XTT細(xì)菌增殖及細(xì)菌毒性檢測試劑

中文名稱：XTT細(xì)菌增殖及細(xì)菌毒性檢測試劑

英文名稱：XTT Bacteria Proliferation and Cytotoxicity Kit

產(chǎn)品規(guī)格：500T|1000T

XTT(二甲氧唑黃)是一種類似于MTT 的化合物，在電子耦合試劑存在的情況下，活細(xì)菌線粒體中存在與輔酶Ⅱ相關(guān)的脫氫酶，可將黃色的XTT 還原成水溶性的橘黃色的甲月贊。生成的甲臜能夠溶解在組織培養(yǎng)基中，不形成顆粒，可直接用酶聯(lián)免疫檢測儀檢測定吸光值。

注意事項(xiàng)
1. 本試劑盒的檢測依賴于脫氫酶催化的反應(yīng)，如果待檢測體系中存在較多的還原劑，例如一些抗氧化劑會干擾檢測，需設(shè)法去除。
2. 如果待測溶液有還原性，測定不含細(xì)菌，但含有XTT 的待測溶液在450 nm 處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入XTT ，如果吸光度相對較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用培養(yǎng)基洗滌細(xì)菌兩次，然后加入新的100 μl 培養(yǎng)基和20 μl XTT 工作液進(jìn)行檢測。
3. 用酶標(biāo)儀檢測前請確?？變?nèi)沒有氣泡，否則會干擾測定。
4. 為保證您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

操作方法
1. 96 孔板加入細(xì)菌100μL/孔（約1×104），置37℃ 5%CO2 細(xì)菌培養(yǎng)箱培養(yǎng)24 小時。2.加入適當(dāng)濃度的受試化合物。3.將96 孔板在37℃，含5% CO2 空氣及100%濕度的細(xì)菌培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4. 向各孔中加入20 μl 的XTT 工作液。
5. 37℃下孵育1~4 小時。
6. 酶標(biāo)儀在450nm 波長處檢測每孔的光密度。

結(jié)果分析
1. 細(xì)菌的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（完全培養(yǎng)基加XTT 工作液，無細(xì)菌）或空白藥物孔OD 值（完全培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加XTT 工作液，無細(xì)菌），各重復(fù)孔的OD 值取均數(shù)±SD。細(xì)菌的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)菌的OD 值，C 為對照細(xì)菌的OD 值。細(xì)菌存活率% =（加藥細(xì)菌OD/對照細(xì)菌OD）×100
2. 求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)。
 

特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！