背景[1-3]
呂氏堿性美藍染色液是一種常用于微生物學(xué)實驗室的染色劑,主要用于酵母菌等微生物的鏡檢染色。
呂氏堿性美藍染色液的主要成分是美藍(Methylene Blue),也稱為亞甲基藍或次甲基藍。美藍是一種氧化還原指示劑,它的氧化型為藍色,而在活細胞內(nèi)由于新陳代謝作用,美藍會被還原成無色的還原型。因此,當(dāng)使用呂氏堿性美藍染色液對微生物進行染色時,活細胞由于具有較強的還原能力而呈現(xiàn)無色,而死細胞或衰老的細胞由于還原能力弱或消失,會被染成藍色或淡藍色。
在使用呂氏堿性美藍染色液進行染色時,通常需要將涂片在火焰上固定,然后滴加染液,染色1至3分鐘,之后水洗并待干后進行鏡檢。染色結(jié)果中,活細胞應(yīng)為無色,死細胞或受損細胞則會顯現(xiàn)出藍色或淺藍色。
呂氏堿性美藍染色液
呂氏堿性美藍染色液(0.1%)主要由美藍、酒精、氫氧化鉀等組成,其中美藍的終濃度為0.1%。這種染色液在科研領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用,尤其在酵母菌的染色觀察中,不僅可以觀察酵母菌的形態(tài),還可以區(qū)分活細胞和死細胞。其原理在于活細胞具有新陳代謝作用,能使美藍從藍色的氧化型變?yōu)闊o色的還原型,因此活細胞內(nèi)的美藍呈無色;而死細胞或衰老的細胞還原能力弱或消失,被美藍染成藍色或淡藍色。
此外,呂氏堿性美藍染色液還可以用于多種組織切片、涂片染色。然而,由于該染色液易于氧化,其染色結(jié)果不宜長久保存。因此,它主要用于科研目的,不適用于臨床診斷或其他用途。
在使用呂氏堿性美藍染色液時,必須遵循正確的操作步驟,注意避免劇烈涂抹以免破壞細胞,并確保染液量適中。同時,由于該染色液可能含有對光線敏感、容易分解的成分,應(yīng)保存在棕色容器中,并置于室溫下避光保存,以保證其穩(wěn)定性和有效性。
呂氏堿性美藍染色液為科研用試劑,對人體可能具有一定的毒性,因此應(yīng)避免皮膚直接接觸溶液,以防有毒物質(zhì)造成身體傷害。如需了解更多關(guān)于呂氏堿性美藍染色液的信息,建議查閱相關(guān)科研文獻或咨詢專業(yè)科研人員。
應(yīng)用[4][5]
呂氏堿性美藍染色液可以用于雞沙氏住白細胞蟲體染色技術(shù)的優(yōu)化
對雞沙氏住白細胞蟲病的流行病學(xué)、病原學(xué)、血液生化學(xué)等方面進行深入研究,并對不同動物模型感染性進行了初步構(gòu)建,以期為沙氏住白細胞蟲的進一步研究提供科學(xué)依據(jù)。
方法1.在雞沙氏住白細胞蟲配子體染色方面,采用12種不同染色方法:革蘭氏染色法、呂氏堿性美藍染色液美藍染色法、抗酸染色法、瑞特氏染色法、姬姆薩染色法、復(fù)紅染色法、阿伯特染色法、瑞—姬混合染色法、立克次氏體染色法、梅古氏染色法、梅—姬染色法、伊紅—亞甲基蘭染色法對雞沙氏住白細胞蟲配子體染色,并比較染色結(jié)果。2.在流行病學(xué)調(diào)查方面,通過血液涂片染色對湘西自治州雞沙氏住白細胞蟲感染情況,與雞品種、年齡、飼養(yǎng)管理情況進行了深入研究;并對傳播媒介-蚋采用昆蟲網(wǎng)進行捕捉、辨種,進行初步研究。3.在不同動物模型探討方面,采集患病雞只血液按照不同感染方式(腹腔接種、靜脈接種、皮下接種、混合接種)接種雛雞、雛鴨,觀察雞沙氏住白細胞蟲首現(xiàn)期、高峰期、消退起情況,高峰期配子體數(shù)目及雌雄配子體比例,配子體在外周血液中晝夜變化。4.在動物感染后生化指標的測定方面,對雛雞、雛鴨進行每周體重測量,外周血液學(xué)指標測定:感染后70天血清生化指標測定、臟器重量的測量、臨床病理學(xué)檢查。
結(jié)果1.瑞—姬混合染色法、梅—姬染色法、伊紅—亞甲基蘭染色法效果最好;其次為革蘭氏染色法、呂氏堿性美藍染色液美藍染色法、瑞特氏染色法、姬姆薩染色法、梅古氏染色法、立克次氏體染色法等染色方法;抗酸染色法、復(fù)紅染色法、阿伯特染色法染色效果較差。呂氏堿性美藍染色液美藍染色法由于其染色時間短、操作簡單、層次對比明顯、結(jié)構(gòu)完整性好,雖然高倍鏡下清晰度不高,但低倍鏡下檢出率高。瑞—姬混合染色法、梅—姬染色法、伊紅—亞甲基蘭染色法為復(fù)染色法,雖然染色時間長,但層次對比明顯、結(jié)構(gòu)最完整、最清晰。
參考文獻
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