背景及概述^[1]

維特克拉(venetoclax，ABT-199)是選擇性B細胞淋巴瘤因子-2(B-celllymphoma-2，BCL-2)抑制劑，是美國FDA批準的、用于治療慢性淋巴細胞白血病的突破性藥物，受到全球有關(guān)方面的廣泛重視。該藥物的作用靶點是BCL-2的亞型BCLxL，對BCL-2的其他亞型無明顯作用。該化合物的相對分子質(zhì)量為868.44，水溶性較差，但膜通透性良好，屬生物藥劑學(xué)分類系統(tǒng)(biopharmaceuticalclassificationsystem，BCS)第二類藥物。維特克拉的原研制劑為維特克拉片劑，未在中國大陸進行銷售，在美國上市的維特克拉片也無體內(nèi)體外相關(guān)性公開報道。如需進行仿制，首先要做到仿制藥與原研藥體內(nèi)生物利用度的一致性(bioequivalency，BE)，而進行體內(nèi)外相關(guān)性研究，找到與體內(nèi)釋藥相關(guān)的體外溶出條件，可大幅度降低仿制藥的研發(fā)成本并提高成功率(通過BE)。且此藥物是針對BCL-2靶點的首個上市新藥，開展其體內(nèi)體外相關(guān)性研究，也為該靶點的其他創(chuàng)新藥物研究提供參考，有利于提高BCL-2靶點的其他相關(guān)藥物制劑成功研發(fā)上市的概率。

應(yīng)用^[2]

維特克拉化學(xué)名為4-(4-{[2-(4-氯苯基)-4,4-二甲基環(huán)己-1-烯-1-基]甲基}哌嗪-1-基)-N-({3-硝基-4-[(四氫-2H-吡喃-4-基甲基)氨基]苯基}磺?；?-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基氧基)苯甲酰胺，是個靶向B細胞淋巴瘤因子2(BCL-2)的選擇性抑制藥。白血病患者細胞中的B細胞淋巴瘤因子2(B-celllymphoma-2，BCL-2)可促進癌細胞生長，在B淋巴細胞和其他B細胞惡性腫瘤中常過度表達，于2016年4月11日被FDA批準上市，用于慢性淋巴細胞白血病。

體內(nèi)體外相關(guān)性^[1]

考察維特克拉(venetoclax)制劑的體外釋藥行為和在比格犬體內(nèi)的藥動學(xué)過程，進行體內(nèi)體外相關(guān)性(IVIVC)的研究。研究測定維特克拉制劑在不同溶出介質(zhì)中的溶出曲線；建立維特克拉在比格犬血漿樣品中的HPLC測定方法，并對市售的維特克拉片進行飽腹和空腹下比格犬體內(nèi)的藥動學(xué)研究；將藥物在體外累積溶出度數(shù)據(jù)與在體內(nèi)的累積吸收百分數(shù)數(shù)據(jù)進行線性回歸，進行IVIVC研究。結(jié)果維特克拉制劑在4種不同溶出介質(zhì)中體外的釋藥行為存在明顯差異；維特克拉制劑飽腹和空腹的AUC0→∞分別為(32.38±5.87)和(27.70±6.32)mg·h·L－1，達峰濃度分別為(4.04±0.78)和(3.72±0.69)μg·mL－1，達峰時間分別(6.01±1.04)和(4.27±0.92)h，其中AUC0→∞和達峰時間的差異具有顯著性(P＜0.05)；體內(nèi)吸收百分數(shù)與在0.2%SDSpH6.8介質(zhì)中的體外溶出度有良好的IVIVC。結(jié)論食物可提高維特克拉制劑的生物利用度；實驗篩選出的0.2%SDSpH6.8介質(zhì)(槳法，75r·min－1)可以作為與該制劑體內(nèi)釋藥相關(guān)的體外溶出條件。

制備^[2]

一種維特克拉的制備方法：

步驟1：4-(4-{[2-(4-氯苯基)-4,4-二甲基環(huán)己-1-烯-1-基]甲基}哌嗪-1-基)-N-[(3-硝基-4-氟苯基)磺?；?]-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基氧基)苯甲酰胺/4-(4-{[2-(4-氯苯基)-4,4-二甲基環(huán)己-1-烯-1-基]甲基}哌嗪-1-基)-N-[(3-硝基-4-氯苯基)磺酰基)]-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基氧基)苯甲酰胺(Ⅲ)的制備

將化合物(Ⅱ)(20.0g，35.0mmol)溶于300mL二氯甲烷(DCM)中，室溫條件下依次加入3-硝基-4-氟苯磺酰胺(8.5g，38.5mmol)、4-二甲氨基吡啶(DMAP)(6.4g，52.5mmol)、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽(EDC.HCL)(10.1g，52.5mmol)?？刂茰囟?0～30℃攪拌反應(yīng)16小時。反應(yīng)完畢后加入5％乙酸水溶液100mL洗滌一次，然后再用100mL水洗滌一次，有機相用20g硫酸鈉干燥、過濾、旋干，得含氟化合物(Ⅲ)固體26.1g，收率96.3％，直接用于下一步投料。

步驟2：4-(4-{[2-(4-氯苯基)-4,4-二甲基環(huán)己-1-烯-1-基]甲基}哌嗪-1-基)-N-({3-硝基-4-[(四氫-2H-吡喃-4-基甲基)氨基]苯基}磺?；?-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基氧基)苯甲酰胺(Ⅰ)的制備

將含氟化合物(Ⅲ)(25.0g，32.3mmol)溶于200mL四氫呋喃(THF)中，室溫條件下加入四氫吡喃-4-甲胺(5.6g，48.5mmol)和N,N-二異丙基乙胺(DIPEA)(6.27g，48.5mmol)。升溫至60～65℃攪拌反應(yīng)5小時，TLC檢測顯示原料反應(yīng)完畢。反應(yīng)完畢后減壓濃縮，濃縮物加入500mL二氯甲烷攪和200mL純化水，攪拌后分離出水相，有機相用1％乙酸水溶液150mL洗滌一次，然后再用200mL水洗滌一次，有機相用20g硫酸鈉干燥、過濾、旋干，粗品用200mL四氫呋喃重結(jié)晶，過濾、干燥得維特克拉精制品(Ⅰ)淡黃色粉末25.1g，收率89.3％。經(jīng)申請人質(zhì)譜分析為式Ⅰ結(jié)構(gòu)，經(jīng)HPLC分析，純度為99.82％。

主要參考資料

[1]維特克拉體內(nèi)體外相關(guān)性研究

[2]CN201811450340.9一種維特克拉的制備方法及其產(chǎn)品