背景及概述^[1][2]

艾瑞布林(eribulin)是一種從海洋生物海綿Halichondriaokadai中提取的大環(huán)內(nèi)酯類化合物halichondrinB的衍生物，是一種具有化學(xué)活性的物質(zhì)。其藥用作用機(jī)理是通過直接與微管蛋白結(jié)合抑制有絲分裂，通過抑制微管生長，抑制癌細(xì)胞生長而發(fā)揮治療作用。該藥物臨床藥用成份為艾瑞布林甲磺酸，商品名為Halaven，由日本Eisai公司研發(fā)，于2010年11月15日在美國首次上市，美國食品藥品管理局(FDA)批準(zhǔn)Halaven(甲磺酸艾日布林)用于治療至少已接受過兩次晚期疾病化療的轉(zhuǎn)移性乳腺癌患者，該藥品隨后在新加坡、歐盟、瑞士、日本等國家陸續(xù)上市。

適應(yīng)證^[2]

艾瑞布林適用于既往至少接受2次化療(蒽環(huán)類化療藥和紫杉烷類化療藥為基礎(chǔ)的化療方案)的轉(zhuǎn)移性乳腺癌患者。

藥理^[2]

艾瑞布林為新型微管動力學(xué)抑制劑，具有獨特作用機(jī)制，能直接與微管蛋白結(jié)合，抑制微管蛋白聚合和微管的組建。本品通過對微管的抗有絲分裂作用，破壞有絲分裂紡錘體，阻滯在細(xì)胞G2/M周期，抑制微管生長，促使細(xì)胞凋亡從而發(fā)揮抗腫瘤作用。本品0.25～4.0mg/m2劑量范圍的人體藥動學(xué)為線性模式。平均消除半衰期約為40h，平均分布容積為43～114L/m2，平均清除率為1.16～2.42L(h·m2)。

本品濃度為100～1000ng/mL時人體血漿蛋白率為49%～65%。多次用藥的藥動學(xué)與單次用藥相似，每周用藥未見體內(nèi)藥物蓄積，其藥動學(xué)參數(shù)與患者性別、年齡及種族無關(guān)。本品抑制人肝微粒體內(nèi)細(xì)胞色素P4503A4(CYP3A4)，增加血漿CYP3A4底物濃度。體外試驗表明，本品是藥物流出轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白P-gp的弱抑制劑。本品主要隨糞便排泄(為用藥劑量的82%)，其次隨尿液排泄(為用藥劑量的9%)本品主要以原形隨糞便和尿液排出體外，糞便和尿液中的含量分別為88%和91%。體外Amesi試驗顯示，本品無致突變性，但小鼠及大鼠體內(nèi)突變試驗呈陽性。尚未見致癌性研究報道。對人體生殖功能的影響尚不明確。

臨床評價^[2]

一項納入762例轉(zhuǎn)移性乳腺癌患者的多中心標(biāo)簽開放性隨機(jī)臨床研究中，患者平均年齡55歲(27～85歲)；92%為白種人，64%來自北美、西歐和澳大利亞，25%來自東歐和俄羅斯，11%來自拉丁美洲和南非；患者既往均至少接受過2次化療，并且在末次化療6個月內(nèi)有病情變化。研究評價指標(biāo)包括應(yīng)答率和生存期。本品治療組(n=508)第1、8d靜脈輸注本品1.4mg/m2，21d為一療程，平均接受5個療程(療程范圍1～23個)治療。對照組(n=254)97%患者接受其他化療藥物單藥治療，3%患者接受激素治療，使用的化療藥物包括長春瑞濱、吉西他濱、卡培他濱、紫杉烷類和蒽環(huán)類藥物等。結(jié)果顯示，本品治療組總應(yīng)答率為11%(95%CI：8.6%～14.3%)，對照組為3.9%(95%CI：1.9%～7.1%)。本品治療組中位生存期為13.1個月(95%CI：11.8～14.3)，對照組為10.6個月(95%CI：9.3～12.5)。本品治療組患者最常見不良反應(yīng)為(發(fā)生率>25%)中性粒細(xì)胞減少、貧血、疲勞、脫發(fā)、周圍神經(jīng)病變、惡心和便秘。

