大鼠胞質(zhì)溶膠 Cornin (RLCC) 是一種抗有絲分裂物質(zhì),報(bào)道了進(jìn)一步的純化和表征。方法和結(jié)果:使用 Sephadex G-50 柱層析從粗 RLCC 中純化 I (純化的 RLCC) 超過(guò) 10 倍,對(duì)受精海膽卵和小鼠成纖維細(xì)胞的分裂顯示出顯著的抑制作用。觀察到級(jí)分 I 為一個(gè)點(diǎn),通過(guò)薄層凝膠過(guò)濾估計(jì)分子量約為 25,000。組分 I 含有蛋白質(zhì) (92%) 和 RNA (8%),但抗有絲分裂活性幾乎不受胰腺 RNase 處理的影響。通過(guò) SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳將組分 I 的蛋白質(zhì)分成兩個(gè)條帶,分子量分別為 10,000 和 15,000。結(jié)論:Fraction I 對(duì)受精海膽卵第一次分裂和小鼠 L 細(xì)胞增殖的 50% 抑制劑量分別為約 2.5 X 10 (-5) g/ml 和 5 X 10 (-4) g/ml。餾分 I 的產(chǎn)量約為 35 mg 來(lái)自 100 g 大鼠肝臟。
Cornin 作為生物活性多肽的抗有絲分裂作用。I. Cornin 的生化性質(zhì)。
本研究旨在探討環(huán)烯醚萜苷 Cornin 在大腦中動(dòng)脈閉塞 (MCAO) 和再灌注 (I/R) 誘導(dǎo)的實(shí)驗(yàn)性腦缺血中的療效,并闡明其潛在機(jī)制。方法和結(jié)果:成年雄性 Sprague-Dawley 大鼠 MCAO 1 h,再灌注 23 h。行為測(cè)試用于評(píng)估對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的損害。評(píng)估腦梗死體積和組織病理學(xué)損傷,以評(píng)估腦病理生理變化。分光光度法測(cè)定超氧化物歧化酶 (SOD) 和谷胱甘肽-過(guò)氧化物酶 (GPx) 的活性。還測(cè)定了丙二醛 (MDA) 的含量、活性氧 (ROS) 的產(chǎn)生以及腦線粒體的呼吸控制率和呼吸酶。結(jié)果表明,Cornin 顯著降低了神經(jīng)功能缺損評(píng)分,減少了腦梗死體積和退行性神經(jīng)元。同時(shí),Cornin 顯著增加腦 ATP 含量,改善線粒體能量代謝,抑制 MDA 含量升高和 ROS 生成,減弱腦線粒體中 SOD 和 GPx 活性的降低。結(jié)論:這些發(fā)現(xiàn)表明,山茱萸對(duì)腦缺血損傷具有保護(hù)潛力,其保護(hù)作用可能是由于改善了腦線粒體功能及其抗氧化特性。
磷酸化環(huán)磷酸腺苷反應(yīng)元件結(jié)合蛋白 (Phospho-CREB) 在心肌缺血的發(fā)病機(jī)制中起重要作用。我們從馬鞭草 L 果實(shí)中分離出環(huán)烯醚萜苷 Cornin,研究其對(duì)體內(nèi)心肌缺血和再灌注 (I/R) 損傷的影響,并闡明其體外潛在機(jī)制。方法和結(jié)果:研究 Cornin 對(duì)細(xì)胞活力的影響,以及體外缺氧 H9c2 細(xì)胞中磷酸化 CREB 和磷酸化 Akt 的表達(dá),以及體內(nèi)心肌 I/R 損傷。Cornin 以濃度依賴性方式顯著減弱 H9c2 細(xì)胞中缺氧誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性。在缺氧條件下,用 Cornin (10 μM) 處理 H9c2 細(xì)胞可阻斷磷酸化 CREB 和磷酸化 Akt 表達(dá)的降低。用 Cornin (30 mg/kg, iv) 治療大鼠可保護(hù)它們免受心肌 I/R 損傷,如梗死體積減少、血流動(dòng)力學(xué)改善和心肌損傷嚴(yán)重程度降低所示。cornin 處理還減弱了缺血性心肌組織中磷酸化 CREB 和磷酸化 Akt 表達(dá)的降低。結(jié)論:這些數(shù)據(jù)表明,由于磷酸化 CREB 和磷酸化 Akt 表達(dá)的增加,Cornin 發(fā)揮保護(hù)作用。
