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PUMA Rabbit Monoclonal Antibody

2020/10/25 9:01:40

背景[1][2]

單克隆抗體技術(shù)起源于Kohler等創(chuàng)建的體外鼠源雜交瘤技術(shù)。經(jīng)多年研究,鼠單抗已從單純的生物實(shí)驗(yàn)室科研及臨床診斷發(fā)展到治療性抗體藥物。但鼠單抗的主要缺陷是小鼠免疫系統(tǒng)不能識(shí)別某些免疫原,尤其是鼠源性的免疫原,而且鼠單抗的親和性不如兔來源抗體的親和性高。然而由于沒有發(fā)現(xiàn)兔源性的漿細(xì)胞瘤及病毒體外轉(zhuǎn)染兔B細(xì)胞的技術(shù)困難,直到1995年在c-myc/v-abl轉(zhuǎn)基因兔身上成功地獲得了兔漿細(xì)胞瘤細(xì)胞系,得到了穩(wěn)定的兔-兔雜交瘤,才使兔單克隆抗體技術(shù)有了突破性進(jìn)展。

近年兔單克隆抗體技術(shù)日臻完善,目前商品化的兔單抗已達(dá)數(shù)千種。PUMA 是2001 年Yu、Nakano及Han 3 個(gè)研究小組同時(shí)發(fā)現(xiàn)的促凋亡基因,屬于Bcl-2 家族中的BH3 亞家族中的一員。PUMA 基因定位于19q, 主要通過轉(zhuǎn)錄子PUMAα、β 發(fā)揮促凋亡的作用,可依賴p53 途徑或非依賴p53 途徑促進(jìn)細(xì)胞凋亡。PUMA作為一個(gè)新穎的促凋亡基因,在腫瘤發(fā)生中扮演著重要的角色。在腫瘤細(xì)胞中PUMA促凋亡能力受到抑制而不能有效的建立起來,上調(diào)PUMA在腫瘤細(xì)胞中的表達(dá)可以增加對腫瘤治療的效果。

很多研究都證實(shí)了PUMA是細(xì)胞凋亡必需介導(dǎo)者,具有強(qiáng)大的促凋亡能力,但對于該基因在細(xì)胞凋亡信號(hào)通路及與其他分子間的相互作用等方面還有待于進(jìn)一步深入研究和闡明。隨著時(shí)間的推移將會(huì)更加明確PUMA相關(guān)信號(hào)通路,發(fā)現(xiàn)更多可誘導(dǎo)PUMA 活化的DNA元件、轉(zhuǎn)錄因子以及更多新穎的調(diào)控制,DNA元件和轉(zhuǎn)錄因子誘導(dǎo)PUMA在腫瘤細(xì)胞內(nèi)的表達(dá),可能為治療腫瘤提供新思路。隨著PUMA研究的不斷深入必將給腫瘤的治療帶來更多的希望和驚喜。

PUMA兔單克隆抗體可用于熒光激活細(xì)胞分選、免疫細(xì)胞化學(xué)/免疫熒光、免疫組化—PFA固定細(xì)胞、免疫沉淀等?;谛蛄蟹治鰴z測預(yù)測該抗體有兩種同種型。免疫原對應(yīng)于人PUMA的C末端殘基的合成肽。推薦的起始稀釋液:適用于WB稀釋度為1:1000-5000,用于IHC稀釋度為1:100-250,用于ICC稀釋度為1:250-500,用于FACS稀釋度為1:30,對于IP以1:50的稀釋度,使用對于特定應(yīng)用,工作稀釋度應(yīng)由研究者確定。注PUMA兔單克隆抗體僅適用于體外實(shí)驗(yàn),不適用于人類或動(dòng)物的任何臨床,治療或診斷用途。不適合動(dòng)物或人類食用。

應(yīng)用

1. 在生物標(biāo)記物開發(fā)中的應(yīng)用

兔單克隆抗體包括PUMA兔單克隆抗體廣泛用于生命科學(xué)研究的各個(gè)領(lǐng)域,尤其在免疫組織化學(xué)以及檢測蛋白的轉(zhuǎn)譯后修飾方面具有獨(dú)特優(yōu)勢。至今已有100多種兔單克隆抗體開發(fā)用于癌癥的IHC臨床診斷與研究,其中最具代表性的就是Her2和c-Kit的IHC診斷試劑盒。在蛋白修飾研究領(lǐng)域,如蛋白的磷酸化,在與疾病相關(guān)的蛋白質(zhì)信號(hào)通路中起到了至關(guān)重要的作用,使用磷酸化蛋白的兔單克隆抗體可以非常清楚地顯示蛋白的磷酸化程度。目前已有200多種磷酸化特異性的兔單克隆抗體面世。

2. 在治療抗體藥物開發(fā)中的應(yīng)用

臨床使用的大多數(shù)治療用抗體均需經(jīng)體外親和力成熟這一步驟,以提高抗體的親和力。這一過程常需8至12個(gè)月,最終親和力在納摩爾級(jí)(10-9 mol/L)。兔單抗不需使用體外親和力成熟,就能達(dá)到10-11至10-13 mol/L。這種高親和力不僅減少抗體的臨床使用量,還能減少由于使用大量抗體帶來的副作用。但這種高親和力的優(yōu)勢還需在動(dòng)物和臨床試驗(yàn)中進(jìn)一步證實(shí)。

另外,與鼠單抗的人源化相比,兔單克隆抗體的人源化更容易。因?yàn)?,兔單克隆抗體主要由一種重鏈及輕鏈基因構(gòu)成,通過分析大量的兔單克隆抗體序列發(fā)現(xiàn),兔與人的抗體同源性更高,約60%~76%,而小鼠與人的抗體同源性略低,為57%~72%,說明用兔單克隆抗體開發(fā)藥物前景更廣闊。

主要參考資料

[1] 李婷婷,崔慧斐. 兔單克隆抗體的發(fā)展及應(yīng)用前景[J]. 食品與藥品,2012,14(9): 373-376.

[2] 黃偉, 萬福生. PUMA 蛋白結(jié)構(gòu)與功能研究進(jìn)展[J]. 中華腫瘤防治雜志, 2013, 20(11): 873-876.

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