另一項在日本進(jìn)行的單向多中心標(biāo)簽開放性Ⅲ期臨床研究，納入80例晚期轉(zhuǎn)移性乳腺癌患者，既往曾接受蒽環(huán)類抗腫瘤藥和紫杉烷類藥物化療，于第1個療程(21d)的第1、8d靜脈輸注本品1.4mg/m2，研究終點為總應(yīng)答率。結(jié)果顯示，總應(yīng)答率為21.3%(95%CI：12.9%～31.8%)，病情穩(wěn)定者30例(37.5%)，臨床有效率(包括完全應(yīng)答+部分應(yīng)答+病情穩(wěn)定≥6個月的患者所占比例)為27.5%；應(yīng)答中位持續(xù)時間為3.9個月(95%CI：2.8～4.9)；疾病無進(jìn)展生存期為3.7個月(95%CI：2.0～4.4)，總生存期為11.1月(95%CI：7.9～15.8)。最常見的治療相關(guān)性3～4級不良反應(yīng)，包括中性粒細(xì)胞減少(95.1%)、白細(xì)胞減少(74.1%)、中性粒細(xì)胞減少性發(fā)熱(13.6%)以及3度外周神經(jīng)病變(3.7%)。本品治療轉(zhuǎn)移性乳腺癌的臨床療效和耐受性良好，可延長既往治療無效的轉(zhuǎn)移性乳腺癌重癥患者的生存期。本品對其他患有頑固性或晚期實體瘤患者(如前列腺癌、腫瘤切除術(shù)耐受的轉(zhuǎn)移性卵巢癌、非小細(xì)胞肺癌、軟組織肉瘤)的臨床研究顯示出良好的療效。與其他抗腫瘤藥物如吉西他濱、順鉑、表柔比星、曲妥珠單抗、多西他賽以及長春瑞濱聯(lián)用有協(xié)同作用。

不良反應(yīng)^[2]

艾瑞布林最常見不良反應(yīng)(發(fā)生率>25%)有中性粒細(xì)胞減少、外周神經(jīng)病變、貧血、疲勞、脫發(fā)、惡心和便秘。其他不良反應(yīng)(發(fā)生率5%～10%)：流淚增多；消化不良、腹痛和口干等胃腸道癥狀；注射部位周邊水腫；上呼吸道感染；低血鉀癥；肌無力；味覺障礙、眩暈、失眠和抑郁；皮疹。尚無禁忌癥。

注意事項^[2]

注意監(jiān)測外周血細(xì)胞計數(shù)，尤其是中性粒細(xì)胞計數(shù)。視中性粒細(xì)胞計數(shù)變化適當(dāng)調(diào)整劑量。若中性粒細(xì)胞計數(shù)<1000/mm3以及血小板計數(shù)<75000/mm3時應(yīng)停止用藥。周圍神經(jīng)病變易導(dǎo)致患者終止接受本品治療，應(yīng)注意觀察。一項納入26例患者的非對照標(biāo)簽開放性研究顯示，本品可能引起QT間期延長。故有先天性長QT間期綜合征、充血性心衰、心動過緩和電解質(zhì)異常者使用本品治療時需監(jiān)測心電圖，并避免使用延長QT間期藥物，包括Ⅰa和Ⅲ類抗心律失常藥。

尚無對胚胎及胎兒的毒性試驗研究，故妊娠期婦女、準(zhǔn)備懷孕婦女及哺乳期婦女慎用。尚未確定18歲以下兒童和65歲以上老年人使用本品的安全性及有效性，兒童與老人應(yīng)慎用。嚴(yán)重肝、腎受損者慎用。使用本品過量時尚無已知的解毒方法，故需防止藥物過量使用。配制本品時注意用0.9%氯化鈉注射液稀釋，不能將本品稀釋于葡萄糖溶液或含葡萄糖的輸液內(nèi)，不能與其他藥物同時靜脈輸注。本品或其稀釋液應(yīng)置于冰箱內(nèi)冷藏，且本品稀釋液只供使用一次，未用完部分應(yīng)丟棄。

