4',6-二脒基-2-苯基吲哚二鹽酸鹽是一種有機胺鹽類化合物,常用的英文縮寫為DAPI,它在水中有一定的溶解性并且可溶于強極性有機溶劑例如二甲基亞砜等。該物質(zhì)在二甲基亞砜中的溶液可在 -20 °C 下保存長達 3 個月,它是一種能夠與DNA中大部分A,T堿基相互結(jié)合的熒光染料,常用于熒光顯微鏡觀測,在生物化學基礎研究中有廣泛的應用。
圖1 4',6-二脒基-2-苯基吲哚二鹽酸鹽的商品圖
理化性質(zhì)
4',6-二脒基-2-苯基吲哚二鹽酸鹽是含有特定AT序列DNA的一種嵌入劑,它能穿透擾亂的細胞膜而對核染色,具有極其高的靈敏性。該物質(zhì)對活細胞無毒副作用,常用于細胞凋亡檢測,染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。此外,該化合物也時一種常用的核酸結(jié)合死活鑒別染料。
生物應用
是最常用的一種DNA 染色劑,其可與DNA 雙螺旋的 A-T 富集區(qū)域相結(jié)合,它可用于對細胞核和MTP9抗體進行雙染色。它在細胞成像和DNA染色等基礎研究中有著廣泛的應用,例如它可在熒光顯微鏡下觀察細胞核的形態(tài)和分布。由于4',6-二脒基-2-苯基吲哚二鹽酸鹽與DNA結(jié)合的高特異性,能夠清晰地顯示細胞核的形態(tài)和位置。由于該物質(zhì)對活細胞無毒副作用,因此常用于細胞凋亡檢測。在細胞凋亡發(fā)生時,細胞核會發(fā)生形態(tài)和結(jié)構上的改變,它可以用于染色后通過熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測細胞凋亡的發(fā)生和程度。[1]
使用說明
在使用 4',6-二脒基-2-苯基吲哚二鹽酸鹽進行實驗時,應避免暴露于強光下,以免其熒光特性受損。使用該物質(zhì)的實驗室操作需遵守相關安全規(guī)定,包括正確使用防護設備,避免接觸皮膚和吸入其蒸氣。存儲 DAPI 溶液時,應注意避免溫度過高或結(jié)晶析出,以保持其穩(wěn)定性。
參考文獻
[1] Lori E. Lowes. 半自動適應循環(huán)腫瘤細胞(CTC)分析臨床和臨床前研究中的應用 [J]. 2010.