背景及概述^{[1][2] [5]}

茶黃素是紅茶中的重要品質(zhì)成分和功能成分，具有降血脂、降血壓、抗氧化、抗輻 射、抗菌、抗癌等多種生物活性和藥理功效，被譽(yù)為“茶葉中的軟黃金”，紅茶中茶黃素含量 僅為0.5%-2.0%。

茶黃素是多酚物質(zhì)氧化形成的一類能溶于乙酸乙酯的、具有苯駢卓酚酮的化合物的總稱。茶黃素有12種組分，其中茶黃素(TF)，茶黃素-3-沒食子酸酯(TFMG)，茶黃素-3，3’-雙沒食子酸酯(TFdiG)和茶黃素-3’-沒食子酸酯(TFM’G)是4種最主要的茶黃素(化學(xué)結(jié)構(gòu)見上圖)。茶黃素的提純物呈橙黃色針狀結(jié)晶，熔點(diǎn)237～240℃，易溶于水、甲醇、乙醇、丙酮、正丁醇和乙酸乙酯，難溶于乙醚.不溶于三氯甲烷和苯。茶黃素溶液呈鮮明的橙黃色，水溶液呈弱酸性，pH約5.7。顏色不受茶湯提取液的pH影響，但在堿性溶液中有自動(dòng)氧化的傾向，且隨pH的增加而加強(qiáng)。

茶黃素是紅茶發(fā)酵過程中兒茶素類組分氧化聚合的產(chǎn)物,是紅茶品質(zhì)優(yōu)劣的標(biāo)志性成分之一。茶黃素具有獨(dú)特的苯駢卓酚酮結(jié)構(gòu)和更多的酚羥基團(tuán),具有多種功能活性,在抑菌性能方面有時(shí)優(yōu)于兒茶素和其他多酚類成分。

制備^[1]

稱取100g茶葉碎末，加入1000ml去離子水（90℃）浸提30min，取出浸提液；再加入 500ml去離子水（90℃）浸提30min；合并浸提液，經(jīng)300目濾布抽濾、0.05um陶瓷膜處理，得茶 黃素微濾液。

將茶黃素微濾液由重相入口泵入兩級(jí)串聯(lián)離心萃取機(jī)，同時(shí)泵入1/2茶黃素微濾 液料液體積的乙酸乙酯溶液，兩臺(tái)串聯(lián)的離心萃取機(jī)轉(zhuǎn)速均為3000rpm，收集輕相出口液 （即酯相溶液），經(jīng)40℃低溫真空濃縮、噴霧干燥處理得到茶黃素提取物，其中茶黃素純度為 21.35%。

藥理作用^{[2-3] [6]}

茶黃素能抑制人鼻咽癌CNE2細(xì)胞增殖,并誘導(dǎo)其凋亡,其作用呈時(shí)間及濃度依賴性,其作用機(jī)制可能與調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖和凋亡基因的表達(dá)有關(guān)。

茶黃素可降低高尿酸血癥小鼠血清尿酸。其降低血清尿酸作用與抑制黃嘌呤氧化酶活性、調(diào)節(jié)相關(guān)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)體mRNA與蛋白表達(dá)水平相關(guān)。

茶黃素能夠增強(qiáng)宮頸癌細(xì)胞對(duì)順鉑的敏感性,其機(jī)制可能與增加凋亡相關(guān)蛋白Cleaved Caspase 3、Cleaved Caspase 9、PARP表達(dá)及抑制NF-κB信號(hào)通路相關(guān)蛋白p-IκBα、p-NF-κB和p-Akt表達(dá)有關(guān)。

茶黃素可通過增強(qiáng)軟骨細(xì)胞合成因子活性、減弱分解因子活性并抑制細(xì)胞炎癥反應(yīng),有效延緩大鼠軟骨細(xì)胞炎性退變進(jìn)程,對(duì)炎癥軟骨細(xì)胞有一定的保護(hù)作用。

檢測(cè)^[4]

吳函殷等人建立了高效液相色譜法(high performance liquid chromatography,HPLC)測(cè)定奶茶飲料中茶黃素的含量。方法奶茶樣品經(jīng)0.1%乙酸乙醇沉淀蛋白后,5000 r/min離心5 min,取上清液進(jìn)行檢測(cè)。采用0.5%乙酸(A)和乙腈(B)作為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫,二極管陣列檢測(cè)器在280 nm處進(jìn)行監(jiān)測(cè),流速1.5 m L/min,色譜柱溫度40℃,外標(biāo)法定量。結(jié)果本方法可以實(shí)現(xiàn)4種目標(biāo)化合物的分離檢測(cè),4種茶黃素的回收率在89.06%~96.51%范圍內(nèi),相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于5%(n=5)。結(jié)論該方法前處理時(shí)間短、操作簡(jiǎn)便、穩(wěn)定性好、準(zhǔn)確度高,可用于奶茶飲料中茶黃素的測(cè)定。

主要參考資料

[1] [中國發(fā)明,中國發(fā)明授權(quán)] CN201510090753.0 離心萃取分離制備茶黃素的方法

[2] 黃夏寧,余展鵬,鐘艷平,孟盈,呂安喬,楊建宇,黃元姣.茶黃素對(duì)人鼻咽癌CNE2細(xì)胞增殖及凋亡的影響[J].中藥材,2019,42(02):393-398.

[3] 周啟蒙,趙曉悅,王海港,楊海光,宋俊科,王金華,杜冠華.茶黃素降低高尿酸血癥小鼠血清尿酸的作用與機(jī)制探究[J].中國新藥雜志,2018,27(14):1631-1638.

[4] 吳函殷,龍丹,萬晶瓊,羅龍新.高效液相色譜法測(cè)定奶茶飲料中茶黃素含量[J].食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào),2018,9(14):3740-3744.

[5]刁春華,孔俊豪,譚蓉,涂云飛,蘇小琴,左小博,楊秀芳.茶黃素抗菌活性研究進(jìn)展[J].食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào),2017,8(11):4247-4252.

[6]周盈,黃倩,王帥,陳萍.茶黃素對(duì)白介素-1β誘導(dǎo)的大鼠軟骨細(xì)胞炎性退變的影響[J].浙江大學(xué)學(xué)報(bào)(農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版),2017,43(04):511-518.