用法與用量^[2]

21d為一療程，第1、8d輸注本品，每次推薦劑量為1.4mg/m2，2～5min輸完。

對肝受損和中度腎受損患者(肌酐清除率為30～50mL/min)需減少劑量。推薦劑量：輕度肝受損者：1.1mg/m2；中度肝受損者：0.7mg/m2；中度腎受損患者：1.1mg/m2。每次用藥前應(yīng)視周圍神經(jīng)病變和全血細(xì)胞計數(shù)調(diào)整劑量。

制劑^[2]

注射劑，每支2mL含本品1mg(0.5mg/mL)。

制備^[3]

步驟1：ER-811475：(1，2，3，4，5，6，11，14，17S，19，21，23，25，26，27，31，34)-25-[(2)-2，3-二羥基丙基]-2，5-二羥基-26-甲氧基-19-甲基-13，20-雙(亞甲基)-24，35，36，37，38，39-六氧雜七環(huán)[29.3.1.13，6.14，34.111，14.117，21.023，27]三十九烷-8，29-二酮

將ER-118046(0.580kg，0.439mol，1eq)在正庚烷中的溶液在≤50℃下真空濃縮。將殘留物溶解于無水四氫呋喃(THF)(19.7L)中并在10-25℃下用用咪唑鹽酸鹽(0.142kg，1.36mol，3.1eq)緩沖的四丁基氟化銨(TBAF)(在THF中的1.0M溶液，2.85L，2.85mol，6.5eq)處理。在證實C34/C35-二醇的水平(≤3%)后，加入甲苯(7.6kg)和水(8.7kg)以便萃取。將水層分離并用甲苯(5.0kg)和THF(5.2kg)萃取。將水層排干，且將有機(jī)層與萃取液合并。將合并的有機(jī)層在≤35℃下真空濃縮。在濃縮期間，游離的戊醇轉(zhuǎn)化成ER-811475和ER-811474。當(dāng)游離戊醇的殘留水平≥5%時，加入乙腈(ACN)(3.3kg)和水(0.42kg)且在&lt；35℃下真空共沸，直至該水平降到&lt；5%。在完成后，將殘留物在真空中與乙腈進(jìn)一步共沸(4.6kg)&lt；35℃。將殘留物用二氯甲烷(7.7kg)稀釋且在&lt；35℃下真空共沸，以給出ER-811475和ER-811474的混合物(4：1)。將烯酮ER-118046(135g)在正庚烷中的溶液在41℃或更低真空濃縮。將殘留物溶解于無水四氫呋喃(THF)(2.03L)和，-二甲基乙酰胺(675ml)中，且隨后在16℃-18℃下用經(jīng)咪唑HCl(31.5g)緩沖的四丁基氟化銨(TBAF)(在THF中的0.97mol/L溶液，685ml)處理。將混合物在16℃-18℃下攪拌47小時，且反應(yīng)進(jìn)展通過HPLC監(jiān)測。在反應(yīng)中間體C34/C35-二醇的殘留水平達(dá)到3%或更低時，加入乙腈(608ml)和水(203ml)。將混合物在16℃-18℃下攪拌45小時，直至游離戊醇的殘留水平降到5%以下。包含ER-811475/ER-811474的反應(yīng)混合物(兩種非對映異構(gòu)體的混合物18：1)可在不進(jìn)一步純化的情況下用于下一階段。

步驟2：ER-076349：(1，3，6，9，12，14，16，18，20，21，22，26，29，31，32，33，35，36)-20-[(2)-2，3-二羥基丙基]-21-甲氧基-14-甲基-8，15-雙(亞甲基)-2，19，30，34，37，39，40，41-八氧雜九環(huán)[24.9.2.13，32.13，33.16，9.112，16.018，22.029，36.031，35]四十一烷-24-酮

