背景及概述^[1]

枸櫞酸托法替尼(tofacitinibcitrate)，化學(xué)名為3-[(3R，4R)-4-甲基-3-[甲基-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)氨基]哌啶-1-基]-3-氧代丙腈枸櫞酸鹽，是美國輝瑞公司研發(fā)的一種新型Janus激酶抑制劑，2012年11月經(jīng)美國FDA批準(zhǔn)上市，商品名Xeljanz。本品可聯(lián)合甲氨喋呤用于治療對腫瘤壞死因子抑制劑應(yīng)答不足的活動性類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。

作用機(jī)制^[2]

托法替尼能有效地選擇抑制JAK3，同時對JAK1、JAK2也有抑制作用，從而在細(xì)胞因子水平異常的體系中阻斷JAKs介導(dǎo)的一系列細(xì)胞因子信號通路，抑制異常免疫信號的傳導(dǎo)，有效控制RA病程，對其他酪氨酸激酶抑制作用微弱，能減小不良反應(yīng)發(fā)生范圍。托法替尼以細(xì)胞內(nèi)JAK-STAT信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路為靶點(diǎn)，通過抑制JAK磷酸化，從而阻止STAT磷酸化，使下游炎癥細(xì)胞因子合成減少，進(jìn)而抑制CD+4T細(xì)胞增殖，阻斷多種炎癥細(xì)胞因子的合成和分泌，達(dá)到抗炎、調(diào)節(jié)免疫的作用。研究發(fā)現(xiàn)，托法替尼可阻斷與JAK3結(jié)合的共同γC鏈細(xì)胞因子(IL-2，IL-7，IL-9，IL-15和IL-21等)，同時還可阻斷gp130家族(IL-6和IL-11)及Ⅱ型細(xì)胞因子受體家族(IFN-α/β，IFN-γ等)。由于該藥對JAK2也有相對較弱的抑制作用，故亦可阻斷βc家族(IL-3，IL-5，GM-CSF，EPO和IFNγ)。由此可見，托法替尼能夠通過阻斷JAK1和JAK2來影響Th1細(xì)胞的分化及致病性Th17細(xì)胞的產(chǎn)生。此外，由于托法替尼對IL-21有阻斷作用，推測其可能對B細(xì)胞及濾泡輔助性T細(xì)胞(Tfh細(xì)胞)的功能產(chǎn)生影響。研究發(fā)現(xiàn)，除了抑制細(xì)胞免疫應(yīng)答，托法替尼還能通過調(diào)節(jié)體液免疫發(fā)揮作用。該藥可以通過有效抑制抗原特異性抗體反應(yīng)，進(jìn)而影響生發(fā)中心(germinalcenter，GC)形成、抑制B細(xì)胞和T細(xì)胞分化增殖及Ig類別轉(zhuǎn)換，并在一定程度降低血清總IgG水平，從而抑制體液免疫反應(yīng)。

適應(yīng)癥^[2]

類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、銀屑病、胰腺病、白血病、骨髓增生異常綜合征、強(qiáng)直性脊柱炎、移植排斥。

不良反應(yīng)^[2]

上呼吸道感染，頭痛，腹瀉和鼻咽炎等。

警告和注意事項(xiàng)^[2]

在活動性感染期間（包括局部感染及嚴(yán)重感染）。

禁用^[2]

淋巴瘤和其他惡性病患者禁用；胃腸道穿孔患者謹(jǐn)慎使用；不應(yīng)與活疫苗同時使用；嚴(yán)重肝受損不建議使用。

藥效及藥動學(xué)研究^[2]

托法替尼是一種口服JAKs抑制劑，體外抑制激酶JAK1、JAK2、JAK3的半數(shù)有效濃度（IC50）分別為3.2、4.1、1.6nmol/L，且在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中選擇性抑制JAK3的能力比JAK2高10倍以上。托法替尼能與激活T細(xì)胞所必須的細(xì)胞因子IL-2、4、7、9等受體的γ共鏈相結(jié)合。此藥物表現(xiàn)出對心臟移植術(shù)的小鼠動物模型有效，體現(xiàn)了T細(xì)胞在移植排斥方面起至關(guān)重要的作用。此外，托法替尼作用于人單核細(xì)胞和滑膜細(xì)胞，能抑制TNF、IFN-γ、減少IL-6和趨化因子生成、T細(xì)胞CD4的增殖。動物實(shí)驗(yàn)表明，該藥治療佐劑誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎大鼠模型和膠原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎小鼠模型可使關(guān)節(jié)腫脹明顯減輕，同時滑膜炎癥和軟骨破壞均較對照組顯著改善。托法替尼能降低鼠血清中的IL-6、IL-8水平，減少滑膜炎入侵軟骨，起到抗炎及骨保護(hù)作用。在靈長類異體腎移植排斥反應(yīng)模型中，托法替尼能使動物平均生存期顯著延長，且與給藥劑量正相關(guān)。給藥組動物體內(nèi)自然殺傷細(xì)胞、CD4+和CD8+T細(xì)胞數(shù)量顯著下降，血糖、血壓正常，沒有發(fā)現(xiàn)癌變癥狀。在高劑量時給藥組伴有貧血、腎炎和尿鈣鹽沉積等現(xiàn)象。托法替尼在佐劑型關(guān)節(jié)炎鼠模型中血漿濃度半衰期是0.9h，對P450代謝酶基本無抑制或誘導(dǎo)效應(yīng)，在體外藥物濃度達(dá)到25μmol/L以上才能觀察到誘導(dǎo)效應(yīng)，而用于體內(nèi)治療時的血藥濃度小于1μmol/L。藥物相互作用研究表明，托法替尼與甲氨蝶呤聯(lián)用時在體內(nèi)代謝沒有顯著差異，與氟康唑同服有血藥濃度升高影響。體內(nèi)毒性研究表明本品在代謝、血壓、淋巴細(xì)胞增殖等方面無顯著異常癥狀，有與劑量相關(guān)的貧血等血液方面的副作用，可能與同時抑制JAK2有關(guān)，JAK2通路與造血因子密切相關(guān)。

制備^[1]

以4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶（1）為起始原料，與對甲苯磺酰氯（2）進(jìn)行氨基保護(hù)反應(yīng)得到4-氯-7-對甲苯磺?；量┎2，3-d]嘧啶（3），化合物3與(3R，4R)-1-芐基-4-甲基-3-甲胺基-哌啶（4）發(fā)生取代反應(yīng)，生成N-[(3R，4R)-1-芐基-4-甲基哌啶-3-基]-N-甲基-7-對甲苯磺?；量┎2，3-d]嘧啶-4-胺（5），化合物5經(jīng)堿水解得到N-[(3R，4R)-1-芐基-4-甲基哌啶-3-基]-N-甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺（6），化合物6經(jīng)催化氫解反應(yīng)脫保護(hù)得到N-[(3R，4R)-4-甲基哌啶-3-基]-N-甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺（7），化合物7與氰乙酸乙酯進(jìn)行酰胺化反應(yīng)生成托法替尼，合成工藝見圖。

主要參考資料

[1] 托法替尼的免疫調(diào)節(jié)作用及臨床應(yīng)用

[2] 抑制JAK3激酶的免疫抑制劑托法替尼

[3] 枸櫞酸托法替尼的合成