背景及概述[1]
與DNA提取相似,RNA的分離是去除像蛋白質(zhì)或者脂類一樣的其他分子。使用有機(jī)溶劑將RNA與這些污染物分開。然而,在處理RNA時(shí)有幾個(gè)方面與DNA不同。多數(shù)細(xì)胞類型在它們的細(xì)胞質(zhì)中與mRNA并存含有大量的RNA酶,它通常是分析提取的關(guān)鍵。
為了阻止無(wú)處不在的RNA酶對(duì)mRNA的降解,分離必須即刻進(jìn)行并且細(xì)胞裂解物必須盡快置于RNA酶變性的環(huán)境中。強(qiáng)變性的異硫氰胍(GTC)可以被使用。新鮮的樣品或收集的組織可以被均漿并且大量地溶解在4mol/L的GTC溶液中。隨后RNA經(jīng)CsCl密度梯度離心沉淀并且和不能沉淀的DNA分離。接下來可用不同的方法來進(jìn)一步純化RNA。另一種方法,RNA也可以在變性鹽溶液(例如4mol/L的氯化鋰)中從均漿的組織中抽提。隨后,進(jìn)行酚抽提去除均漿物中的蛋白質(zhì),然后用醇沉淀RNA。
特性[1]
植物總RNA大量提取試劑盒采用高效、專一結(jié)合核酸的離心吸附柱和獨(dú)特的緩沖系統(tǒng),可從植物組織中快速提取總RNA,可同時(shí)處理大量不同樣品。植物總RNA大量提取試劑盒30-40分鐘內(nèi)即可完成反應(yīng),操作簡(jiǎn)單,提取迅速,溶液毒性小,實(shí)驗(yàn)安全。提取的總RNA純度極高,沒有蛋白和其他雜質(zhì)的污染。
植物總RNA大量提取試劑盒特點(diǎn):針對(duì)植物材料獨(dú)特配置,操作更簡(jiǎn)單、流程更優(yōu)化;配有高效的DNaseⅠ,可有效去除DNA污染;配有CS過濾柱,可有效去除其它雜質(zhì);RNA純度更高,無(wú)雜質(zhì)殘留,特別適合于對(duì)純度要求很高的下游實(shí)驗(yàn);操作安全可靠,無(wú)需酚抽提,無(wú)需氯化銫梯度離心,無(wú)需氯化鋰或乙醇沉淀。
主要參考資料
[1] 分子生物技術(shù)導(dǎo)論