將ER-811475與ER-811474的混合物(0.329kg，0.439mol，1eq)溶解于二氯甲烷(DCM；7.7kg)中并在10-20℃下用在二氯甲烷(1.7kg)中的對甲苯磺酸吡啶鎓(PPTS；0.607kg，2.42mol，5.5eq)溶液處理。將所得混合物在10-20℃下攪拌。主要非對映異構(gòu)體反應(yīng)以提供二醇ER-076349，且次要非對映異構(gòu)體ER-811474保持未反應(yīng)。當(dāng)ER-811475的殘留水平&gt；1%時，加入在二氯甲烷(0.15kg)中的另外PPTS(0.055kg)，并在10-20℃下繼續(xù)反應(yīng)。在完成后，將反應(yīng)混合物直接裝載到用甲基叔丁基醚(MTBE)(200L)預(yù)平衡的硅膠柱上。將反應(yīng)器用二氯甲烷(3.1kg)進(jìn)一步?jīng)_洗，且將沖洗液裝載到該柱上。柱用以下物質(zhì)依次洗脫：(1)甲基叔丁基醚(125L)，(2)在乙腈中的96%v/v甲基叔丁基醚(125L)，(3)在乙腈中的50%v/v甲基叔丁基醚(250L)，和(4)乙腈(225L)。合并所要的部分，在&lt；35℃下真空濃縮，并在真空中在&lt；35℃下與乙腈(4.6kg)共沸。將殘留物溶解于乙腈(0.32kg)和水(0.54kg)中并用ER-076349作為晶種(0.27g，0.36mmol)和另外的水(2.70kg)進(jìn)行結(jié)晶。將所得晶體過濾，且監(jiān)測濾液的重量，直至結(jié)晶溶劑的回收比達(dá)到≥80%。將晶體用水(2.7kg)進(jìn)一步洗滌并溶解于二氯甲烷(10.8kg)中，且將溶液在≤25℃下真空濃縮。

將殘留物用乙腈(2.1kg)稀釋并在≤40℃下真空濃縮，以給出ER-076349(根據(jù)ER-118046，55-75%產(chǎn)率)。向ER-811475(與ER-811474混合)中加入咪唑HCl(85.5g)在水(68ml)中的溶液。將溶液在28℃或更低下真空濃縮。將殘留物溶解于EtOH(2.69kg)中。將所得混合物在21℃-24℃下攪拌43小時。主要非對映異構(gòu)體(ER-811475)反應(yīng)以提供二醇ER-076349，且次要非對映異構(gòu)體(ER-811474)保持未反應(yīng)。通過HPLC監(jiān)測反應(yīng)物中ER-811475的消失。在ER-811475的殘留水平達(dá)到低于1%之后，將溶液在37℃或以下更低下真空濃縮。加入甲苯(1.35L)，且將溶液在37℃或更低下真空共沸。加入四氫呋喃(THF)(4.20kg)、甲苯(1.76kg)和水(2.03L)并萃取。分離水層，且將有機(jī)層用水(1.01L)洗滌。將水層合并且用甲苯(1.18kg)和THF(1.20kg)萃取。將水層排干，且將有機(jī)層與萃取液合并。將合并的有機(jī)層在37℃或更低下真空濃縮。加入甲苯(675mL)，且將溶液在38℃或更低下真空共沸。將濃縮物用二氯甲烷(1.01L)稀釋且隨后裝載到用甲基叔丁基醚(大于55.1L)預(yù)平衡過的硅膠柱(5.511kg)上。將柱用甲基叔丁基醚(40.8L)、在乙腈中的95%v/v甲基叔丁基醚(24.9L)、在乙腈中的40%v/v甲基叔丁基醚(83.6L)和乙腈(76.3L)依次洗脫以除去未反應(yīng)的中間體、反應(yīng)雜質(zhì)和來自ER-804028的攜帶雜質(zhì)。將所要的部分合并并在32℃或更低下真空濃縮以給出ER-076349(測定62.02g，兩步的產(chǎn)率為84.0%)。將殘留物在29℃或更低下與乙腈(0.533kg)真空共沸且可在不進(jìn)一步純化的情況下將其用于下一階段。

