背景^[1-5]

蛋白標(biāo)記技術(shù)服務(wù)是生物公司針對客戶的特定需求，幫助客戶選擇最適合的標(biāo)記物或標(biāo)記方式并優(yōu)化標(biāo)記方法最后為客戶提供個性化解決方案，以滿足客戶特定需求的技術(shù)性服務(wù)。

1.蛋白標(biāo)簽：與目的蛋白融合表達，以便于目的蛋白表達、檢測、示蹤和純化的蛋白或多肽。這些標(biāo)簽抗體可以高特異地結(jié)合對應(yīng)的標(biāo)簽融合多肽或蛋白，籍以分離純化和分析檢測目的蛋白。

2.SNAP標(biāo)簽：SNAP標(biāo)簽是可在各種表達載體中商購的自標(biāo)記蛋白標(biāo)簽。SNAP-標(biāo)簽是182殘基多肽（19.4kDa），其可以與任何目的蛋白質(zhì)融合，并且進一步特異性地并且用合適的配體（例如熒光染料）共價標(biāo)記。自推出以來，SNAP-tag已經(jīng)在生物化學(xué)和研究活細胞中蛋白質(zhì)和酶的功能和定位方面發(fā)現(xiàn)了許多應(yīng)用。

3.HA標(biāo)簽蛋白：標(biāo)簽序列YPYDVPDYA，源于流感病毒的紅細胞凝集素表面抗原決定簇，9個氨基酸，對外源靶蛋白的空間結(jié)構(gòu)影響小,容易構(gòu)建成標(biāo)簽蛋白融合到N端或者C端。易于被Anti－HA抗體檢測和ELISA檢測。

4.MYC標(biāo)簽蛋白：MYC標(biāo)簽蛋白是一個含11個氨基酸的小標(biāo)簽，標(biāo)簽序列Glu-Gln-Lys-Leu-Ile-Ser-Glu-Glu-Asp-Leu，這11個氨基酸作為抗原表位表達在不同的蛋白質(zhì)框架中仍可識別其相應(yīng)抗體。Myc tag已成功應(yīng)用Western-blot雜交技術(shù)、免疫沉淀和流式細胞計量術(shù)中,可用于檢測重組蛋白質(zhì)在靶細胞中的表達。

5.FLAG：Flag標(biāo)簽蛋白為編碼8個氨基酸的親水性多肽（DYKDDDDK），同時載體中構(gòu)建的Kozak序列使得帶有FLAG的融合蛋白在真核表達系統(tǒng)中表達效率更高。

6.GST：谷胱甘肽巰基轉(zhuǎn)移酶在解毒過程中起到重要作用，它的天然大小為26KD。由于GST高度可溶，可增加外源蛋白的可溶性，另外GST融合表達系統(tǒng)廣泛應(yīng)用于各種融合蛋白的表達，可提高表達量。GST標(biāo)簽蛋白可直接從細菌裂解液中利用含有還原型谷胱甘肽瓊脂糖凝膠(Glutathione sepharose)親和樹脂進行純化。而且，GST標(biāo)簽蛋白可在溫和、非變性條件下洗脫，因此保留了蛋白的抗原性和生物活性。但GST在變性條件下會失去對谷胱甘肽樹脂的結(jié)合能力，因此不能在純化緩沖液中加入強變性劑如：鹽酸胍或尿素等。

7.H6：His-Tag(HHHHHH)，有6個組氨酸的標(biāo)簽，可插入在目的蛋白的C末端或N末端。由于H6分子量小，不會影響目標(biāo)蛋白的功能，且可以在變性或非離子型表面活性劑存在的條件下純化，無空間位阻效應(yīng)，常用于蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)-DNA相互作用研究。

服務(wù)種類^[6][7][8]

1.放射性同位素標(biāo)記服務(wù)

該服務(wù)能夠為通過大腸桿菌、酵母和SF9（桿狀病毒）和哺乳動物細胞廣范圍表達的重組蛋白，提供穩(wěn)定同位素。我們建立了獨特的蛋白定制同位素標(biāo)記服務(wù)平臺。專業(yè)從事用穩(wěn)定同位素標(biāo)記蛋白，通常有13C，15N或者15N和13C的組合。

同位素標(biāo)記蛋白服務(wù)的分步過程：1.克隆構(gòu)建和生產(chǎn)，2.培養(yǎng)和表達優(yōu)化測試，3.細胞生長和蛋白表達/純化，4.蛋白體外表達，5. 同位素標(biāo)記蛋白分析。

2.生物素標(biāo)記服務(wù)

該服務(wù)在各種學(xué)術(shù)和工業(yè)領(lǐng)域中為客戶提供定制生物素標(biāo)記。能夠滿足生物素標(biāo)記任何蛋白的期望，也可以開發(fā)了多種在體外生物素標(biāo)記的方式。顧客能夠為自己的應(yīng)用選擇特定的的生物素標(biāo)記方式，避免活性損失。

3.其他多種標(biāo)記服務(wù)

例如：熒光素FITC、熒光素RBITC、辣根酶HRP、堿性磷酸酶AP、膠體金標(biāo)記Co-Au、Cy3、Cy5、Cy5.5、Cy7、APC、PE、Alexa Fluor 350、Alexa Fluor 488、Alexa Fluor 555、Alexa Fluor 594、Alexa Fluor 647等。

參考文獻

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