在本研究中,我們?cè)噲D闡明 Cornin 是否有助于誘導(dǎo)血管生成及其機(jī)制。為此,我們研究了 Cornin 在體外對(duì)人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞系 (HBMEC) 增殖、侵襲和管形成的作用。方法和結(jié)果:為了研究機(jī)制,使用磷酸肌醇 3 激酶 (PI3K) -Akt 抑制劑 LY294002 、內(nèi)皮一氧化氮合酶 (eNOS) 抑制劑 L-NAME 、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子 (VEGF) 拮抗劑 sFlt-1 和 VEGF 受體阻滯劑 SU-1498。通過(guò) MTT 測(cè)試 HMBEC 增殖。采用劃痕粘附試驗(yàn)評(píng)估侵襲能力。進(jìn)行基質(zhì)膠管形成試驗(yàn)以測(cè)試毛細(xì)管形成能力。通過(guò) Western blot 檢測(cè) HMBEC 中 PI3K-Akt-eNOS-VEGF 通路的激活。結(jié)論:我們的數(shù)據(jù)表明,Cornin 通過(guò)增加增殖、侵襲和管形成在體外誘導(dǎo)血管生成。VEGF 表達(dá)被 Cornin 增加,并被 HMBEC 中的 VEGF 拮抗劑 sFlt-1、LY294002 和 L-NAME 抵消。Cornin 增加管形成,并被 VEGF 受體阻滯劑-SU1498、LY294002 和 L-NAME 抵消。可能表明 Cornin 通過(guò)編程的 PI3K/Akt/eNOS/VEGF 信號(hào)軸在體外誘導(dǎo)血管生成。
CAS號(hào)548-37-8對(duì)應(yīng)的是馬鞭草苷,以下是對(duì)其的詳細(xì)介紹:
中文名:馬鞭草苷
英文名:Verbenalin/cornin
別名:山茱萸苷、麼木苷等
化學(xué)式:C17H24O10
分子量:388.37
CAS號(hào):548-37-8
外觀:白色粉末
密度:1.50±0.1 g/cm3(Predicted)
熔點(diǎn):180~182°C(另有說(shuō)法為182.5°C)
沸點(diǎn):610.1±55.0 °C(Predicted)
比旋光度:D25 -173°(water)
閃點(diǎn):219.4°C
蒸汽壓:1.95E-17 mmHg at 25°C
溶解度:易溶于水,微溶于乙醇、醋酸乙酯和丙酮,幾乎不溶于氯仿和乙醚。也可溶于甲醇、DMSO等有機(jī)溶劑。
折射率:1.59
酸度系數(shù):12.79±0.70(Predicted)
在潮濕的環(huán)境中穩(wěn)定性較差,易被熱分解,不適宜在高溫條件下加熱。
甜味劑:馬鞭草苷是一種天然存在的甜味物質(zhì),其甜度約為蔗糖的200~300倍,但卡路里含量很低,且不會(huì)引起牙本質(zhì)脫礦作用,對(duì)血糖影響也較小,因此可以代替蔗糖,用于制作低糖或無(wú)糖的口香糖、口腔清新劑和藥品等。
實(shí)驗(yàn)室用途:作為分析標(biāo)準(zhǔn)品或?qū)φ掌?,用于藥品、化學(xué)物質(zhì)的鑒別、檢查、含量測(cè)定等。
應(yīng)在2~8°C條件下,干燥、避光、密封儲(chǔ)存。
總的來(lái)說(shuō),CAS號(hào)548-37-8對(duì)應(yīng)的馬鞭草苷是一種具有廣泛應(yīng)用前景的天然甜味物質(zhì)和化學(xué)試劑。
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王玲