步驟3：艾瑞布林：(1，3，6，9，12，14，16，18，20，21，22，26，29，31，32，33，35，36)-20-[(2)-3-氨基-2-羥基丙基]-21-甲氧基-14-甲基-8，15-雙(亞甲基)-2，19，30，34，37，39，40，41-八氧雜九環(huán)[24.9.2.13，32.13，33.16，9.112，16.018，22.029，36.031，35]四十一烷-24-酮

將ER-076349(0.259kg，0.354mol，1eq)溶解于甲苯(4.7kg)中并在&lt；25℃下真空共沸。將殘留物用甲苯(4.5kg)稀釋以給出用于監(jiān)測水含量的甲苯溶液。水含量通過Karl-Fischer(KF)滴定法測量。如果KF值&gt；125ppm，則將溶液在&lt；25℃下真空共沸并用甲苯(4.5kg)稀釋，直至水含量降到≤125ppm。如果KF值達(dá)到目標(biāo)值，則將溶液濃縮并溶解于無水二氯甲烷(6.5kg)中。加入在無水二氯甲烷(84.1g)中的2，4，6-三甲基吡啶(0.172kg，1.27mol，4eq)和吡啶(0.0014g，0.018mol，0.05eq)，并冷卻混合物。將TsO(0.124kg，0.380mol，1.07eq)在無水二氯甲烷(3.4kg)中的溶液以維持反應(yīng)溫度≤-10℃的速率加到反應(yīng)混合物中，且將混合物在≤-10℃下攪拌。當(dāng)ER-076349的殘留量&lt；3%或相應(yīng)雙甲苯磺酸鹽的產(chǎn)率大于4%時，反應(yīng)混合物通過加入水(1.0kg)中止。將混合物加熱，且隨后在10-30℃下連續(xù)地加入異丙醇(IPA)(20.5kg)和氫氧化銨(NHOH；25.7kg)。在環(huán)氧化物完全消耗(目標(biāo)≤0.85%；如果需要，則加入額外的NHOH)后，將反應(yīng)混合物在&lt；30℃下真空濃縮。向殘留物中加入二氯甲烷(20.7kg)和足夠量的緩沖溶液NaHCO/NaCO/水(9/9/182w/w/w；不超過5.166kg)并萃取。分離有機(jī)層且將水層用二氯甲烷(8.6kg)萃取。將有機(jī)層分離并與萃取液合并。

將合并的有機(jī)層在&lt；30℃下真空濃縮。將濃縮物用乙腈(4.0kg)稀釋且隨后裝載到用乙腈(200L)預(yù)平衡的硅膠柱上。該柱用以下物質(zhì)依次洗脫：(1)乙腈(100L)，(2)90.0/7.5/2.5v/v/v乙腈/水/200mMNHOAc水溶液(152.4L)，(3)85.8/11.7/2.5v/v/v乙腈/水/200mMNHOAc水溶液(152.4L)，(4)83.5/14.0/2.5v/v/v乙腈/水/200mMNHOAc水溶液(152.6L)和(5)80.0/17.6/2.4v/v/v乙腈/水/200mMNHOAc水溶液(&gt；100.2L)。將所要部分合并且在≤40℃下真空濃縮，同時通過加入NHOH維持內(nèi)部pH在5.5-9.0。向殘留物中加入二氯甲烷(13.9kg)和足夠量的緩沖溶液NaHCO/NaCO/水(9/9/182w/w/w；不超過15.51kg)并萃取。分離有機(jī)層且將水層用二氯甲烷(8.7kg)萃取。將有機(jī)層分離并與萃取液合并。將合并的有機(jī)層在&lt；30℃下真空濃縮。將殘留物溶解于在正戊烷中的75%v/v無水二氯甲烷(6.12kg)中并過濾。將濾液在&lt；30℃下真空濃縮，用乙腈(2.1kg)稀釋，并在≤35℃下真空濃縮以給出艾瑞布林(75-95%產(chǎn)率)。

主要參考資料

[1] CN201711223897.4艾瑞布林中間體的合成方法

[2] 抗腫瘤藥甲磺酸艾瑞布林(eribulinmesylate)

[3] CN201480066353.X可用于合成軟海綿素B類似物的方法