解淀粉芽抱桿菌（游是一種工業(yè)生產(chǎn)上應(yīng)用較為普遍的菌種，主要用于生產(chǎn)各類酶制劑（中國專利，201210277040. 1)。近年來，對解淀粉芽抱桿菌的進一步研究發(fā)現(xiàn)，該類細菌在自身的生產(chǎn)過程中可產(chǎn)生一系列的代謝產(chǎn)物，該些代謝產(chǎn)物具有廣泛地抑制真菌和細菌活性的作用，利用該一特性可將其應(yīng)用于植物病害防治例如植物炭痘病防治和果蔬保鮮等方面(車曉犧、李校壁，解淀粉芽抱桿菌（ifeciWus )的研究進展，2010，北京農(nóng)業(yè))。但是，解淀粉芽抱桿菌作為一種煙草內(nèi)生細菌，將其用于防治煙草黑膠病，則尚未見到有關(guān)報道和應(yīng)用。

解淀粉芽抱桿菌制備的防治菌劑

本發(fā)明目的在于提供解淀粉芽抱桿菌、利用其制備的防治菌劑。

本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：

一種用于防治煙草黑膠病的解淀粉芽抱桿菌CX-1，已于2013年5月27日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中。

一種利用解淀粉芽抱桿菌CX-1制備的防治煙草黑膠病的防治菌劑，通過以下步驟制備：

(1)菌種制備

將解淀粉芽抱桿菌CX-1菌種接種到試管斜面培養(yǎng)基上，32°C恒溫培養(yǎng)72小時，獲 得試管種，斜面培養(yǎng)基配方為；葡萄糖10g/l，蛋白腺5g/l，牛肉浸膏3g/l，酵母浸膏1 g/L，瓊脂18g/L，抑6.8~7.0;

(2)菌液發(fā)酵

將在步驟（1)制備的試管種中加入10ml無菌水，用接種環(huán)洗下菌苔，充分震蕩形 成細菌懸浮液，按照體積比1;200的比例將細菌懸浮液接種到無菌且容積為600ml的=角 瓶中，=角瓶中裝有無菌且溫度低于35°C的培養(yǎng)液1，在轉(zhuǎn)速為12化pm、溫度為32 °C條件 下的震蕩培養(yǎng)72小時，培養(yǎng)液1配方為：庶糖10g/l，蛋白腺5g/l，牛肉浸膏3g/l，酵母 浸膏1g/L，P冊.8~7.0;

(3)種子發(fā)酵液的制備

[0016] 將步驟（2)制備的菌液與培養(yǎng)液2按照體積比為1 ;100的比例接入到容積為30L 的種子罐中，種子罐內(nèi)的溶氧量為18%~20%，攬拌速度為18化pm，32°C條件下發(fā)酵，發(fā)酵至 細菌含量大于2X10"CFU/ml為止，培養(yǎng)液2配方為：庶糖10g/l，大豆蛋白腺10g/l，酵 母膏 1. 5g/L，M拆〇40. 5g/L，F(xiàn)eS〇40.Ig/L，ZnS〇40.Ig/L，MnS〇40. 02g/L，KH2PO3Ig/L;

(4)防治菌劑的制備

將步驟（3)制備的種子發(fā)酵液與培養(yǎng)液3按照體積比1 ;100的比例接入生產(chǎn)發(fā)酵 罐，生產(chǎn)罐的溶氧量為189(^20%，攬拌速度為18化pm，32°C條件下發(fā)酵，發(fā)酵5小時后，每隔2 小時對發(fā)酵罐進行發(fā)酵質(zhì)量檢測，觀察含菌量、測定發(fā)酵液的酸堿度，當(dāng)菌含量大于2X10" CFU/ml，酸堿度為7. 0~7. 6時，存儲作為防治菌劑，培養(yǎng)液3配方為：庶糖10 g/l，±豆200 g/L，M拆040. 5g/L，MnS045g/L;

步驟（4)所制備的防治菌劑在稀釋100~1000倍后用于防治煙草黑膠病。

步驟（4)所制備的防治菌劑在稀釋100倍后于煙苗移栽7d和14d后灌根施用，施用量為50ml/株。

本發(fā)明所采用的解淀粉芽抱桿菌CX-1菌株，屬于革蘭氏陽性細菌，對此類細菌在 生物防治方面的應(yīng)用是目前的研究熱點，本發(fā)明所提供的此類細菌在煙草黑膠病防治方面的應(yīng)用為進一步開發(fā)利用此類細菌提供了新的可能。

另一方面，由于此類細菌本身即為煙 草的內(nèi)生細菌，當(dāng)其作為煙草病害的防治菌種時相較于其他外來引進菌種，更利于煙草病 害的防治，對生態(tài)環(huán)境本身也更加安全。由于芽抱桿菌類細菌在工業(yè)生產(chǎn)應(yīng)用過程中的發(fā) 酵制備技術(shù)較為完善，對其稍加改變即可用于制備生物防治菌劑，因此本發(fā)明所提供的生 防菌劑的制備方法有利于此類細菌在生物防治應(yīng)用方面的推廣使用。