背景[1-3]
人白三烯D4(LTD4)ELISA KIT采用的是生物素雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測定樣品中白三烯D4(LTD4)的水平。向預先包被了白三烯D4(LTD4)單克隆抗體的酶標孔中加入白三烯D4(LTD4)，溫育；溫育后，加入生物素標記的抗白三烯D4(LTD4)抗體，再與鏈霉親和素-HRP結合，形成免疫復合物，再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結合的酶，然后加入底物A、B，產(chǎn)生藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺與樣品中白三烯D4(LTD4)的濃度呈正相關。對于具有多個表位的抗原而言，雙夾心ELISA（Double SandwichELISA）可應用于目標抗原或抗體的定量檢測。而對于小分子抗原或半抗原，因缺乏可作夾心法的兩個以上的結合位點，因此不能用雙抗體夾心法進行測定。此時，可以采用競爭抑制法模式來檢測其中靶分子的含量。競爭抑制ELISA又叫封閉ELISA，其主要原理是將標本中的抗原和一定量的酶標抗原競爭與固相抗體結合。標本中抗原量含量愈多，結合在固相上的酶標抗原愈少，最后的顯色也愈淺，也就是說，最終顯色的結果與待檢抗原或抗體的干擾程度成負相關。
支氣管哮喘(哮喘)時氣道阻塞的機制與氣道平滑肌收縮，血管滲漏所致粘膜水腫、粘液分泌增加及以嗜酸細胞為主導的炎癥細胞浸潤等引起的支氣管痙攣有關，多種炎性介質如組胺、白三烯(LTs)、血栓素、前列腺素、血小板激活因子(PAF)、趨化因子、腺苷及緩激肽等，參與上、下氣道的炎癥反應。近年來隨著LTs在哮喘氣道高反應性中的作用逐漸被認識，以及LTs受體部位被確認，白三烯受體拮抗劑(LTRA)與LTs合成抑制劑在防治哮喘中的地位引起關注。
應用[4][5]
人白三烯D4(LTD4)ELISA KIT用于炎癥介質白三烯D4在慢性乙型肝炎和原發(fā)性肝癌發(fā)生發(fā)展中的作用研究。
Leukotriene D4(LTD4)在慢性乙型肝炎(CHB)和原發(fā)性肝癌(HCC)患者血清中的表達水平,并分析其與血清ALT、AST、γ-GT、HBV-DNA和AFP間的相關性,進而探討LTD4在CHB和HCC發(fā)生發(fā)展中的作用。應用酶聯(lián)免疫法(ELISA)檢測血清中LTD4水平,全自動生化儀檢測ALT、AST、γ-GT水平,化學發(fā)光儀和基因擴增儀分別檢測AFP和HBV-DNA。結果:CHB和HCC患者血清LTD4水平均明顯高于對照組(P<0.01),且其水平在CHB組、HCC合并HBV組、單獨HCC組及對照組中逐漸下降。在CHB中,慢性肝炎與重型肝炎比較,LTD4水平差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);且LTD4水平與ALT、AST、γ-GT及HBV-DNA含量間無相關性(P>0.05)。在HCC中,合并HBV組與單獨HCC組相比,LTD4水平有顯著性差異(P<0.01);分別比較轉移組與無轉移組、治療組與未治療組,結果差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05);LTD4水平僅與ALT呈正相關(P<0.05),而與AST、γ-GT、AFP無相關性(P>0.05)。結論:LTD4作為重要的炎癥介質,可能參與了CHB的發(fā)生發(fā)展,并在促進CHB向HCC進展的過程中起著一定的作用,而且對肝癌細胞自身的腫瘤生物學產(chǎn)生影響。
參考文獻
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[3]Leukotriene D 4 induces gene expression in human monocytes through cysteinyl leukotriene type I receptor[J].Grzegorz Woszczek,Li-Yuan Chen,Sahrudaya Nagineni,Steven Kern,Jennifer Barb,Peter J.Munson,Carolea Logun,Robert L.Danner,James H.Shelhamer.The Journal of Allergy and Clinical Immunology.2008(1)
[4]Overexpression of cysteinyl LT1 receptor in prostate cancer and CysLT1Rantagonist inhibits prostate cancer cell growth through apoptosis[J].Masahide Matsuyama,Takuma Hayama,Kiyoaki Funao,Yutaka Kawahito,Hajime Sano,Yoshiaki Takemoto,Tatsuya Nakatani,Rikio Yoshimura.Oncology Reports.2007(1)
[5]周艷.炎癥介質白三烯D4在慢性乙型肝炎和原發(fā)性肝癌發(fā)生發(fā)展中的作用[D].華中科技大學,2011.