背景及概述^[1]

DC細(xì)胞體外快速成熟試劑盒又叫樹(shù)突狀細(xì)胞快速成熟試劑盒，通用名稱：成熟樹(shù)突狀細(xì)胞體外處理試劑盒，專門從人類骨髓、臍帶血或外周血中得到的未成熟樹(shù)突狀細(xì)胞，進(jìn)行體外誘導(dǎo)和負(fù)載，處理得到成熟樹(shù)突狀細(xì)胞。主要組成成份是氨基酸、維生素、細(xì)胞因子和糖類等。

試劑盒成份^[1]

操作方法^[1]

DC-I用150μL PBS溶解； DC-II用20μL PBS溶解； DC-III用10μL PBS溶解； DC-IV用50μL PBS溶解； DC-V用1mL PBS溶解?？蓪⑸鲜鲆蜃优渲坪笾糜?20°C冰箱保存，但建議現(xiàn)配現(xiàn)用。

1、D0 取250M個(gè)PBMC細(xì)胞，用50ml 1640培養(yǎng)液重懸，鋪于T-175培養(yǎng)瓶中，置于37℃、 5%CO2培養(yǎng)箱孵育2h；

2、 孵育2h后，輕晃T-175培養(yǎng)瓶，去懸浮細(xì)胞，用20mL的1640培養(yǎng)液洗滌兩次，分別加入DC培養(yǎng)基100 mL，4.6μLDC-I溶液(至其終濃度為500IU/mL)以及4μL DC-II溶液(至其終濃度為10ng/mL)，同時(shí)加入5%的FBS，繼續(xù)置于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)；

3、 如需加入特異性抗原，可以于D2加入相應(yīng)的特異性抗原（終濃度20-80μg/mL）；

4、 D2 分別加入5μL DC-III溶液（至其終濃度為10ng/mL）,5μL DC-IV溶液（至其終濃度為500IU/mL），以及100μL DC-V溶液（至其終濃度為1μg/mL）；

5、 D3 收集DC細(xì)胞于50mL離心管中用PBS離心洗滌3次，收獲DC細(xì)胞。

注意： 若初始的PBMC使用量非操作說(shuō)明中250M的數(shù)量，請(qǐng)根據(jù)實(shí)際PBMC數(shù)量對(duì)試劑盒中各試劑的量做相應(yīng)調(diào)整。

產(chǎn)品保存^[1]

1、 本產(chǎn)品需避光保存；

2、 DC培養(yǎng)基， DC-I與DC-IV置于2-8°C保存； DC-II， DC-III與DC-V置于-20°C保存；

3、 請(qǐng)于保質(zhì)期內(nèi)使用本產(chǎn)品，超過(guò)保質(zhì)期，請(qǐng)勿使用。

質(zhì)量控制^[1]

本產(chǎn)品已使用人PBMC進(jìn)行培養(yǎng)性能的測(cè)試，確保本產(chǎn)品具有使DC細(xì)胞快速成熟的能力。此外，還進(jìn)行如下指標(biāo)的檢測(cè)，以確保質(zhì)量：無(wú)菌檢測(cè)（包括細(xì)菌，真菌）、pH 測(cè)試、支原體檢測(cè)、內(nèi)毒素檢。

主要參考資料

[1] DC細(xì)胞體外快速成熟試劑盒說(shuō)明書