MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒

中文名稱：MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒

英文名稱：MTT cell proliferation and Cytotoxicity Detection Kit

產(chǎn)品規(guī)格：500T|1000T

MTT 分析法以代謝還原噻唑藍(lán)3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide (MTT)為基礎(chǔ)?；罴?xì)胞的線粒體中存在與NADP 相關(guān)的脫氫酶，可將黃色的MTT 還原為不溶性的藍(lán)紫色的甲月贊（Formazan），死細(xì)胞此酶消失，MTT 不被還原。用DMSO 溶解Formazan 后可用酶標(biāo)儀在550nm 波長處檢測光密度。

操作方法1.在96 孔板加入細(xì)胞100μL/孔（約1×104），置37℃ 5%CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24 小時(shí)。2.加入適當(dāng)濃度的受試化合物。3.將96 孔板在37℃，含5% CO2 空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。4.將5×MTT 用Dilution Buffer 稀釋成1× MTT。5.每孔加50μL 1× MTT，在37℃孵育4 小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。6.吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲月贊溶解，用平板搖床搖勻。7.酶標(biāo)儀在550nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 波長，于490nm 波長處檢測亦可）。

結(jié)果分析
1. 細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（完全培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD值（完全培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100
2. 求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)。凱

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