簡(jiǎn)述

梓醇是地黃最主要有效成分之一，是其“滋陰”作用的有效活性成分，為一種不很穩(wěn)定的環(huán)烯醚萜苷類化合物，常與多種環(huán)烯醚萜苷類成分如桃葉珊瑚苷和胡黃連苷等同時(shí)存在于植物組織中，具有利尿、緩瀉、降血糖、保肝及抗衰老、抑制毛細(xì)血管通透性等多種藥理活性。研究表明，在暫時(shí)缺血情況下，梓醇有顯著的神經(jīng)保護(hù)功能，并發(fā)現(xiàn)梓醇能激活腦神經(jīng)元，可以治療因外傷、代謝障礙、腦缺血和帕金森氏病等引起的腦神經(jīng)病。此外，梓醇也具有抗發(fā)炎活性，并已證實(shí)會(huì)增加腎上腺產(chǎn)生的雄性激素的生產(chǎn)[1]。

按照化學(xué)命名法，梓醇又名脫對(duì)羥基苯甲酸梓昔，其分子式為C₁₅H₂₂O₁₀，分子量為362.33。應(yīng)用半薄切片，組織化學(xué)和透射電子顯微鏡觀察相結(jié)合的方法，實(shí)驗(yàn)研究了梓醇在地黃塊根中的貯存位置及其細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)。結(jié)果表明，地黃塊根的韌皮部和木質(zhì)部的薄壁細(xì)胞是梓醇的貯存場(chǎng)所[2]。

測(cè)定

采用HPLC測(cè)定地黃及其制品中梓醇的含量。方法：以Inertsil ODS-2為固定相，水-乙腈(99.5:0.5)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)210 nm。結(jié)果：梓醇與其他峰均能達(dá)到基線分離，其色譜峰形好。梓醇的進(jìn)樣量在0.484～4.84 μg時(shí)與峰面積呈良好的線性關(guān)系(Y=7.491×104X-3.535×102,r=0.9999)，平均回收率99.0%，方法精密度 RSD=1.3%(n=6)。結(jié)論：所用測(cè)定方法簡(jiǎn)便，準(zhǔn)確，重復(fù)性好，可作為質(zhì)控方法[3]。

生理活性研究

降血糖作用

實(shí)驗(yàn)研究地黃梓醇對(duì)四氧嘧啶致糖尿病小鼠血糖的影響。方法：雄性KM小鼠尾靜脈注射四氧嘧啶60mg/kg建立糖尿病動(dòng)物模型。梓醇以200，100，50mg/kg劑量灌胃給藥2周，觀察其對(duì)糖尿病小鼠血糖，血脂和糖耐量的影響。結(jié)果：梓醇能明顯降低四氧嘧啶致糖尿病小鼠的血糖水平，改善糖耐量和血脂水平，并且呈劑量依賴關(guān)系。結(jié)論：地黃梓醇對(duì)四氧嘧啶致糖尿病小鼠有顯著的降血糖作用[4]。

減輕細(xì)胞損傷

觀察梓醇對(duì)氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)誘導(dǎo)EA.hy926細(xì)胞炎癥因子的影響，并從核因子-κB(NF-κB)的活化角度探討其可能的作用機(jī)制。方法：將常規(guī)培養(yǎng)的EA.hy926細(xì)胞隨機(jī)分為空白組，梓醇組(0.5 mmol·L-1)，ox-LDL組(100 mg·L-1)，梓醇高，低劑量組(0.5,0.05 mmol·L-1)，各藥物組先孵育24 h，空白組與ox-LDL組給予空白配養(yǎng)基孵育24 h，孵育后加入100 mg·L-1ox-LDL繼續(xù)培養(yǎng)24 h。逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)和蛋白免疫印跡(Western blot)檢測(cè)細(xì)胞中腫瘤壞死因子-α(TNF-α)，血管細(xì)胞黏附分子-1(VCAM-1)mRNA和蛋白的表達(dá)；噻唑藍(lán)(MTT)法檢測(cè)細(xì)胞活性；Hoechst細(xì)胞核染色檢測(cè)細(xì)胞凋亡比率；Western blot和酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)檢測(cè)NF-κB的活化。結(jié)果：與空白組比較，梓醇保護(hù)組細(xì)胞損傷明顯減輕，TNF-α，VCAM-1 mRNA及蛋白表達(dá)均顯著降低，NF-κB活化明顯受抑制，且呈劑量依賴性(P＜0.05)。結(jié)論：梓醇能夠有效減輕ox-LDL誘導(dǎo)EA.hy926細(xì)胞炎癥反應(yīng)，保護(hù)EA.hy926細(xì)胞，其機(jī)制可能與其抑制NF-κB活化有關(guān)[5]。

