"RFL-6 Cell|大鼠成纖維細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：胚肺；成纖維細(xì)胞；SD大鼠

細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣

解凍細(xì)胞出現(xiàn)大量細(xì)胞碎片的可能原因及推薦解決方案如下：１)冷凍時(shí)細(xì)胞密度過低：推薦的解決方案：縮短解凍過程中的時(shí)間。將細(xì)胞取出后，立即將凍存管浸入在３７℃的水浴中，并震蕩至全部融化，然后迅速地轉(zhuǎn)移到預(yù)熱的培養(yǎng)基中；２)不適當(dāng)?shù)睦鋬鲞^程：推薦的解決方案：解凍不同冷凍室總的試管。確保在凍存過程中采用的適當(dāng)?shù)募夹g(shù)，并確保使用了適量和適合的冷凍液。出現(xiàn)生長緩慢的可能原因及推薦解決方案如下：１)培養(yǎng)瓶的大?。阂话憬鉀Q方案是一些細(xì)胞在培養(yǎng)基中傾向于維持一定的密度。將培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移到較小的培養(yǎng)瓶中，使細(xì)胞密度上升；如，根據(jù)培養(yǎng)基的體積，從T７５培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)移到２或３個(gè)T２５培養(yǎng)瓶中；２)細(xì)胞密度過低：通常解決方案是提GAO未來冷凍物種細(xì)胞的凍存密度，或使用較小的培養(yǎng)容器，或解凍多個(gè)試管來進(jìn)行培養(yǎng)。

細(xì)胞生長：貼壁

IR983F細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NK-92細(xì)胞、32D clone 3細(xì)胞、EL-4細(xì)胞

OCI AML3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW 839細(xì)胞、MC9細(xì)胞、MDAMB134VI細(xì)胞

A375mel細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKLMS-1細(xì)胞、Hep-G2細(xì)胞、S16細(xì)胞

H4IIEC3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細(xì)胞、Capan 1細(xì)胞、HEC-1-B細(xì)胞

MC-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EL4細(xì)胞、OCI/AML-2細(xì)胞、EOC 20細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

RFL-6 Cell|大鼠成纖維細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)分布不均勻，通常操作步驟：做細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，細(xì)胞鋪板大概是我們Zui常見的一個(gè)實(shí)驗(yàn)。但有時(shí)候鋪得不是很均勻：要么中間密周圍稀，要么周圍密中間禿。下面為大家分享幾點(diǎn)經(jīng)驗(yàn)。盡量消化細(xì)胞分散成單細(xì)胞懸液。對于易于消化的細(xì)胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶潤洗一遍（25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板），棄掉胰酶，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右，鏡下觀察是否細(xì)胞消化較為分散。如果不夠，延長消化時(shí)間。96孔板一般以100微升每孔接種，直接用100微升移液器吸取細(xì)胞懸液，沿孔壁（稍離開一點(diǎn)孔底即可，不要離底太GAO）直接接入，移液器不需完全打到Zui大，輕輕按下即可，每鋪完一行換一次槍頭同時(shí)輕輕混勻細(xì)胞懸液。都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣，注意把握力度（我一般輕巧敲三下），太強(qiáng)或次數(shù)太多會導(dǎo)致細(xì)胞集中成堆，將板順時(shí)針旋轉(zhuǎn)（逆時(shí)針效果不HAO），依次敲擊剩余三個(gè)邊，靜置約5分鐘，放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板，可采用將每個(gè)孔加入少量無血清培養(yǎng)基，晃動浸潤整個(gè)孔底，然后用移液槍吸至第二孔，同樣方法浸潤孔底，其它孔依此類推，這樣整個(gè)孔底都是濕潤的，細(xì)胞懸液會平鋪在整個(gè)孔底，注意加完細(xì)胞懸液后要放工作臺靜置一下。這個(gè)方法就是有點(diǎn)慢，但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式，但力度沒有96孔板HAO掌握，效果沒有96孔板HAO。培養(yǎng)瓶里面加HAO細(xì)胞以后(比如傳代HAO/分HAO細(xì)胞以后)，先順時(shí)針搖晃3次，馬上逆時(shí)針搖晃3次。然后延X軸Y軸分別水平搖動3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復(fù)延X軸Y軸分別水平搖動3次。

