背景及概述[1][2]
人參總皂苷是一種固醇類化合物,屬于三萜皂苷,主要存在于人參屬藥材中,例如人參、三七、西洋參等植物中,在其他科植物中也含有,例如葫蘆科絞股藍(lán)。目前研究表明人參總皂苷具有多種生物活性,例如抗腫瘤作用,人參皂苷Rh2對多種腫瘤有一定的抑制作用,并且Rh2與紫杉醇或鹽酸米托蒽醌聯(lián)合應(yīng)用有增效作用;增強(qiáng)機(jī)體應(yīng)激能力,調(diào)整內(nèi)分泌和植物神經(jīng)功能紊亂,抗疲勞并具有增強(qiáng)心肌收縮力,提高心臟排血量的功能。目前臨床上用于腫瘤輔助用藥、冠心病、更年期綜合征。
純化[2]
A、將DM-130型大孔吸附樹脂填裝于層析柱內(nèi),用酒精淋洗至流出酒精于水中不產(chǎn)生白色渾濁;用去離子水洗凈層析柱內(nèi)樹脂中的酒精,備用;將BS-Ⅱ型弱堿脫色樹脂填裝于層析柱內(nèi),分別用1NHCl、1NNaOH進(jìn)行轉(zhuǎn)型處理,然后用去離子水洗凈組內(nèi)的NaOH,備用;
B、以30ml/h的流速使人參皂苷提取物粗品溶液首先通過DM-130型大孔吸附樹脂層析柱,吸附藥液中的人參皂苷;吸附完畢后用去離子水洗去層析柱內(nèi)殘留的人參皂苷溶液;用85%的酒精洗脫大孔樹脂吸附的皂苷;
C、上述洗脫液再通過BS-Ⅱ型弱堿脫色樹脂柱進(jìn)行脫色處理;收集脫色樹脂柱流出液;真空濃縮并干燥即得高含量人參總皂苷純化產(chǎn)品。
測定[3]
某含參類酒的人參總皂苷測定:
精確吸取該酒樣5ml于100ml瓷蒸發(fā)皿中,在沸水浴中蒸干,揮發(fā)去除乙醇,用蒸餾水轉(zhuǎn)移至50ml容量瓶中,并定溶至刻度,搖勻,干濾紙過濾,精確吸取濾液1ml上柱,樣品上柱后,先用50ml蒸餾水洗滌雜質(zhì),再用25ml20%(V/V)的乙醇水溶液洗滌雜質(zhì),洗去雜質(zhì)后,用25ml70%(V/V)乙醇洗脫吸附在柱上的人參總皂苷,用100ml瓷蒸發(fā)皿接收洗脫液,在沸水浴中蒸干,同時,精確吸取100μg/ml由中國藥品生物制品檢定所銷售的人參皂苷Re標(biāo)準(zhǔn)品1ml,按照與上述樣品上柱、洗滌、洗脫、收集、蒸干同樣方式進(jìn)行。
向蒸干的樣品和標(biāo)準(zhǔn)品中分別準(zhǔn)確加入2ml蒸餾水,將蒸干的人參總皂苷蕩入底部。另取一只潔凈的100ml瓷蒸發(fā)皿,同樣加入2ml蒸餾水作為試劑空白。再分別向樣品、標(biāo)準(zhǔn)品、試劑空白中準(zhǔn)確加入本發(fā)明制備的6ml0.2%(g/L)蒽酮顯色劑,在90℃水浴上加熱15min,放至室溫,用天津喀納斯光學(xué)分析儀器有限公司銷售的721型分光光度計,在波長590nm處以空白校零,再分別測定樣品和標(biāo)準(zhǔn)品吸光度,若測得樣品的吸光度為0.421,標(biāo)準(zhǔn)品吸光度0.325,則誤差:在重復(fù)條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值不超過算數(shù)平均值的10%。
主要參考資料
[1][中國發(fā)明]CN201510434102.9一種人參總皂苷滴丸及其制備方法
[2][中國發(fā)明]CN201810755117.9獸用人參總皂苷顆粒
[3][中國發(fā)明,中國發(fā)明授權(quán)]CN200910176478.9一種蒽酮比色法測定人參總皂苷的方法