介紹
Fmoc-N'-甲基三苯甲基-L-賴氨酸(化學式:C41H39NO4)是一種非天然的氨基酸衍生物,它在肽合成中具有重要應(yīng)用。它是由賴氨酸(Lysine,Lys)的側(cè)鏈氨基(ε-NH2)被三苯甲基(trityl,Trt)保護基團保護,同時N'-末端的氨基(α-NH2)被9-芴甲氧羰基(Fmoc)保護。它的外觀通常為棕色結(jié)晶固體。它在水中溶解性較差,但可溶于有機溶劑如二氯甲烷、丙酮等。Fmoc和Trityl基團的存在使得氨基酸在合成過程中的氨基保持穩(wěn)定,防止不必要的副反應(yīng)。在肽合成中,F(xiàn)moc基團可以通過脲酸(piperidine)處理被移除,而Trityl基團則需要更強烈的條件,如酸性條件下的三氟乙酸(TFA)處理。它可以用于固相肽合成(SPPS)和液相肽合成(LPPS)。
圖一 Fmoc-N'-甲基三苯甲基-L-賴氨酸
應(yīng)用
向Fmoc-Lys(Mtt)-OH (5克,8.00毫摩爾)的THF (25毫升)溶液中加入EEDQ (2.97克,12毫摩爾),然后加入(4-氨基苯基)甲醇(0.986克,8毫摩爾),混合物攪拌過夜,然后濃縮,殘余物用EtOAc (150毫升)稀釋。用飽和nah CCR 1洗滌有機相。鹽水用硫酸鎂干燥并濃縮。將粗產(chǎn)物在硅膠(0-70 % EtOAc的己烷溶液)上純化,得到(9H-芴-9-基)甲基(S)-(6-((二苯基(對甲苯基)甲基)氨基)-1-((4-(羥甲基)苯基)氨基)-1-氧代己-2-基)氨基甲酸酯 (5.84 g,100 %產(chǎn)率)[1]。
圖二 Fmoc-N'-甲基三苯甲基-L-賴氨酸的合成應(yīng)用
合成
向5.0升玻璃反應(yīng)瓶中加入Nα-(9-芴甲氧羰基)賴氨酸鹽酸鹽(200克,0.5摩爾),向5.0升玻璃反應(yīng)瓶中加入Nα-甲氧羰基賴氨酸鹽酸鹽(200克,0.5摩爾),DIEA (387克,3.0摩爾)和甲醇(2.0升)。在室溫下攪拌直至澄清,在0℃下,將4-甲基三苯甲基氯(580 g,2.0 mol)的四氫呋喃溶液(1.0 L)緩慢滴加到反應(yīng)溶液中,并在約1.0 h內(nèi)完成添加。在0℃下繼續(xù)反應(yīng)2.0 h,在室溫下反應(yīng)6.0 h,HPLC分析顯示原料已完全反應(yīng)。減壓濃縮溶劑,用甲醇和正己烷分離粗產(chǎn)物。用正己烷洗滌甲醇相6至8次。濃縮甲醇相后,用乙酸乙酯萃取粗產(chǎn)物。用飽和鹽水洗滌,將有機相蒸發(fā)至干,得到粗棕色固體Fmoc-N'-甲基三苯甲基-L-賴氨酸[2]。
圖三 Fmoc-N'-甲基三苯甲基-L-賴氨酸的合成
參考文獻
[1]THOMAS ,D. J,JONES , et al.PYRROLOBENZODIAZEPINE ANTIBODY CONJUGATES[P].US2018067179,2019-06-27.
[2]沈軍偉,張建齊,羅福林.一種Nε-叔丁氧羰基-Nα-芴甲氧羰基-Nε-甲基-賴氨酸的制備方法[P].江蘇:CN201810324964.X,2018-08-10.