背景^[1-6]

Recombinant Rhesus Macaque RANTES/CCL5（重組猴RANTES/CCL5）將猴RANTES/CCL5基因與猴T淋巴細(xì)胞融合重組，再誘導(dǎo)重組細(xì)胞表達(dá)的目的蛋白。實(shí)驗(yàn)主要用于猴RANTES/CCL5相關(guān)研究中的免疫組化和WB等實(shí)驗(yàn)。CCL5是分類為趨化細(xì)胞因子或趨化因子的8kDa蛋白質(zhì)。CCL5對T細(xì)胞，嗜酸性粒細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞具有趨化性，并且在將白細(xì)胞募集到炎癥部位中起積極作用。

在T細(xì)胞釋放的特定細(xì)胞因子（即IL-2和IFN-γ）的幫助下，CCL5還誘導(dǎo)某些天然殺傷（NK）細(xì)胞的增殖和活化，形成CHAK（CC-趨化因子激活的殺傷細(xì)胞））細(xì)胞。它也是一種艾滋病毒-從CD8+T細(xì)胞釋放的抑制因子。該趨化因子已定位于人類的17號(hào)染色體。

RANTES首先在尋找T細(xì)胞活化后“晚期”（3-5天）表達(dá)的基因中被鑒定。隨后確定其為CC趨化因子并在100多種人類疾病中表達(dá)。通過Kruppel樣因子13（KLF13）在R淋巴細(xì)胞中調(diào)節(jié)RANTES表達(dá)。RANTES與相關(guān)趨化因子MIP-1α和MIP-1β一起被鑒定為由活化的CD8+T細(xì)胞和其他免疫細(xì)胞分泌的天然HIV抑制因子。

最近，RANTES蛋白已被設(shè)計(jì)用于體內(nèi)由乳桿菌屬細(xì)菌生產(chǎn)，該溶液正在開發(fā)成可能的抑制HIV進(jìn)入的局部殺菌劑。受激活調(diào)節(jié)正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子(regulated upon activation normalT cell expressed andsecreted,RANTES),是趨化性細(xì)胞因子CC亞族成員。由于能夠誘導(dǎo)白細(xì)胞向炎癥部位浸潤,RANTES最初被認(rèn)為是一種典型的趨化性細(xì)胞因子。

近年來逐漸發(fā)現(xiàn)了RANTES一些新的生物學(xué)特性。RANTES是有效的白細(xì)胞激活劑,參與很多炎性反應(yīng)。RANTES不但能夠抑制HIV病毒的復(fù)制,在一定環(huán)境下也能增強(qiáng)復(fù)制。RANTES僅含68個(gè)氨基酸殘基,其來源廣泛,NK細(xì)胞以及γδ-T細(xì)胞均可組成性地表達(dá)RANTES;炎癥反應(yīng)中CD8+T細(xì)胞、上皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞和血小板可分泌RANTES;病毒感染可引起某些細(xì)胞RANTES的表達(dá)升高,如呼吸道合胞病毒感染可引起人鼻粘膜及腺樣上皮細(xì)胞RANTES的表達(dá)升高;流感病毒感染可誘導(dǎo)人支氣管組織和鼻息肉的上皮細(xì)胞表達(dá)RANTES;某些腫瘤細(xì)胞在一定的條件下也可表達(dá)RANTES,如傷寒沙門氏菌感染或細(xì)胞因子可刺激HT-29、Caco-2細(xì)胞表達(dá)RANTES。

RANTES有多種受體,包括CCR1、CCR3、CCR4、CCR5,與不同受體結(jié)合的親和力稍有不同。RANTES和其受體結(jié)合可引起白細(xì)胞的遷移,介導(dǎo)炎癥反應(yīng)的發(fā)生;對單核細(xì)胞、NK細(xì)胞、記憶T細(xì)胞、DC細(xì)胞、嗜酸粒細(xì)胞、嗜堿粒細(xì)胞均有強(qiáng)烈的趨化作用。RANTES和其受體相互作用有兩個(gè)不同的位點(diǎn),其中一個(gè)結(jié)合受體,另一個(gè)介導(dǎo)信號(hào)的轉(zhuǎn)導(dǎo),其結(jié)合位點(diǎn)位于非N末端序列,RANTES和其不同受體的相互作用是互不相同而有其特異性的。

