背景及概述^[1][2]

酵母葡聚糖是一種擁有良好生理功能的免疫調(diào)節(jié)劑（非特異性免疫增強(qiáng)劑），具有增強(qiáng)免疫力、抗腫瘤、抗菌消炎、抗氧化、促進(jìn)傷口愈合、抗輻射、降低血脂等生理功效。從酵母細(xì)胞壁提取得到的酵母葡聚糖是不溶于水的，通過(guò)飼料添加劑方式添加在飼料中，能增強(qiáng)動(dòng)物免疫力，改善動(dòng)物健康狀況，增加其抗應(yīng)激能力，從而提高生產(chǎn)性能，增加經(jīng)濟(jì)效益。

制備^[1]

一種可溶性酵母葡聚糖的制備方法。采用本方法制備的酵母葡聚糖可以有效溶于水中，并具有優(yōu)良的免疫活性，同時(shí)本方法具有簡(jiǎn)便、快速、高效、不使用有機(jī)溶劑和強(qiáng)酸、強(qiáng)堿試劑的特點(diǎn)。制備方法，采用機(jī)械化學(xué)方法，在固相體系中，通過(guò)固態(tài)化學(xué)反應(yīng)對(duì)酵母葡聚糖進(jìn)行化學(xué)修飾和改性。具體過(guò)程如下：

（1）將粉末狀酵母葡聚糖原料與固態(tài)小分子修飾試劑按質(zhì)量比1:1~10混合好后，采用機(jī)械化學(xué)方法處理4~60min；

（2）將步驟（1）處理后得到的葡聚糖混合物溶于水中得到溶解液，葡聚糖混合物與水的質(zhì)量比為1:5~20；如果產(chǎn)生沉淀，則通過(guò)離心除去不溶物，從而得到溶解液；

（3）對(duì)步驟（2）得到的溶解液進(jìn)行透析或超濾，除去多余的修飾試劑，得到酵母葡聚糖溶液。

實(shí)施例1：機(jī)械化學(xué)法制備磷酸化酵母葡聚糖方案1

酵母葡聚糖與磷酸鈣以質(zhì)量比1:1混合均勻后，采用行星磨進(jìn)行機(jī)械化學(xué)處理，功率為900 W，處理時(shí)間為4 min；處理后的酵母葡聚糖混合物以質(zhì)量比1:5溶解于水后，使用離心機(jī)在4000 rpm轉(zhuǎn)速下離心20 min，其中42%的酵母葡聚糖溶于水，58%的酵母葡聚糖不溶于水；將溶于水的溶解液用水進(jìn)行多次透析，以除去多余的磷酸化合物。透析后的酵母葡聚糖濃度為12.1 mg/ml，磷酸基團(tuán)取代度為0.4%。

本發(fā)明制備方法屬于機(jī)械化學(xué)方法，機(jī)械化學(xué)是一種不同于熱化學(xué)、電化學(xué)和光化學(xué)的第四種化學(xué)活化形式，是指固體顆粒物質(zhì)在摩擦、碰撞、沖擊、剪切等機(jī)械力作用下，使晶體結(jié)構(gòu)及物化性能發(fā)生改變，把機(jī)械能高效轉(zhuǎn)化成固體物質(zhì)內(nèi)能，提高固體物質(zhì)化學(xué)活性，反應(yīng)過(guò)程只需低反應(yīng)溫度和較低的能量消耗，并且可以實(shí)現(xiàn)清潔生產(chǎn)。

應(yīng)用^[3]

CN201210444971.6報(bào)道了一種酵母葡聚糖銅鑼燒及其制作方法，所述酵母葡聚糖銅鑼燒包括兩片圓盤狀餅皮和夾在兩餅皮間的餡料，采用本發(fā)明制作方法制得的銅鑼燒相對(duì)于傳統(tǒng)配方在餅皮中添加了酵母葡聚糖這種功能性成分，使銅鑼燒具有增強(qiáng)免疫力、抗輻射和調(diào)節(jié)血脂的功能，更加營(yíng)養(yǎng)健康。還可以在配方中加入發(fā)芽米粉與傳統(tǒng)的面粉配合使用，增加維生素、礦物質(zhì)和微量元素，輔助并增強(qiáng)酵母葡聚糖的降血脂作用。也可以輔以其它風(fēng)味物質(zhì)，例如朗姆酒、奶油來(lái)調(diào)節(jié)口感，使本發(fā)明的銅鑼燒兼具口感風(fēng)味和功能性。

檢測(cè)方法^[4]

一種酵母葡聚糖含量檢測(cè)方法，采用高效液相色譜分析(HPLC)進(jìn)行檢測(cè)，HPLC的色譜條件為：采用糖柱或氨基柱，以純化水或乙腈水溶液作為流動(dòng)相進(jìn)行等度洗脫，根據(jù)HPLC檢測(cè)結(jié)果，獲得酵母葡聚糖含量。

a)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：準(zhǔn)確稱取葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品用水溶解并定容，然后稀釋成不同濃度，用液相色譜分析儀測(cè)定得到葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線。

b)提?。簩⒋郎y(cè)樣品和氫氧化鈉加入純凈水與無(wú)水乙醇的混合溶劑中，搖勻后在 沸水浴中加熱；然后立即進(jìn)行離心，去除上清液，沉淀加入40～50℃的純水中渦旋混勻，去 除上清液，得到供試品；

c)樣品水解處理：將鹽酸溶液加入步驟b)中得到的沉淀中，渦旋、混合均勻，得到 均質(zhì)的懸浮液，然后將懸浮液置于30℃水浴中加熱45分鐘，然后將其放入115℃烘箱中，加 熱1小時(shí)，取出后迅速冷卻；將冷卻后的水解液用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)至pH 6～7，并加水定容并用濾膜過(guò)濾。

d)在與標(biāo)準(zhǔn)溶液相同的色譜條件下，將過(guò)膜后的樣品溶液和對(duì)照品溶液分別注入 色譜儀中，記錄各色譜峰的保留時(shí)間和峰面積。采用保留時(shí)間進(jìn)行定性，峰面積進(jìn)行定量；

e)計(jì)算獲得待測(cè)樣品中酵母葡聚糖的含量。

主要參考資料

[1] CN201210336178.4一種可溶性酵母葡聚糖的制備方法

[2] CN201010581329.3 一種獸用酵母葡聚糖注射液

[3] CN201210444971.6一種酵母葡聚糖銅鑼燒及其制作方法

[4] CN201711191160.9 一種添加在蛋白粉中酵母葡聚糖的檢測(cè)方法