蟛蜞菊內(nèi)酯(Wedelolactone, WED)為香豆草醚類，具有多種生物活性，在藥用植物墨旱蓮(Eclipta prostrata L.)、金盞蟛蜞菊(Wedelia calenulacea)、小連翹(Hypericum erectum)中均含有。蟛蜞菊屬植物在亞洲和南美等地區(qū)常用來治療膿毒性休克，肝臟疾病，病毒感染和毒蛇咬傷。蟛蜞菊內(nèi)酯可能是蟛蜞菊和墨旱蓮中發(fā)揮保肝活性的主要化合物之一。本文將介紹蟛蜞菊內(nèi)酯用于治療肺損傷的研究進(jìn)展。

背景

肺纖維化是一種以纖維化及肺實(shí)質(zhì)重塑為特征的漸進(jìn)性疾病，肺成纖維細(xì)胞過度增殖、轉(zhuǎn)分化為肌成纖維母細(xì)胞，分泌大量膠原和基質(zhì)沉積是其重要特征，目前尚無有效的治療方法。

進(jìn)展

專利 CN103816148B 經(jīng)過體內(nèi)、外藥理實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明，蟛蜞菊內(nèi)酯可改善博來霉素誘導(dǎo)小鼠肺纖維化，通過HE、Masson染色觀察肺組織切片、測定肺臟指數(shù)和肺組織中HYP、NO、MDA、TGF-β1等各種指標(biāo)的變化情況，并采用MTT法檢測蟛蜞菊內(nèi)酯對TGF-β1誘導(dǎo)人胚肺成纖維細(xì)胞增殖的抑制作用，測定細(xì)胞中HYP含量變化，綜合評價蟛蜞菊內(nèi)酯的改善肺纖維化的藥理作用。

Juan Zhang 等人^[1]研究了蟛蜞菊內(nèi)酯在巨噬細(xì)胞介導(dǎo)的呼吸系統(tǒng)疾病，特別是急性肺損傷（ALI）中的保護(hù)機(jī)制和分子靶點(diǎn)。

為了發(fā)現(xiàn)蟛蜞菊內(nèi)酯的直接細(xì)胞靶點(diǎn)，研究者使用環(huán)氧活化的瓊脂糖珠結(jié)合WED進(jìn)行了目標(biāo)捕魚實(shí)驗(yàn)。銀染后，～63kDa處出現(xiàn)明顯的蛋白帶，LC-MS/MS分析鑒定為sEH。接著用WB、免疫熒光共定位、IP、細(xì)胞熱位移試驗(yàn)（CETSA）、藥物親和反應(yīng)靶點(diǎn)穩(wěn)定性（DARTS）和MST實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了WED與sEH的直接結(jié)合。sEH的C端具有水解酶活性，在AA代謝中起著關(guān)鍵作用。研究者發(fā)現(xiàn)蟛蜞菊內(nèi)酯顯著抑制了人和小鼠的sEH酶活性，并提高了lps誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞中sEH底物14，15-EET的水平，降低其二醇水平。

研究者接著敲除了sEH進(jìn)行驗(yàn)證，發(fā)現(xiàn)sEH敲除逆轉(zhuǎn)了蟛蜞菊內(nèi)酯在lps刺激的巨噬細(xì)胞中的抗炎和抗氧化作用。為了探索WED在sEH上的結(jié)合位點(diǎn)，進(jìn)行了分子動力學(xué)刺激，發(fā)現(xiàn)WED通過氨基酸殘基Phe362和Gln384的兩個氫鍵相互作用。作者將Phe362和Gln384突變，下拉實(shí)驗(yàn)、CETSA、DARTS顯示突變廢除了WED與she的結(jié)合。在lps刺激的RAW264.7細(xì)胞中，Phe362和Gln384突變也消除了WED的抗炎和抗氧化作用。

最后，研究者研究了蟛蜞菊內(nèi)酯在體內(nèi)抑制sEH和GSK3β的催化活性，并將sEH基因KO驗(yàn)證了WED的肺保護(hù)作用以及對脂多糖誘導(dǎo)的炎癥和氧化應(yīng)激的影響。

參考文獻(xiàn)

[1] Macrophage Inactivation by Small Molecule Wedelolactone via Targeting sEH for the Treatment of LPS-Induced Acute Lung Injury. doi:10.1021/acscentsci.2c01424