背景及概述[1]
試劑盒是一種將測(cè)定一種成分所需要的2種或2種以上的試劑及實(shí)驗(yàn)室一般用品連同操作說(shuō)明書(shū)包裝在一起,形成商品化的試劑單位,即由廠家提供給用戶使用的一種套裝試劑,使用者除用自備的蒸餾水或試劑盒提供的緩沖液進(jìn)行復(fù)溶試劑的操作外不需要作任何試劑配制。目前檢測(cè)試劑已廣泛采用這一方式提供,kit的應(yīng)用不但節(jié)約人力減少配制誤差,而且有利于試劑質(zhì)量的保證和實(shí)驗(yàn)室間方法學(xué)的統(tǒng)一,提高了可比性。
BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒(BCAProteinAssayKit)是根據(jù)目前世界上最常用的兩種蛋白濃度檢測(cè)方法之一BCA法研制而成,實(shí)現(xiàn)了蛋白濃度測(cè)定的簡(jiǎn)單、高穩(wěn)定性、高靈敏度和高兼容性。BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒靈敏度高,檢測(cè)濃度下限達(dá)到25μg/ml,最小檢測(cè)蛋白量達(dá)到0.5μg,待測(cè)樣品體積為1-20μl。在50-2000μg/ml濃度范圍內(nèi)有較好的線性關(guān)系。BCA法測(cè)定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的化學(xué)物質(zhì)的影響,可以兼容樣品中高達(dá)5%的SDS,5%的TritonX-100,5%的Tween20、60、80。但本試劑盒受螯合劑和略高濃度的還原劑的影響,需確保EDTA低于10mM,無(wú)EGTA,二硫蘇糖醇(DTT)低于1mMβ-巰基乙醇(β-Mercaptoethanol)低于0.01%。
應(yīng)用[2]
有研究考察活性保護(hù)劑對(duì)微球中蛋白活性的保護(hù)作用。以超氧化物歧化酶(SOD)為模型藥,采用W/O/W復(fù)乳-溶劑揮發(fā)法制備SOD-PLGA微球,采用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒測(cè)定SOD蛋白濃度,黃嘌呤氧化酶系統(tǒng)測(cè)定SOD活性,考察多糖、多元醇、表面活性劑等活性保護(hù)劑對(duì)SOD活性的保護(hù)作用,并探討保護(hù)劑之間是否有聯(lián)合作用及保護(hù)劑含量對(duì)SOD活性保護(hù)作用的影響。結(jié)果活性保護(hù)劑對(duì)SOD活性均有保護(hù)作用。BSA和β環(huán)糊精有協(xié)同作用。在一定范圍內(nèi),隨著保護(hù)劑用量的增加,活性保護(hù)作用增強(qiáng)。結(jié)論BSA和β環(huán)糊精較好的保護(hù)了PLGA微球中SOD的活性。
主要參考資料
[1] 協(xié)和醫(yī)學(xué)詞典
[2] 活性保護(hù)劑對(duì)微球中蛋白活性的保護(hù)作用