檢測原理:
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測技術。特異性抗小鼠 IL-10抗體預包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本和生物素化的檢測抗體,經(jīng)過孵育,樣本中存在的IL-10與固相抗體和檢測抗體結合,形成免疫復合物。洗滌去除未結合的物質(zhì)后,加入辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素(Streptavidin-HRP)。洗滌后,加入顯色底物,避光顯色。加入終止液終止反應,在450 nm波長(參考校正波長540nm或570nm)測定吸光度值。
檢測類型:雙抗夾心法
形式:預包被96孔板
檢測樣本類型:細胞上清液,血清,血漿
上樣量:100ul
試劑盒組分:
預包被96孔板、標準品、抗小鼠 IL-10檢測抗體、稀釋用緩沖液、顯色液(A、B)、洗滌液、終止液、SA-HRP、封板膜和說明書一份。
靈敏度:1.8 pg/mL
檢測范圍:31.2 - 2,000 pg/mL
回收率范圍:95-103%
保存方法:2-8℃
標準曲線圖
背景:
小鼠白細胞介素-10(IL-10)又稱為細胞因子合成抑制因子(CSIF)。 它是 IL-10 α-螺旋細胞因子家族的成員之一, 該分子家族中還包括 IL-19、 IL-12、 IL-22、 IL-24 以及IL-26/AK155。 許多激活的造血干細胞、 肝臟星狀細胞、 角質(zhì)化細胞和胎盤細胞滋養(yǎng)層均分泌 IL-10。 人 IL-10 在小鼠細胞中具有活性, 但小鼠 IL-10 卻不作用于人類細胞。 成熟小鼠 IL-10 與大鼠 IL-10 的氨基酸同源性為 85%, 與牛、 犬、 馬、 貓、人、 羊、 豬的氨基酸同源性為 70~77%。 成熟小鼠 IL-10 是一個分子量為 36 kDa 的非共價結合的同源二聚體, 含有兩個鏈內(nèi)二硫鍵。
IL-10 通過由 II 型細胞因子受體 IL-10 Rα 和 IL-10β 組成的異聚體受體復合物發(fā)揮其生物活性。 IL-10 Rα是一個 110 kDa 的跨膜糖蛋白, 在淋巴細胞、 天然殺傷細胞、 巨噬細胞、 單核細胞、 星形膠質(zhì)細胞、 腸上皮細胞、 細胞滋養(yǎng)層以及活化的肝星狀細胞中表達, 而 75 kDa 的 IL-10Rβ卻在生物體內(nèi)廣泛表達。 IL-10 二聚體先結合兩個 IL-10 Rα鏈, 進一步結合兩個 IL-10 Rβ鏈。IL-10 Rβ不直接與 IL-10 結合,但參與信號轉(zhuǎn)導。IL-10 Rβ分別與 IL-20 Rα 、IL-22 Rα1 和 IL-28 Rα形成 IL-22、IL-26、IL-28 和 IL-29 的受體復合物。
IL-10 參與抑制和激活作用的免疫調(diào)節(jié)。 IL-10 作為抗炎癥的細胞因子是通過抑制Th1 細胞和 Th17 細胞的激活和擴張, 同時促進 M2 巨噬細胞的形成。免疫抑制調(diào)節(jié) T 細胞和 B 細胞的表達對 Treg 細胞增殖有重要作用(19)。 在腫瘤微環(huán)境中, IL-10 抑制調(diào)節(jié) T 細胞和髓系來源抑制細胞的增殖。 IL-10 誘導瘤內(nèi)物質(zhì)的累積并激活 CD8+ T 細胞。 IL-10 在限制關節(jié)炎癥中的組織損傷, 促進損傷后肌肉再生長過程中發(fā)揮重要保護作用, 但也促成持久性病毒感染。 在修格蘭氏癥候群(唾液) 和原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)淋巴瘤中 IL-10 的含量有所升高。
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