TO 175.T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RAW264.7細(xì)胞、HCC70細(xì)胞、SCL2細(xì)胞

Fetal Bovine Heart Endothelial細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HT22細(xì)胞、U 266細(xì)胞、PLCPRF5細(xì)胞

University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A 375細(xì)胞、RLE-6TN細(xì)胞、NCM-460細(xì)胞

MNNG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：I90細(xì)胞、Clone 929細(xì)胞、SW 839細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

TO 175.T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RAW264.7細(xì)胞、HCC70細(xì)胞、SCL2細(xì)胞

Fetal Bovine Heart Endothelial細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HT22細(xì)胞、U 266細(xì)胞、PLCPRF5細(xì)胞

University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A 375細(xì)胞、RLE-6TN細(xì)胞、NCM-460細(xì)胞

MNNG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：I90細(xì)胞、Clone 929細(xì)胞、SW 839細(xì)胞

細(xì)胞生長特性：貼壁

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

H-1734細(xì)胞類似產(chǎn)品：：JM-1細(xì)胞、3T3NIH細(xì)胞、HBL-100細(xì)胞

KM-H2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HMC-1細(xì)胞、CaSki細(xì)胞、KP-2細(xì)胞

IGROV-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：G361細(xì)胞、PC-9/GR細(xì)胞、RPE-1細(xì)胞

HUASMC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HC11細(xì)胞、SKLU01細(xì)胞、hTERT-HME1細(xì)胞

TR-146細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA-231細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細(xì)胞、CHO細(xì)胞

KP 4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Saos2細(xì)胞、D341Med細(xì)胞、CCD 19Lu細(xì)胞

GA-10 clone 4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P388.D1細(xì)胞、Hs 636 T細(xì)胞、SNU-869細(xì)胞

H-716細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CHL-IU細(xì)胞、KYSE140細(xì)胞、MGH-U3細(xì)胞

VMRC-LCD細(xì)胞類似產(chǎn)品：：M059K細(xì)胞、NBL-S細(xì)胞、NCI-H1522細(xì)胞

Hs683T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1836細(xì)胞、PBL細(xì)胞、HTori3細(xì)胞

RFL-6 Cell|大鼠成纖維細(xì)胞

HS-294T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HF-91細(xì)胞、Hep 2細(xì)胞、LIXC002細(xì)胞

BrCL18細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MUTZ3細(xì)胞、SKMEL-2細(xì)胞、VK-2/E6E7細(xì)胞

CHG5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BE2-M17細(xì)胞、OCI-Ly1細(xì)胞、UCLA-SO-M20細(xì)胞

SU-DHL-16細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RH8994細(xì)胞、NPC-TW 01細(xì)胞、H184A1細(xì)胞

PFSK細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI H548細(xì)胞、RAW264細(xì)胞、SUSM-1細(xì)胞

SW 480細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Balb/c 3T3細(xì)胞、CAL120細(xì)胞、NCI/ADR-RES細(xì)胞

STTG1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：QGY 7701細(xì)胞、LNCaP-Clone-FGC細(xì)胞、SKRC20細(xì)胞

H1703細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DAKIKI Clone 1細(xì)胞、MDA1386細(xì)胞、CACO2細(xì)胞

MTC-TT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UMC11細(xì)胞、MeWo細(xì)胞、HBVSMC細(xì)胞

A 253細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P31 FUJ細(xì)胞、HFLS-RA細(xì)胞、FOXNY細(xì)胞

HCC-1937細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RBMEC細(xì)胞、OE21細(xì)胞、MDAMB330細(xì)胞

SNT8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CCD33Co細(xì)胞、OCI-LY-10細(xì)胞、HP615細(xì)胞

SCC-9細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Ls-174-T細(xì)胞、TU 686細(xì)胞、A2780/CP70細(xì)胞

