng)長(zhǎng)春西汀預(yù)處理后，[11C]PK11195（已知的PBBS放射性配體）的腦攝取明顯減少；另一方面，[11C]PK11195阻斷了外周型PBBS，增加了腦部[11C]長(zhǎng)春西汀的攝入；明顯降低了結(jié)合電位水平，包括[11C]長(zhǎng)春西汀在整個(gè)腦部及單個(gè)腦部結(jié)構(gòu)的電位。提示長(zhǎng)春西汀作為一個(gè)高效的PBBS配體，其神經(jīng)保護(hù)作用可能與其對(duì)神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞功能的調(diào)節(jié)有關(guān)。

4）阻斷Na+和Ca2+通道，改善認(rèn)知功能

用雙光子激光掃描顯微鏡觀察大鼠大腦皮層切片2/3的錐體細(xì)胞，探討電壓依賴型Na+和Ca2+通道阻斷劑長(zhǎng)春西汀對(duì)樹突棘運(yùn)動(dòng)的影響，臨床研究已表明長(zhǎng)春西汀具有認(rèn)知改善作用。同時(shí)也對(duì)藜蘆堿（可增加Na+內(nèi)流）對(duì)樹突棘運(yùn)動(dòng)的影響進(jìn)行了研究，通過(guò)對(duì)新的、收縮的樹突棘長(zhǎng)度或數(shù)量變化的觀察，發(fā)現(xiàn)長(zhǎng)春西汀可引起樹突棘結(jié)構(gòu)發(fā)生實(shí)質(zhì)性地變化；與此相反，藜蘆堿并不能改變樹突棘運(yùn)動(dòng)。

研究結(jié)果提示，長(zhǎng)春西汀通過(guò)減少Ca+和Na+的內(nèi)流，誘導(dǎo)樹突棘形態(tài)和數(shù)量發(fā)生快速改變。長(zhǎng)春西汀誘導(dǎo)的樹突棘運(yùn)動(dòng)的改變可能與微管的變化有關(guān)，其他的小蔓長(zhǎng)春花生物堿也證實(shí)有此作用。另一方面，長(zhǎng)春西汀改善認(rèn)知的潛在作用提示樹突棘運(yùn)動(dòng)的改變可能與認(rèn)知功能有關(guān)。

5）抑制氧化還原反應(yīng)，延緩神經(jīng)退行性病變

通過(guò)觀察β淀粉樣蛋白（Aβ）孵育24h的PC12細(xì)胞來(lái)研究長(zhǎng)春西汀的細(xì)胞保護(hù)作用，發(fā)現(xiàn)長(zhǎng)春西汀的細(xì)胞保護(hù)作用是通過(guò)抑制Aβ25-35和Aβ-40的氧化還原作用實(shí)現(xiàn)的；濃度為40mmol/L的長(zhǎng)春西汀保護(hù)作用最強(qiáng)，在此濃度下，長(zhǎng)春西汀阻斷了線粒體呼吸鏈復(fù)合物II、III和IV的抑制作用，完全抑制了Aβ蛋白誘導(dǎo)的丙酮酸的耗竭作用；此外通過(guò)熒光探針（2′，7′-dichlorofluorescin，DCF）的觀測(cè)，濃度為40mmol/L的長(zhǎng)春西汀可減少Aβ25-35和Aβ-40孵育細(xì)胞后活性氧（reactiveoxygenspecies，ROS）的積聚。

6）對(duì)大腦血流量和葡萄糖代謝率的影響

在對(duì)猴子的研究中已經(jīng)闡釋了靜脈注射[11C]長(zhǎng)春西汀迅速進(jìn)入大腦，攝入量約為總放射量的5%；長(zhǎng)春西汀在大腦內(nèi)的分布是不均衡的，最高的攝入位點(diǎn)是下丘腦、基底神經(jīng)節(jié)和視覺(jué)皮層。[11C]長(zhǎng)春西汀在正常人中也有類似的分布規(guī)律，大腦的最高攝入達(dá)到了總放射量的3.71%；健康志愿者口服[11C]長(zhǎng)春西汀也會(huì)快速進(jìn)入大腦，最高攝入量達(dá)到總放射量的0.71%。

