DAPI全稱為4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole)，是一種能夠與DNA強(qiáng)力結(jié)合的藍(lán)色熒光染料，常用于細(xì)胞核染色。其發(fā)出的藍(lán)色熒光與其他的綠色、黃色或紅色熒光蛋白形成鮮明對(duì)比，因此多用于多色熒光技術(shù)。DAPI可以穿過(guò)細(xì)胞膜，因此可以用于活細(xì)胞和固定細(xì)胞的染色，但活細(xì)胞染色對(duì)DAPI濃度有嚴(yán)格要求，所以DAPI主要用于固定細(xì)胞染色。

DAPI溶液的配制

DAPI溶液一般使用ddH2O配制，溶液的濃度為5mg/ml，推薦DAPI溶液工作濃度為0.5-1Oμg/ml之間。
配制方法：取1mg的DAPI粉末，離心使粉末沉積在保存管底，后取1mL的ddH2O將DAPI粉未溶解，可以制備出2.9mM的DAPI溶液(1 mgDAP/1mLH2O)。此外，DAPI不可以用PBS緩沖溶液或者其他緩沖液直接進(jìn)行溶解，需要先用水將其溶解。但使用時(shí)需要用PBS將DAPI儲(chǔ)備溶液稀釋。

保存

DAPI溶液應(yīng)儲(chǔ)存在避光、冷藏條件下，溫度一般保持在2-8℃。避免與有機(jī)物接觸，因?yàn)镈API易溶于有機(jī)溶劑。需要在不透光的瓶子中存放。

安全性

DAPI是一種有毒物質(zhì)，需要避免與皮膚和眼睛接觸。實(shí)驗(yàn)人員需要佩戴適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)手套和眼鏡。在DAPI處理樣本時(shí)，避免直接照射熒光顯微鏡的激發(fā)光源到眼睛。避免長(zhǎng)時(shí)間曝光在DAPI的熒光光源下，以免損傷細(xì)胞樣本。在DAPI染色后，不宜長(zhǎng)時(shí)間存放，最好在染色后立即觀察。