SK LU 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EMT6細(xì)胞、LA-N-6(OAN)細(xì)胞、NCIH1836細(xì)胞

NCI-H345細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MOVAS-1細(xì)胞、MAC1細(xì)胞、K-1735細(xì)胞

NCIH128細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞、EBTr (NBL-4)細(xì)胞、G361mel細(xì)胞

TE8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RASMC細(xì)胞、NKM-1細(xì)胞、PLA-801D細(xì)胞

NPC-TW039細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Madison lung細(xì)胞、HCC-1954細(xì)胞、Ramos (RA)細(xì)胞

NCIH2141細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Large Cell Lung Cancer-103H細(xì)胞、BJAB-1細(xì)胞、MESSA-DX5細(xì)胞

OVCAR3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BLO-11細(xì)胞、SNB.19細(xì)胞、NCI-H711細(xì)胞

NCIH838細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MAVER1細(xì)胞、KMM-1細(xì)胞、NE-4C細(xì)胞

SW620細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Granta 519細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436細(xì)胞、Vero-76細(xì)胞

HT-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TE353.SK細(xì)胞、SK-N-BE2細(xì)胞、WM-239細(xì)胞

OCI-AML-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PSN1細(xì)胞、DMS79細(xì)胞、KLE細(xì)胞

H-1299細(xì)胞類似產(chǎn)品：：T98G細(xì)胞、P116細(xì)胞、MFE 296細(xì)胞

E6-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：FRhK-4細(xì)胞、293 c18細(xì)胞、143 B細(xì)胞

V79細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDCKII-WT細(xì)胞、SW-948細(xì)胞、Tokyo Medical and Dental university 8細(xì)胞

U-266 AR1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DI TNC1細(xì)胞、SU86.86細(xì)胞、H1819細(xì)胞

KMB17細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Verda reno細(xì)胞、CNE-2Z細(xì)胞、801-D細(xì)胞

RFL-6 Cell|大鼠成纖維細(xì)胞

KYSE 520細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H2122細(xì)胞、RC-4B/C細(xì)胞、NCIH889細(xì)胞

MCF-7/ADR細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CAL 62細(xì)胞、CRFK細(xì)胞、SCC9細(xì)胞

UMUC-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P388D1細(xì)胞、Psi-2 DAP細(xì)胞、MOLT 16細(xì)胞

SKNBE(2)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：786-0WT細(xì)胞、HEL細(xì)胞、MDCK-2細(xì)胞

HCT.116細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SO-Rb 50細(xì)胞、P3-X63-Ag8-653細(xì)胞、SHSY-5Y細(xì)胞

H841細(xì)胞類似產(chǎn)品：：B16 F1細(xì)胞、MonoMac1細(xì)胞、TE-671細(xì)胞

P388.D1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKHEP1細(xì)胞、BT 549細(xì)胞、U-87MG ATCC細(xì)胞

SN12PM6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COLO679細(xì)胞、HeLa細(xì)胞、KYSE180細(xì)胞

HONE-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PG-4 S+L-細(xì)胞、GM05372E細(xì)胞、H1522細(xì)胞

D341MD細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SHI-1細(xì)胞、Verda reno細(xì)胞、COLO-320-HSR細(xì)胞

CWR22Rv1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2110細(xì)胞、Det 562細(xì)胞、HME-1細(xì)胞

YH-13細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEp-2細(xì)胞、NT2細(xì)胞、SHEE細(xì)胞

MDA-MB-435 S細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA231-LM2細(xì)胞、DHL6細(xì)胞、INS1E細(xì)胞

SNU484細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs819T細(xì)胞、NCIH64細(xì)胞、OV-2008細(xì)胞

SBC-5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SACC-LM細(xì)胞、Soleus clone 8細(xì)胞、253J-Bladder-V細(xì)胞

EBTr細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RWPE2細(xì)胞、SNU869細(xì)胞、TSU-Pr1細(xì)胞

LA-N-6(OAN)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Mel RM細(xì)胞、MHCC97H細(xì)胞、NG 108-15細(xì)胞

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