外泌體 DNA-RNAout

產品及特點
本外泌體是指包含了復雜 RNA 和蛋白質的小膜泡 (40-100nm)。多種細胞在正常及 病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。其主要來源于細胞內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體，經 多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中 。所有培養(yǎng)的細胞類型均可分泌外泌 體，且外泌體天然存在于體液中，包括血液、唾液、尿液、腦脊液和乳汁中。 有關他們 分泌和攝取及其組成、“運載物”和相應功能的精確分子機制剛剛開始研究。但從外泌 體提取核酸（主要是 RNA）非常棘手，為此本公司開發(fā)于外泌體核酸（DNA 和 RNA） 純化試劑。本產品具有下列特點：

1. 一管式操作，在同一試管中完成，減少樣品丟失。

2. 沉淀法，不使用離心柱，能有效避免小 RNA 的丟失。

3. 能同時提取 RNA（包括 RNA 和 miRNA）和 DNA。

4. 回收率達到 90%以上，高于絕大部分基于離心柱的提取方法。
規(guī)格及成分 成 份 編 號 小扁盒包裝 
外泌體核酸提取溶液 A LM180807a 30 mL 外泌體核酸提取溶液 B LM180807b 35 mL 外泌體核酸提取溶液 C LM180807c 50 mL RNase-free 水 LM80403 1 mL 使用手冊 LM180807sc 1 份

運輸及保存 常溫運輸保存，但外泌體核酸提取溶液 A 長期保存需要放 4℃。有效期一年。

自備試劑 外泌體。

使用方法一、備外泌體（本試劑盒不提供相關試劑） 注意：自備的外泌體需要立即使用或放-80℃長期保存。用于核酸提取的外泌體可以 是沉淀，也可以是重懸液。 二、外泌體核酸提取

1. 從冰箱取出外泌體核酸提取溶液 A 放室溫或握在手上融化，直到沒有任何晶體。

2. 標記 1.5-2 mL 螺旋蓋塑料離心管(如 Sarstedt CAT#:782.694.006)，為避免污染， 建議不要使用壓蓋式塑料離心管。好在每個管蓋上做個標記，以在下步離心時有 意將標記方向朝向心面或離心面。

3. 將不超過 200μL 的外泌體重懸液加入到標記好的塑料離心管中。

4. 每管中加入 600μL 外泌體核酸提取溶液 A，蓋上蓋子后振蕩數(shù)秒混勻。

5. 室溫放置 3 分鐘。

6. 加入 0.7 mL 外泌體核酸提取溶液 B，旋緊蓋后振蕩 30 秒混勻。

7. 14,000 g 室溫離心至少 15 分鐘。注意：離心時如果把標記固定朝向心面或離心面， 則在后面的操作均得按此朝向進行離心。

8. 小心移棄上清，注意不要觸及管底和管壁離心面的核酸沉淀（此時可能看不見）。

9. 加入 1.0 mL 外泌體核酸提取溶液 C, 振蕩數(shù)秒.

10. 14,000 g 室溫離心 5 分鐘。注意：離心管標記的朝向要跟上面的一致。

11. 小心移棄上清，注意不要觸及管底和管壁離心面的核酸沉淀（可能在離心管內壁的 離心面呈膜狀）。

12. 再短暫離心數(shù)秒, 用移液器移棄殘留液體（約 50 μL）。

13. 加入 200 μL RNase-free 水，用移液槍仔細吹打離心管管底和管壁離心面的膜狀沉 淀。如果溶液稍呈混濁狀屬于正常。注意：所得溶液即為外泌體核酸溶液。如果只 需要 RNA，必須去除 DNA，則另外用自備的 RNase-free DNase 對 DNA 污染進 行降解。反之如果只需要 DNA，必須去除 RNA，則另外用自備的 DNase-free RNase 對 RNA 污染進行降解。

14. 直接取適量用于后續(xù)實驗。樣品可以室溫放置 2 小時，也可保存于-80℃保存一個月。 

5. 無毒環(huán)保，不需要使用苯酚和氯仿等有毒的有機溶液。

6. 本產品只能用于科研，不能。用于臨床