葡萄糖氧化酶，簡稱GOD，是一個(gè)分子量約160000道爾頓的蛋白質(zhì)，有二個(gè)(或四個(gè))多肽鏈構(gòu)成，酶反應(yīng)的最適pH 5-7,最適溫度是30-40℃,催化時(shí)需要黃素腺嘌呤二核苷酸(FAD)作為輔酶參與作用。反應(yīng)時(shí)葡萄糖先進(jìn)行脫氫形成葡萄糖酸內(nèi)酯，使FAD還原為還原型FAD，葡萄糖酸內(nèi)酯進(jìn)一步水解為葡萄糖酸。還原型FAD與空氣中的氧反應(yīng)形成過氧化氫。

GOD的特性

高純度葡萄糖氧化酶為淡黃色粉末，易溶于水，分子量為150KD左右，光吸收波長為377nm和455nm。葡萄糖氧化酶的作用溫度為30℃～60℃，固體酶制劑在0℃下保存至少可穩(wěn)定2年，在-15℃下可穩(wěn)定8年。葡萄糖氧化酶穩(wěn)定的pH范圍為4.0～8.0，具有很好的穩(wěn)定性。一般來說，酶反應(yīng)受底物濃度的影響不大。葡萄糖濃度在5%～20%，反應(yīng)速度幾乎不變。

GOD的作用機(jī)理

葡萄糖氧化酶作為一種新型的綠色添加劑有其獨(dú)特的作用方式。與普通酶制劑不同，它并不是通過改善營養(yǎng)素的消化利用和減輕抗?fàn)I養(yǎng)因子的方式來改善對(duì)動(dòng)物生產(chǎn)性能的影響。其方式可能是一方面通過與飼料中葡萄糖作用而產(chǎn)生的葡萄糖酸來發(fā)揮作用，另一方面，葡萄糖氧化酶在與葡萄糖作用過程中消耗氧氣，使消化道更易形成厭氧環(huán)境，促進(jìn)厭氧有益菌的增殖。綜合起來葡萄糖氧化酶通過在腸道中的作用可能起到酸化劑和益生菌的作用。

生產(chǎn)方法

一種葡萄糖氧化酶的生產(chǎn)方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)取黑曲霉菌種按10～15％的接種量接種于一級(jí)種子培養(yǎng)基中，在28～32℃培養(yǎng)20～24h，控制溶氧在50％以上，培養(yǎng)即得一級(jí)種子液；

(2)將所述一級(jí)種子液按10～15％的接種量接種于二級(jí)種子培養(yǎng)基中，在28～32℃培養(yǎng)20～24h，控制溶氧在50％以上，培養(yǎng)即得二級(jí)種子液；

(3)將所述二級(jí)種子液按10～15％的接種量接種于發(fā)酵培養(yǎng)基中，在28～32℃培養(yǎng)40～45h，控制溶氧在50％以上，得到混合培養(yǎng)基，后按每升混合培養(yǎng)基添加8～10g果糖的比例添加果糖，并開始按每升混合培養(yǎng)基流加葡萄糖1～2g/小時(shí)的比例添加葡萄糖，同時(shí)控制pH為5.5～6.5，培養(yǎng)80～96h后即得酶活達(dá)到200U/mL以上的葡萄糖氧化酶發(fā)酵液，其中，所述發(fā)酵培養(yǎng)基的成分為：葡萄糖50～60g/L、酵母浸膏10～15g/L、硫酸銨3～5g/L、磷酸二氫鉀2～3g/L、硫酸鎂0.5～1g/L、氯化錳0.2～0.5g/L、碳酸鈣20～30g/L；

(4)將所述葡萄糖氧化酶發(fā)酵液進(jìn)行過濾，除去菌體及其他微小顆粒，后對(duì)濾液超濾濃縮，直至得到酶活達(dá)到800U/mL以上的葡萄糖氧化酶酶液；

(5)將所述葡萄糖氧化酶酶液以淀粉為載體，進(jìn)行噴霧干燥，即可得到酶活達(dá)到2500U/mL以上的固體葡萄糖氧化酶；

其中，步驟(1)中的所述一級(jí)種子培養(yǎng)基和步驟(2)中的所述二級(jí)種子培養(yǎng)基的成分都為：葡萄糖60～80g/L、酵母浸膏10～15g/L、硫酸銨3～5g/L、磷酸二氫鉀2～3g/L、硫酸鎂0.5～1g/L、氯化錳0.2～0.5g/L、碳酸鈣15～20g/L。