背景及概述^[1]

生物分子的化學(xué)修飾在本領(lǐng)域中是公知的。用于標(biāo)記，標(biāo)簽和報(bào)告分子與生物分子的共價(jià)連接的試劑和方法在生物化學(xué)，分子生物學(xué)和診斷學(xué)領(lǐng)域提供了有價(jià)值的工具。標(biāo)記的生物分子尤其可用于檢測生物樣品中的靶組分和分離靶分子。

利用特異性結(jié)合實(shí)體，包括生物素-抗生物素蛋白/鏈霉抗生物素蛋白系統(tǒng)。生物分子優(yōu)選與生物素連接，并且抗生物素蛋白（或鏈霉抗生物素蛋白）綴合的熒光染料或酶用于檢測生物素標(biāo)記。生物素與抗生物素蛋白（或鏈霉抗生物素蛋白）綴合物之間的特異性結(jié)合親和力提供了將熒光染料，酶或EM標(biāo)記物附著到生物分子上的特異性，五氟苯酚生物素酯為生物素化學(xué)修飾產(chǎn)物，通過五氟苯酚和D-生物素合成五氟苯酚生物素酯，收率約98%；通過三氟乙酸五氟苯酯和D-生物素合成五氟苯酚生物素酯，收率約95%。

制備^[1]

五氟苯酚生物素酯，又稱為d-生物素-O-PFP，如下合成：將1mmold-生物素，0.1mmolDIEA，0.1mmolHOBT，1.2mmolPFP溶于10mlDMF中。向混合物中加入1.1mmolDCC。在室溫下反應(yīng)進(jìn)行反應(yīng)24小時(shí)，同時(shí)搖動(dòng)。濾出混合物中出現(xiàn)的白色晶體。向溶液中加入10mlDCM以沉淀d-生物素-O-PFP。用DCM洗滌沉淀物，并從甲醇：乙酸乙酯溶液中結(jié)晶。d-生物素-O-PFP的產(chǎn)率為53％，熔點(diǎn)172-174℃，MW為410gr/mol，O.D。271納米。

主要參考資料

[1] US2009203879ACTIVATEDLABELINGREAGENTSANDMETHODSFORPREPARINGANDUSINGTHESAME