一管式病毒DNA-RNAout

產(chǎn)品及特點(diǎn) 本產(chǎn)品是基因整合一管式病毒 DNAOUT和一管式病毒 RNAOUT兩產(chǎn)品而得，專門用于從血清(血漿)等液體樣品中同時(shí)提取病毒 DNA (如 HBV DNA)和病毒 RNA (如 HCV RNA 和 HIV RNA)的產(chǎn)品。本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn)：

1. 回收率高，可以達(dá)到 90%以上，高于絕大部分基于離心柱的提取方法?？梢愿?QIAGEN 的同類產(chǎn)品媲美。

2. 靈敏度高，通過 PCR 檢測到病毒 DNA 的最終靈敏度可以達(dá)到 30 拷貝/mL樣品，通過 RT-PCR 檢測到病毒 RNA 的最終靈敏度可以達(dá)到 50 拷貝/mL樣品。

3. 一管式操作，減少了樣品污染的可能。

4. 一站式套裝，除樣品外客戶不需要準(zhǔn)備任何試劑，降低了實(shí)驗(yàn)誤差。

5. 安全無毒，不需要使用苯酚和氯仿等有機(jī)溶液。

6. 處理量大，如果加上病毒離心富集步驟，最多可以處理 1.5 mL 液體病毒樣品。

7. 與 PCR、熒光 PCR、RT-PCR、熒光 RT-PCR 等
規(guī)格及成分 成 份 編 號 小扁盒包裝 
一管式病毒 DNA-RNAout 溶液 A 80101a 30 mL 一管式病毒 DNA-RNAout 溶液 B 80101b 40 mL 一管式病毒 DNA-RNAout 溶液 C 80101c 50 mL 一管式病毒 DNA-RNAout 溶液 D 80101d 10 mL 使用手冊 80101sc 1 份

運(yùn)輸及保存 常溫運(yùn)輸和保存，但一管式病毒 DNA-RNAout 溶液 A 長期保存（一月以上）最

好放 4℃，有效期一年。溶液 B 和溶液 C 具有揮發(fā)性，使用后需要將瓶蓋擰緊。

自備試劑 無

使用方法

1. 將 0.1-0.2 mL 液體樣品轉(zhuǎn)移到 1.5 mL 旋蓋離心管中。如果需要富集樣品中的病毒，可以先將 1.5 mL 液體樣品轉(zhuǎn)移到 1.5 mL 旋蓋離心管中,然后 4℃24,000 g 離心 60 分鐘，移棄 1.3 mL 上清液后繼續(xù)操作下一步的操作。

2. 加入 0.6 mL 一管式病毒 DNA-RNAout 溶液 A，蓋上蓋子后振蕩 3-5 秒. 注意: 一管式病毒 DNA-RNAout 溶液 A 用前需 37℃-65℃水浴融化并充分搖勻后方可使用。

3. 室溫靜置 10 分鐘。

4. 加入 0.6 mL 一管式病毒 DNA-RNAout 溶液 B，蓋上蓋子后振蕩 3-5 秒。

5. 15,000 g 室溫離心 15 分鐘。強(qiáng)烈建議在離心管管壁上用記號筆做簡單標(biāo)記以區(qū)別離心面和向心面。

6. 小心移棄上清。注意不要觸及管底的 DNA 和 RNA 沉淀。

7. 加入 1.0 mL 一管式病毒 DNA-RNAout 溶液 C，振蕩數(shù)秒后 15,000 g 室溫離心 5 分鐘。注意：將離心管放入離心機(jī)時(shí)一定要離心面向外。

8. 移棄上清，注意不要觸及管底的 DNA 和 RNA 沉淀。

9. 短暫離心數(shù)秒, 注意：將離心管放入離心機(jī)時(shí)一定要離心面向外。

10. 小心移棄殘留上清（殘留的一管式病毒 DNA-RNAout 溶液 C 會(huì)影響后續(xù)反應(yīng)）。此時(shí)離心面的管壁上將有可見的膜狀沉淀。

11. 加入 100-200 μl 一管式病毒 DNA-RNAout 溶液 D，用移液槍仔細(xì)吹打離心管管底和管壁的膜狀沉淀，使其溶解。溶解液混濁或有少量不溶物是正?，F(xiàn)象。不要離心只取上清使用，因?yàn)椴蝗艹恋砦镏泻?DNA 和 RNA，必須取混合液使用（哪怕很渾濁）。

12. 直接取適量樣品用于 PCR 或 RT-PCR，也可短期保存于-20℃或-80℃。

使用效果

DNA 病毒圖注：用本產(chǎn)品和市場上某同類產(chǎn)品分別提取 0.2 mL HBV 陽性血漿(含 1000

拷貝/mL HBV)，DNA 溶于 200 ul 溶液 D 中，取 5 ul 進(jìn)行熒光 PCR(使用

MJ Research 的 CHROMO4 熒光 PCR 儀)。紅和綠線表示本產(chǎn)品，藍(lán)線表示市場上某同類產(chǎn)品。RNA 病毒 

圖注：用本產(chǎn)品和市場上進(jìn)口 Q 公司同類產(chǎn)品分別提取 0.2 mL 培養(yǎng)的 B 型流感病毒上清液(含 1000 拷貝/mL 病毒)，RNA 溶于 200 uL 溶液 D 中，取10 uL 進(jìn)行熒光 PCR(50 uL 體系，使用 MJ Research 的 CHROMO4 熒光PCR 儀)。紅線表示本產(chǎn)品，藍(lán)線表示進(jìn)口的 Q 公司同類產(chǎn)品。