??????WB,Western?blot;IP,Immunoprecipitation;IC,Immunocytochemistry;IF,Immunofluorescence.
??????H, human; M, mouse; Mk, monkey.
??????本p53抗體(p53?antibody)為進(jìn)口分裝，用經(jīng)過適當(dāng)修飾的人重組p53為抗原制備而成的抗p53小鼠單克隆抗體?？寺√枮锽P53-12。
??????本p53抗體可以識別人、小鼠、大鼠和猴子的p53，其他種屬未經(jīng)測試。本抗體可以檢測一些高表達(dá)p53的腫瘤細(xì)胞內(nèi)源性的總p53蛋白水平。本抗體較難檢測到正常成纖維細(xì)胞中的p53。本抗體識別的是p53近N端部分，可以識別p53/T complex。
??????p53是一種腫瘤抑制蛋白，在細(xì)胞對DNA損傷或基因組異常響應(yīng)過程中起關(guān)鍵作用。p53激活可以導(dǎo)致細(xì)胞周期阻滯(cell cyc
le arrest)，DNA修復(fù)或細(xì)胞凋亡。MDM2是p53的E3 ligase，可以導(dǎo)致p53的泛素化修飾并被蛋白酶體降解。p53可以被多種蛋白激酶在多個位點(diǎn)磷酸化修飾。DNA損傷誘導(dǎo)的p53?Ser15和Ser20磷酸化可以減弱p53和其負(fù)調(diào)控因子MDM2的結(jié)合。p53可以被ATM，ATR和DNA-PK等在Ser15和Ser37位磷酸化，從而抑制p53的泛素化降解，促進(jìn)p53的激活和積累。Chk1和Chk2可以磷酸化p53的Ser20，促進(jìn)p53的四聚化，增強(qiáng)其穩(wěn)定性和活性。p53的Ser46磷酸化和其誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡密切相關(guān)。p53的Ser392可以被CAK磷酸化，該位點(diǎn)磷酸化和p53的抑制生長功能及其DNA結(jié)合和轉(zhuǎn)錄激活有關(guān)。p53可以被p300和CBP乙酰化修飾，可以被Sirt1去乙酰化修飾。p53的乙酰化修飾可以促進(jìn)其在應(yīng)激反應(yīng)中的累積和激活。
??????配套提供了Western一抗稀釋液，可以用于Western檢測時的一抗稀釋。
??????建議抗體使用時的稀釋比例如下(實(shí)際使用時需根據(jù)抗原水平的高低作適當(dāng)調(diào)整)：

??????本抗體如果用于常規(guī)的Western檢測，至少可以檢測20次。
包裝清單：

保存條件：
??????p53抗體-20℃保存，Western一抗稀釋液-20℃或4℃保存，一年有效。Western一抗稀釋液優(yōu)先推薦4℃保存，長期不使用可以考慮-20℃保存，但凍融可能會導(dǎo)致出現(xiàn)輕微的渾濁和少量不溶物。
注意事項(xiàng)：
??????對于本抗體，Western檢測時一抗要4℃緩慢搖動過夜，如果僅短時間與一抗孵育檢測效果較差。
??????本抗體檢測的目的蛋白的分子量比較大，需注意選擇濃度較低的膠，并需注意大分子量蛋白轉(zhuǎn)膜通常比較困難。
??????在Western實(shí)驗(yàn)后，請注意回收稀釋的抗體?；厥盏目贵w在進(jìn)行Western實(shí)驗(yàn)時至少可以重復(fù)使用10次。稀釋后的抗體，包括已經(jīng)使用過的稀釋抗體，4℃保存。
??????回收后重復(fù)使用的抗體，使用方法同新鮮稀釋的抗體。如果在重復(fù)使用過程中發(fā)現(xiàn)抗體出現(xiàn)輕微混濁現(xiàn)象，可以10000g離心1-3分鐘，取上清用于后續(xù)檢測。如果回收的抗體出現(xiàn)明顯的絮狀物或長霉長菌等情況，則可以考慮廢棄該抗體。
? ? ? 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
??????為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。