7）拮抗N-甲基-D-天冬氨酸，減輕神經(jīng)毒性

建立永久性大腦中動(dòng)脈梗死（middlecerebralarteryocclusion，MCAO）大鼠模型，研究長(zhǎng)春西汀對(duì)梗死面積的影響。長(zhǎng)春西汀顯著減少了梗死面積（42%，P＜0.05），優(yōu)于尼莫地平（17%）和MK-801（18%）。原代皮層細(xì)胞培養(yǎng)以乳酸脫氫酶（LDH）釋放率為指標(biāo)觀察長(zhǎng)春西汀對(duì)神經(jīng)毒性的影響。長(zhǎng)春西汀呈劑量依賴性地抑制瞬時(shí)的N-甲基-D-天冬氨酸（N-methyl-D-aspartate，NMDA）或藜蘆堿（0.1～1mmol/L）誘導(dǎo)的興奮毒性（IC50＝2～7μmol/L）。長(zhǎng)春西汀的神經(jīng)保護(hù)作用弱于MK-801，但與氟桂嗪或尼莫地平類似。

8）對(duì)神經(jīng)生長(zhǎng)因子的影響

研究發(fā)現(xiàn)，長(zhǎng)春西汀可抑制周圍神經(jīng)內(nèi)神經(jīng)生長(zhǎng)因子（nervegrowthfactor，NGF）的逆向軸漿輸送，對(duì)于NGF逆向輸送的阻斷導(dǎo)致同側(cè)表面脊髓背角節(jié)段相關(guān)的跨神經(jīng)節(jié)退化性萎縮（transganglionicdegenerativeatrophy，TDA），以酶標(biāo)志物抗氟化物酸性磷酸酶（fluoride-resistantacidphosphatase，F(xiàn)RAP）和（TMP）的減少為特征，同時(shí)降低疼痛相關(guān)的神經(jīng)肽如P物質(zhì)（substanceP，SP）和降鈣素基因相關(guān)肽（calcitoningene-relatedpeptide，CGRP）的量，這些神經(jīng)肽源于脊髓膠狀質(zhì)同側(cè)投射于椎板I～I(xiàn)II。認(rèn)為長(zhǎng)春西汀可以局部有限地減輕傷害感受，這可能對(duì)于難治性疼痛的臨床治療是有益的。

適應(yīng)證^[3]

適用于腦梗死后遺癥、腦出血后遺癥、腦動(dòng)脈硬化癥等。

不良反應(yīng)^[3]

1.過(guò)敏癥狀：有時(shí)可出現(xiàn)皮疹，偶有蕁麻疹、瘙癢等過(guò)敏癥狀，若出現(xiàn)此癥狀應(yīng)停藥。

2.精神神經(jīng)系統(tǒng)：有時(shí)頭痛、眩暈，偶爾出現(xiàn)困倦感，側(cè)肢麻木感，脫力感加重。

3.消化道：有時(shí)惡心、嘔吐，也偶然出現(xiàn)食欲不振、腹痛、腹瀉等癥狀。

4.循環(huán)器官：偶見(jiàn)顏面潮紅、頭昏、血壓輕度下降、心動(dòng)過(guò)速等。

5.血液：有時(shí)可出現(xiàn)白細(xì)胞減少。

6.肝臟：有時(shí)可出現(xiàn)GOT、GPT、γ-GTP、LDH、ALP升高，偶爾出現(xiàn)黃疸等。

7.腎臟：偶爾可出現(xiàn)血尿素氮升高。

8.其他：偶會(huì)有倦怠感。

禁忌^[3]

1.對(duì)本品中任何成分過(guò)敏者禁用。

2.顱內(nèi)出血后尚未完全止血者禁用。

3.孕婦或可能妊娠的婦女禁用。

4.嚴(yán)重缺血性心臟病、嚴(yán)重心律失常者禁用。

注意事項(xiàng)^[3]

1.本品應(yīng)在醫(yī)生指導(dǎo)下使用。

2.出現(xiàn)過(guò)敏癥狀時(shí)，應(yīng)立即停藥就醫(yī)。

3.哺乳期婦女應(yīng)避免使用本品，不得不使用時(shí)應(yīng)停止哺乳。

4.長(zhǎng)期使用應(yīng)注意血象變化。

5.注射液不可靜脈推注或肌肉注射。

6.輸液中長(zhǎng)春西汀含量不得超過(guò)0.06mg/ml，否則有溶血的可能。

7.注射液中含山梨醇，糖尿病病人應(yīng)用時(shí)注意。

主要參考資料

[1]長(zhǎng)春西汀藥理作用機(jī)制研究進(jìn)展

[2] CN201611170203.0一種制備長(zhǎng)春西汀的方法

[3] 新編臨床藥物學(xué)