XTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑

中文名稱：XTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑

英文名稱：XTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Kit

產(chǎn)品規(guī)格：500T|1000T

XTT(二甲氧唑黃)是一種類似于MTT 的化合物，在電子耦合試劑存在的情況下，活細(xì)胞線粒體中存在與輔酶Ⅱ相關(guān)的脫氫酶，可將黃色的XTT 還原成水溶性的橘黃色的甲臜。生成的甲月贊能夠溶解在組織培養(yǎng)基中，不形成顆粒，可直接用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀檢測(cè)定吸光值。

注意事項(xiàng)
1. 本試劑盒的檢測(cè)依賴于脫氫酶催化的反應(yīng)，如果待檢測(cè)體系中存在較多的還原劑，例如一些抗氧化劑會(huì)干擾檢測(cè)，需設(shè)法去除。
2. 如果待測(cè)溶液有還原性，測(cè)定不含細(xì)胞，但含有XTT 的待測(cè)溶液在450 nm 處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入XTT，如果吸光度相對(duì)較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次，然后加入新的100 μl 培養(yǎng)基和50 μl XTT 工作液進(jìn)行檢測(cè)。
3. 用酶標(biāo)儀檢測(cè)前請(qǐng)確?？變?nèi)沒(méi)有氣泡，否則會(huì)干擾測(cè)定。
4. 為保證您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

操作方法
1. 96 孔板加入細(xì)胞100μL/孔（約1×104），置37℃ 5%CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24 小時(shí)。2.加入適當(dāng)濃度的受試化合物。3.將96 孔板在37℃，含5% CO2 空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4. 向各孔中加入50 μl 的XTT 檢測(cè)工作液。
5. 37℃下孵育1~4 小時(shí)。
6. 酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度。

結(jié)果分析
1. 細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（完全培養(yǎng)基加X(jué)TT 工作液，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（完全培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加X(jué)TT 工作液，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
2. 求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)。
 

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