Arg17是其結(jié)合CCR1所必需的,Phe-12是其結(jié)合CCR3所必需的,而Phe-12和Ile-15則是其結(jié)合CCR5所必需的。RANTES的信號(hào)傳導(dǎo)位點(diǎn)位于N末端序列,因?yàn)镹末端缺失的RANTES突變體可和其靶細(xì)胞結(jié)合,不能誘導(dǎo)趨化和鈣離子的內(nèi)流。但參與不同受體介導(dǎo)信號(hào)傳導(dǎo)的N末端殘基并不相同,如CCR1(Pro-2、Asp-6、Thr-7)、CCR3(Pro-2、Tyr-3)、CCR5(Ty r-3、Asp-6)。

應(yīng)用^[7][8]

重組猴RANTES/CCL5可用于促炎作用的研究：

RANTES表達(dá)水平的升高與多種炎性疾病有關(guān),如同種異體移植排斥反應(yīng)、動(dòng)脈粥樣硬化、關(guān)節(jié)炎、特應(yīng)性皮炎、炎性呼吸道病(哮喘)、遲發(fā)性超敏反應(yīng)、腎小球腎炎、子宮內(nèi)膜異位癥、某些神經(jīng)病變(如阿爾茨海默病)和某些惡性腫瘤。CD8+T細(xì)胞、上皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞和血小板分泌RANTES是炎癥反應(yīng)的一個(gè)特征。LPS可刺激成纖維細(xì)胞分泌RANTES、活化和吸引嗜酸粒細(xì)胞,介導(dǎo)呼吸道疾病的發(fā)生。

RANTES在過敏病人可誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞向鼻粘膜的遷移。在這些病理過程中,RANTES促進(jìn)了白細(xì)胞向炎癥部位的浸潤。RANTES不僅可引起白細(xì)胞的遷移,還可介導(dǎo)淋巴細(xì)胞的遷移和歸巢。RANTES可調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)的進(jìn)程。以三硝基苯磺酸(TNBS)腸內(nèi)給藥誘導(dǎo)大鼠的結(jié)腸炎,不同的時(shí)間檢測腸道組織中幾種趨化蛋白的表達(dá)。

MCP-1、MCP-2和CINC的表達(dá)水平在急性期升高,而RANTES的表達(dá)水平只有在慢性期才顯著升高,同時(shí)腸道中的單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的數(shù)目也大為升高,CCR1和CCR5受體表達(dá)也顯著升高。慢性期中,使用Met-RANTES(CCR1和CCR5的拮抗劑)可使損傷大為減輕,同時(shí)單核細(xì)胞、肥大細(xì)胞和中性粒細(xì)胞的募集也大為減少,某些大鼠的炎癥反應(yīng)及損傷甚至完全消失。

參考文獻(xiàn)

[1]Inngjerdingen M et al.Blood,2001,97(2):367—375

[2]Biswas P et al.Eur J Immunol,2000,30(8):2172—2180

[3]Ali S et al.Am J Pathol,2000,157(1):313—321

[4]Ward SG et al.Biochem J,1998,333(3):457—470

[5]Appay V et al.Trends in Immunology,2001,22(2):83—87

[6]Ajebor MN et al.J Immunol,2001,166(1):552—558

[7]Hadida F et al.J Immunol,1999,163(3):1105—1109

[8]許從峰,熊思東,楊英珍,陳灝珠.RANTES生物功能的多樣性[J].生命的化學(xué),2001(05):353-354.