抑制腦白質(zhì)損傷

實(shí)驗(yàn)探討梓醇對(duì)慢性腦缺血誘導(dǎo)的大鼠腦白質(zhì)損傷的保護(hù)作用及其與Akt通路之間的相關(guān)性。以 18只成年雄性Wistar大鼠為實(shí)驗(yàn)材料，隨機(jī)分為假手術(shù)組(Sha組)，生理鹽水處理組(Veh組)和梓醇處理組(Cat組)，每組6只。以永久性結(jié)扎雙側(cè)頸總動(dòng)脈誘導(dǎo)大鼠慢性腦缺血，Veh組和Cat組大鼠分別腹腔注射生理鹽水和梓醇(5 mg/kg)，連續(xù)10d。慢性缺血30d后，采用盧卡斯快藍(lán)(LFB)染色法和免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)梓醇對(duì)腦白質(zhì)少突膠質(zhì)細(xì)胞凋亡，髓鞘損傷及p-Akt表達(dá)的影響。結(jié)果 ，在Veh組的腦白質(zhì)中，少突膠質(zhì)細(xì)胞凋亡和髓鞘損傷程度明顯增加，與Sha組比較有顯著性差異(P<0.01)。梓醇治療后能明顯降低少突膠質(zhì)細(xì)胞凋亡和髓鞘損傷，上調(diào)p-Akt表達(dá)，其結(jié)果與Veh組比較均有顯著性差異(P<0.05)。根據(jù)以上得出結(jié)論， 梓醇可通過(guò)上調(diào)p-Akt的表達(dá)抑制慢性腦缺血誘導(dǎo)的腦白質(zhì)損傷[6]。

誘導(dǎo)成骨細(xì)胞增殖

檢測(cè)地黃活性成分梓醇對(duì)成骨細(xì)胞株MC3T3-E1細(xì)胞增殖，分化和礦化的影響。制備不同濃度地黃活性成分梓醇提取液，以小鼠成骨細(xì)胞株MC3T3-E1作為藥物篩選的細(xì)胞模型，用MTT法測(cè)定不同濃度的梓醇溶液的促細(xì)胞增殖作用，采用ALP活性和骨鈣素定量檢測(cè)分別觀察不同濃度的梓醇溶液的促細(xì)胞分化作用，以Vonkos-sa鈣化染色法了解不同濃度的梓醇溶液的促細(xì)胞鈣化作用。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，梓醇在1×10-7～1×10-9mol·L-1濃度范圍內(nèi)培養(yǎng)24及48h促進(jìn)成骨細(xì)胞株MC3T3-E1細(xì)胞增殖；梓醇在濃度1×10^-5～1×10^-6mol·L^-148及72h提高成骨細(xì)胞株MC3T3-E1細(xì)胞內(nèi)堿性磷酸酶的活性；梓醇在濃度1×10^-5～1×10^-6mol·L^-1培養(yǎng)8及12d時(shí)能明顯促進(jìn)成骨細(xì)胞MC3T3-E1骨鈣素合成和分泌；梓醇在濃度1×10^-5～1×10^-6mol·L^-1培養(yǎng)19d時(shí)成骨細(xì)胞株MC3T3-E1細(xì)胞的礦化結(jié)節(jié)(mineralized bone nodular structure,MBNS)數(shù)目增多。也就是說(shuō)，梓醇可以提高成骨細(xì)胞株MC3T3-E1增殖和分化能力，它可能是地黃治療骨質(zhì)疏松作用的活性成分之一[7]。

參考文獻(xiàn)

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[2]王太霞,司源,李景原,等.懷地黃塊根內(nèi)含梓醇結(jié)構(gòu)的組織化學(xué)和超微結(jié)構(gòu)研究[J].西北植物學(xué)報(bào), 2005, 25(5):4.DOI:10.3321/j.issn:1000-4025.2005.05.014.

[3]汪程遠(yuǎn),張浩,孟莉,等.HPLC測(cè)定地黃及其制劑中梓醇的含量[J].華西藥學(xué)雜志, 2003, 18(002):134-135.DOI:10.3969/j.issn.1006-0103.2003.02.023.

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[5]劉江月,張代娟,李文濤,等.梓醇對(duì)NF-κB活化減輕ox-LDL誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞損傷的影響[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志, 2016, 22(18):5.DOI:CNKI:SUN:ZSFX.0.2016-18-025.

[6]蔡其燕,姚忠祥.梓醇通過(guò)上調(diào)p-Akt表達(dá)抑制慢性腦缺血誘導(dǎo)的大鼠腦白質(zhì)損傷[J].局解手術(shù)學(xué)雜志, 2013, 022(003):237-240.

[7]武密山,趙素芝,李恩,等.地黃活性成分梓醇對(duì)小鼠成骨細(xì)胞MC3T3-E1增殖、分化和礦化的影響[J].中國(guó)藥理學(xué)通報(bào), 2010, 26(4):5.DOI:CNKI:SUN:YAOL.0.2010-04-023.