【背景及概況】[1][2]
培養(yǎng)基是適合微生物生長繁殖或累積代謝產(chǎn)物的營養(yǎng)基質(zhì)?,F(xiàn)代微生物工作中多采用人工配制的培養(yǎng)基,根據(jù)不同微生物的營養(yǎng)特點,選擇配制不同的培養(yǎng)基。培養(yǎng)基的主要組成包括水、含碳素物質(zhì)、含氮素物質(zhì)、無機鹽類和其他生長因子。為滿足微生物生長繁殖或其他目的的需要,培養(yǎng)基的配制還必須考慮滲透壓、各營養(yǎng)成分之間的配比、酸堿度、氧化還原電位等。根據(jù)培養(yǎng)基的物理特性可分為固體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基;根據(jù)其化學組成可分為天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基、基礎(chǔ)培養(yǎng)基、加富培養(yǎng)基、基本培養(yǎng)基和完全培養(yǎng)基;根據(jù)用途又可分為選擇性培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基、抑制性培養(yǎng)基、保存菌種用培養(yǎng)基、生產(chǎn)用培養(yǎng)基等。培養(yǎng)基配制完畢,需要滅菌處理后才能使用。
蛋白胨(Peptone)是將肉、酪素或明膠或蛋白質(zhì)經(jīng)酸、堿或蛋白酶水解后干燥而成的外觀呈淡黃色的粉劑。蛋白質(zhì)經(jīng)酸、堿或蛋白酶分解后也可形成蛋白胨。在胃內(nèi)蛋白質(zhì)的初步消化產(chǎn)物之一就是蛋白胨。蛋白胨主要含有?、胨、 多肽、 二肽和各種氨基酸,還含有少量的氯、鈉、鉀、鈣、鎂、鐵、鋅、錫、銅、鉛、錳等離子。1880年納格里發(fā)現(xiàn)將此物質(zhì)加入細菌培養(yǎng)基后,細菌生長十分良好,首次將這種蛋白質(zhì)水解不完全的產(chǎn)物命名為蛋白胨。各種動植物蛋白質(zhì)均可用于制取蛋白胨,但魚肉蛋白質(zhì)的氨基酸種類比較齊全,有利于微生物的生長,是制取蛋白胨的重要原料。蛋白胨富含有機氮化合物,也含有一些維生素和糖類。蛋白胨可以作為微生物培養(yǎng)基的主要原料,廣泛用應用于微生物、制藥領(lǐng)域,植物蛋白胨尤其大豆蛋白胨是專門用于培養(yǎng)鏈球菌、肺炎球菌、布氏桿菌等,營養(yǎng)豐富,也可用做工業(yè)化生產(chǎn)的發(fā)酵原料。
【生產(chǎn)】[1][2]
一種以大豆分離蛋白基料生產(chǎn)大豆蛋白胨的方法,包括以下步驟:
1) 將大豆分離蛋白基料和車間工藝水配置成重量百分比為5?20%的分散液;
2) 根據(jù)大豆分離蛋白基料的微生物情況,對其進行巴氏殺菌,滅菌溫度 70?85℃,時間30?60分鐘;
3) 把滅菌處理的物料降溫到40?70℃,使用pH值調(diào)節(jié)劑調(diào)pH值到6.0?10.0;
4) 加入蛋白酶,蛋白酶和大豆分離蛋白基料干基的重量百分比為0.1?8%, 在40?70℃的溫度下,酶解1?8小時;
5) 調(diào)酶解液的pH值為6?7;
6) 然后升溫至90?100℃,保持10?20分鐘,進行滅酶;
7) 經(jīng)過板框式壓濾機過濾或者膜分離提純精制;
8) 經(jīng)雙效濃縮后噴霧干燥;
9) 檢驗、包裝、入庫,既得本產(chǎn)品大豆蛋白胨。
本發(fā)明使用蛋白分解酶,所以產(chǎn)品質(zhì)量高、產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定,試劑大豆蛋 白胨可以達到50%,工業(yè)級大豆蛋白胨可以到達90%;本發(fā)明的生產(chǎn)工藝簡單,易于操作,成本低。
【應用】[3][4]
1. 一種促進產(chǎn)氣莢膜梭菌高產(chǎn)外毒素的培養(yǎng)基,所述培養(yǎng)基由下述重量份的成分組成:牛肉浸粉18?30重量份,大豆蛋白胨6?15重 量份,葡萄糖4?8重量份,NaCl3?6重量份,加水至1000重量份。本發(fā)明的優(yōu)選技術(shù)方案中,所述培養(yǎng)基由下述重量份的成分組成:牛肉浸粉 25重量份,大豆蛋白胨10重量份,葡萄糖5重量份,NaCl5重量份,加水至 1000重量份。本發(fā)明的優(yōu)選技術(shù)方案中,所述培養(yǎng)基的pH值為7.0?8.5,優(yōu)選pH值為 7.5?8.0。本發(fā)明的優(yōu)選技術(shù)方案中,所述的產(chǎn)氣莢膜梭菌選自A型產(chǎn)氣莢膜梭菌、B 型產(chǎn)氣莢膜梭菌、C型產(chǎn)氣莢膜梭菌、D型產(chǎn)氣莢膜梭菌、E型產(chǎn)氣莢膜梭菌的 任一種或其組合,優(yōu)選為C型產(chǎn)氣莢膜梭菌。
2. 一種對金黃色葡萄球菌分離率高的選擇性培養(yǎng)基,配制1000ml選擇性培養(yǎng)基的配方中含有大豆蛋白胨45g;甘油450ml;枸櫞酸鎂5g;氯化鈉0.5g;亞碲酸鉀45g;芋酸9~12mg;麥芽浸粉1.9g;山柑子萜酮0.2g;蒸餾水加至1000ml。
進一步地,每1000ml選擇性培養(yǎng)基還含有酵母膏0.2g。進一步地,每1000ml選擇性培養(yǎng)基還含有濃度350g/L的茯苓水煮液200~300ml。進一步地,每1000ml選擇性培養(yǎng)基還含有甘氨酸5mg;濃度350g/L的茯苓水煮液200~300ml。
制備方法包括以下步驟:
(1)取茯苓加水煮沸1小時,過濾,取濾液,調(diào)整體積到濃度為350g/L,得茯苓水煮液;
(2)取大豆蛋白胨;甘油;枸櫞酸鎂;氯化鈉;亞碲酸鉀;芋酸;麥芽浸粉;山柑子萜酮;酵母膏及甘氨酸溶于步驟1所得茯苓水煮液中,混勻過濾后,蒸餾水定容,低溫滅菌2次,每次50min,滅菌后分裝。
【參考文獻】
[1] 農(nóng)業(yè)大詞典
[2] 李世偉;王建忠;郭世峰;高建勇.一種利用大豆分離蛋白基料生產(chǎn)大豆蛋白胨的方法. CN201110217180.5,申請日2011-07-19
[3] 熊媛媛;蔣玉文;漆世華;黃濤;鄭佳;朱薇;謝紅玲;溫文生. 一種促進產(chǎn)氣莢膜梭菌高產(chǎn)外毒素的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)方法和其應用. CN201310086236.7 ,申請日2013-03-19
[4] 董建紅;董春紅.一種對金黃色葡萄球菌分離率高的選擇性培養(yǎng)基. CN201610213819.5 ,申請日2016-04-08