背景及概述^[1]

克立硼羅（AN2728）最早由AnacorPharmaceuticals公司研發(fā)，于2016年5月輝瑞收購了Anacor公司，同年12月，美國FDA批準(zhǔn)克立硼羅（AN2728）軟膏（2%或5%）上市，用于局部治療2歲以上患者輕度至中度特異性皮炎，商品名為Eucrisa。

作用機(jī)制^[1]

當(dāng)皮膚屏障失效時(shí)，會(huì)觸發(fā)角質(zhì)層細(xì)胞的先天免疫系統(tǒng)，產(chǎn)生細(xì)胞因子，引起一系列的免疫反應(yīng)和慢性炎癥癥狀。在特應(yīng)性皮炎中Th22細(xì)胞因子（白細(xì)胞介素-22），Th2細(xì)胞因子（白細(xì)胞介素-4，白細(xì)胞介素-5和白細(xì)胞介素-13）和Th17過度表達(dá)?？肆⑴鹆_（AN2728）是一種有效的選擇性磷酸二酯酶-4（PED-4）抑制劑，通過抑制磷酸二酯酶-4活性發(fā)揮作用。磷酸二酯酶-4是參與控制炎癥細(xì)胞活性的主要cAMP代謝酶。它在樹突細(xì)胞，T細(xì)胞，巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞等免疫細(xì)胞中高度表達(dá)?？肆⑴鹆_（AN2728）通過抑制PED-4水解cAMP使其濃度增加，進(jìn)而抑制促炎介質(zhì)（TNFα，IL-6，IL-12）的產(chǎn)生?；赑DE-4在各種炎癥細(xì)胞中的存在和作用，PDE-4抑制劑幾乎可以在所有炎癥細(xì)胞中發(fā)揮抗炎作用。

適應(yīng)癥^[1]

用于治療兒童及成人輕度至中度特應(yīng)性皮炎。

制備^[2]

一種克立硼羅（AN2728）的制備方法，包括如下步驟：

S1、2-氰基-4-硝基苯硼酸的合成：在裝有機(jī)械攪拌的圓底燒瓶中加入濃硫酸1.67kg，冰鹽浴下緩慢滴加發(fā)煙硝酸1.07kg，控制反應(yīng)體系的溫度不超過20℃，加完后分批加入2-氰基苯硼酸500g，加完后升溫至80℃反應(yīng)5h，TLC監(jiān)控反應(yīng)的進(jìn)程，原料轉(zhuǎn)化完全后冷卻至室溫，將得到的反應(yīng)液倒入5L的冰水中，有大量淺黃色固體析出，經(jīng)過濾，干燥、無水乙醇重結(jié)晶得到淺黃色2-氰基-4-硝基苯硼酸；

S2、2-甲?；?4-硝基苯硼酸的合成：在裝有機(jī)械攪拌的圓底燒瓶中加入2-氰基-4-硝基苯硼酸0.5kg，冰鹽浴降低反應(yīng)體系的溫度至0℃，緩慢滴加2mol/L的二異丁基氫化鋁甲苯溶液1.56kg，控制反應(yīng)體系的溫度不超過10℃，滴加完畢后在0℃繼續(xù)反應(yīng)2h，HPLC監(jiān)控反應(yīng)的進(jìn)程，原料轉(zhuǎn)化完全后，將得到的反應(yīng)液倒入5％的稀鹽酸中，經(jīng)乙酸乙酯萃取，干燥、濃縮得到2-甲?；?4-硝基苯硼酸；

S3、2-羥甲基-4-硝基苯硼酸的合成：在裝有機(jī)械攪拌的圓底燒瓶中依次加入2-羥甲基-4-硝基苯硼酸400g，甲醇2000mL，降低反應(yīng)體系的溫度至0℃，緩慢分批次向反應(yīng)體系中加入硼氫化鈉233g，控制反應(yīng)體的溫度不超過20℃，加料完畢后升溫至室溫繼續(xù)反應(yīng)2h，HPLC監(jiān)控反應(yīng)的進(jìn)程，原料轉(zhuǎn)化完全后，0℃下向反應(yīng)體系中加入5％的稀鹽酸淬滅，經(jīng)乙酸乙酯萃取，無水硫酸鈉干燥、濃縮得2-羥甲基-4-硝基苯硼酸粗品，乙醇重結(jié)晶得到類淺黃色固體2-羥甲基-4-硝基苯硼酸；

S4、2-羥基甲基-5硝基苯硼酸半酯的合成：在裝有機(jī)械攪拌的圓底燒瓶中依次加入2-羥甲基-4-硝基苯硼酸392g，四氫呋喃1920mL，5mol/L的稀鹽酸40mL，30℃下攪拌反應(yīng)5h，HPLC監(jiān)控反應(yīng)的進(jìn)程，原料轉(zhuǎn)化完全后，用5％的氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH至6，乙酸乙酯萃取，無水硫酸鈉干燥、濃縮得2-羥基甲基-5硝基苯硼酸半酯粗品，經(jīng)乙醇重結(jié)晶得到2-羥基甲基-5硝基苯硼酸半酯；

S5、2-羥基甲基-5-羥基苯硼酸半酯的合成：在裝有機(jī)械攪拌的圓底燒瓶中加入2-羥基甲基-5硝基苯硼酸半酯277g，甲醇1350mL，5％的鈀炭5.4g(Pd：C為0.02：1)，通入氫氣，室溫反應(yīng)5h，HPLC監(jiān)控反應(yīng)的進(jìn)程，原料轉(zhuǎn)換完畢后，過濾除去鈀炭，將產(chǎn)品直接濃縮干，加入36.5％的濃鹽酸170g，冰鹽浴下緩慢滴加117g亞硝酸鈉配成的500mL水溶液，滴加完畢后室升溫至室溫反應(yīng)2h，將得到的反應(yīng)液滴加到100mL50％的濃硫酸中，120℃反應(yīng)2h，HPLC監(jiān)控反應(yīng)的進(jìn)程，水解完全后，用飽和碳酸氫鈉調(diào)節(jié)pH至6，經(jīng)乙酸乙酯萃取，干燥、濃縮得2-羥基甲基-5-羥基苯硼酸半酯；

S6、克立硼羅（AN2728）的合成：在裝有機(jī)械攪拌的圓底燒瓶中加入對氟苯甲腈161g，2-羥基甲基-5-羥基苯硼酸半酯200g，碳酸鉀221g，N，N-二甲基甲酰胺2000mL，升溫至110℃反應(yīng)12h，HPLC監(jiān)控反應(yīng)的進(jìn)程，原料轉(zhuǎn)化完全后，過濾除去固體，將濾液倒入冰水中淬滅，經(jīng)乙酸乙酯萃取、無水硫酸鈉干燥、濃縮得克立硼羅（AN2728）粗品，再經(jīng)正己烷打漿，過濾、干燥得克立硼羅（AN2728）。

主要參考資料

[1] 高洋. 克立硼羅合成工藝及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[D].吉林大學(xué),2019.

[2] CN201811270792.9一種克立硼羅（AN2728）的制備方法