蘋(píng)果酸有D-蘋(píng)果酸、DL-蘋(píng)果酸和L-蘋(píng)果酸。L-蘋(píng)果酸又名2-羥基丁二酸，是生物體三羧酸的循環(huán)中間體，易被人體吸收，因此作為性能優(yōu)異的食品添加劑和功能性食品廣泛應(yīng)用于食品、化妝品、醫(yī)療和保健品等領(lǐng)域。蘋(píng)果酸，又名2-羥基丁二酸，由于分子中有一個(gè)不對(duì)稱碳原子，有兩種立體異構(gòu)體。大自然中，以三種形式存在，即D-蘋(píng)果酸、L-蘋(píng)果酸和其混合物DL-蘋(píng)果酸。蘋(píng)果酸為白色結(jié)晶體或結(jié)晶狀粉末，有較強(qiáng)的吸濕性，易溶于水、乙醇。有特殊愉快的酸味。L-蘋(píng)果酸主要用于食品和醫(yī)藥行業(yè)。

(1)根據(jù)現(xiàn)有技術(shù)中的細(xì)胞轉(zhuǎn)化法(DE3310849)制備L-蘋(píng)果酸鹽和富馬酸鹽混合液。將從土壤中分離得到的Aspergillus wentii屬菌株在糖30g/L，磷酸氫二銨3g/L，硫酸銨2g/L，氯化鉀2g/L，硫酸鎂1g/L，富馬酸鈉5g/L的培養(yǎng)液中培養(yǎng)48小時(shí)，過(guò)濾分離出細(xì)胞。在60-70℃下配制2％的卡拉膠溶液，降溫到50℃時(shí)將分離出的細(xì)胞按10％(w/w)加入，攪拌均勻后倒入盤子中凝固，制成5mm×5mm×5mm的固定化細(xì)胞。然后裝入8cm×60cm的玻璃柱。將1.4M的富馬酸鈉溶液以1000ml/h的速度流經(jīng)固定化細(xì)胞柱，得到L-蘋(píng)果酸鹽和富馬酸鹽混合溶液。

(2)取1000ml經(jīng)步驟(1)得到的混合液，其中含L-蘋(píng)果酸鈉186g，富馬酸鈉56g。將溶液加熱到60℃，攪拌下加入170g(摩爾比1.05∶1)富馬酸，攪拌反應(yīng)3.5小時(shí)，PH＝3.2，冷卻到15～20℃，過(guò)濾，濾餅用少量水洗，然后用NaOH中和至PH＝7-8供細(xì)胞轉(zhuǎn)化用。所得濾液980ml，含富馬酸單鈉40g。加熱至85℃，通過(guò)1500ml 001x7強(qiáng)酸性陽(yáng)離子交換柱(直徑6cm，高60cm)，收集淋洗液經(jīng)減壓濃縮，L-蘋(píng)果酸濃度增加到40％時(shí)，冷卻到10～15℃，過(guò)濾回收富馬酸。濾液進(jìn)一步減壓濃縮到L-蘋(píng)果酸濃度至80～82％，冷卻到15℃，結(jié)晶出91gL-蘋(píng)果酸，母液中含有46gL-蘋(píng)果酸，母液可循環(huán)使用。L-蘋(píng)果酸收率相當(dāng)于97％。