"CF-1 MEF Cell|小鼠胚胎成纖維細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：胚胎；成纖維細(xì)胞；CF-１

細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣

體內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)及其操作步驟：【瘤細(xì)胞懸液接種】１)無(wú)菌選取生長(zhǎng)良HAO(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長(zhǎng)期培養(yǎng)瘤細(xì)胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)８０～１００目篩網(wǎng)過(guò)濾成細(xì)胞懸液；３)培養(yǎng)細(xì)胞應(yīng)用PBS洗兩遍；４)計(jì)數(shù)并調(diào)整細(xì)胞濃度至１０７～１０８／ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細(xì)胞懸液(０.１ml／部位，＞１０６細(xì)胞)。初次接種成功率低，細(xì)胞數(shù)盡可能多一些；６)次日注意觀察動(dòng)物一般情況。初次接種一般有一段較長(zhǎng)的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，Zui后固定為一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的時(shí)間?！靖顾龅慕⑴c腹水瘤的接種】將實(shí)體瘤細(xì)胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細(xì)胞，將這種腹水反復(fù)傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時(shí)，腹水常呈血性(含大量紅細(xì)胞)，反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過(guò)程如下。１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細(xì)胞離心和洗滌，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)；２)消毒動(dòng)物，左下腹穿刺接種１０６腹水瘤細(xì)胞；３)接種腹水瘤細(xì)胞后約７~１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號(hào)針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水經(jīng)３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?/p>

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

MDA-MB-175-VII細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW-1463細(xì)胞、KOSC2細(xì)胞、NB.4細(xì)胞

H-2052細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUM149-PT細(xì)胞、University of Arizona Cell Culture-893細(xì)胞、HPAF/CD18細(xì)胞

CCRF CEM細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ARO81-1細(xì)胞、NS1-Ag4細(xì)胞、UPCI-SCC-154細(xì)胞

BV-173細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 940.T細(xì)胞、WC00044細(xì)胞、H2141細(xì)胞

AHH1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RIN-m 14B細(xì)胞、H-1792細(xì)胞、TCC Sup細(xì)胞

細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源

CF-1 MEF Cell|小鼠胚胎成纖維細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

傳代的操作步驟注意事項(xiàng)：1)操作前要洗手，進(jìn)入超凈臺(tái)后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點(diǎn)燃酒精燈，操作在火焰附近進(jìn)行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時(shí)間不能太長(zhǎng)，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過(guò)營(yíng)養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。3)操作動(dòng)作要準(zhǔn)確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動(dòng)，增加污染機(jī)會(huì)。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺(tái)面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細(xì)胞傳代的操作步驟：1)吸除培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘，當(dāng)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)回縮，細(xì)胞間隙增大后，立即終止消化。4)吸除消化液，向瓶?jī)?nèi)注入Hanks液數(shù)毫升，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細(xì)胞時(shí)，動(dòng)作要輕，以免把已松動(dòng)的細(xì)胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液?jiǎn)为?dú)消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營(yíng)養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。6)計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，把細(xì)胞懸液分成等份分裝入數(shù)個(gè)培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代的操作步驟：1)吸出細(xì)胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。

MV(4;11)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PC12(高分化)細(xì)胞、WISH細(xì)胞、451-LU細(xì)胞

CA-46細(xì)胞類似產(chǎn)品：：B-95-8細(xì)胞、Daoy細(xì)胞、9L細(xì)胞

NCI-SNU-520細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUM-159細(xì)胞、H-2029細(xì)胞、NCIH1770細(xì)胞

L 929細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUNE-1細(xì)胞、HPAF-II/CD18細(xì)胞、H711細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：來(lái)源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫(kù)

MV(4;11)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PC12(高分化)細(xì)胞、WISH細(xì)胞、451-LU細(xì)胞

CA-46細(xì)胞類似產(chǎn)品：：B-95-8細(xì)胞、Daoy細(xì)胞、9L細(xì)胞

NCI-SNU-520細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUM-159細(xì)胞、H-2029細(xì)胞、NCIH1770細(xì)胞

L 929細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUNE-1細(xì)胞、HPAF-II/CD18細(xì)胞、H711細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來(lái)自嚙齒類或來(lái)自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無(wú)限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動(dòng)物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來(lái)，并擁有了更GAO的生長(zhǎng)率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過(guò)程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長(zhǎng)，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(huì)(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動(dòng)子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

SNT8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CCD33Co細(xì)胞、OCI-LY-10細(xì)胞、HP615細(xì)胞

EoL-1-cell細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BRL細(xì)胞、H-1048細(xì)胞、SPCA-1細(xì)胞

TE12細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UMNSAH/DF#1細(xì)胞、Rat podocyte細(xì)胞、OCI-Ly 1細(xì)胞

H6c7細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Y-1細(xì)胞、253JB-V細(xì)胞、LL/2細(xì)胞

RPMI7666細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MFD-1細(xì)胞、EFM192C細(xì)胞、Panc_05_04細(xì)胞

H-2291細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SuDHL 4細(xì)胞、BCaP-37細(xì)胞、HeLa/DDP細(xì)胞

TM-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LS174細(xì)胞、3T3-A31細(xì)胞、746T細(xì)胞

IEC 18細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H865細(xì)胞、alpha-TC1-6細(xì)胞、CL-40細(xì)胞

LY細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H7721細(xì)胞、H35 Reuber細(xì)胞、Karpas-422細(xì)胞

SkChA-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CMT93細(xì)胞、Human ErythroLeukemia細(xì)胞、H-211細(xì)胞

CF-1 MEF Cell|小鼠胚胎成纖維細(xì)胞

BTI-Tn-5B1-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RMC細(xì)胞、H1581細(xì)胞、OKT 3細(xì)胞

SK-RC-39細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PE/CA-PJ34細(xì)胞、BT.549細(xì)胞、COR-L51細(xì)胞

U266B1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OV433細(xì)胞、EO771細(xì)胞、OV1063細(xì)胞

H-1355細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CCC-HIE-2細(xì)胞、BERH-2細(xì)胞、UCLA NPA871細(xì)胞

PC-3/M細(xì)胞類似產(chǎn)品：：184A1細(xì)胞、NCM356細(xì)胞、H1155細(xì)胞

TNC-1B12B4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Pa18C細(xì)胞、G-402細(xì)胞、U373MG細(xì)胞

TNC-1B12B4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Pa18C細(xì)胞、G-402細(xì)胞、U373MG細(xì)胞

SNK6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BJA-B1細(xì)胞、H69C細(xì)胞、CCC-HPF-1細(xì)胞

Centre Antoine Lacassagne-27細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA435細(xì)胞、HIT-T15細(xì)胞、C17.2細(xì)胞

MLA144細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCA7細(xì)胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]細(xì)胞、Scott and White No. 13細(xì)胞

Farage OL細(xì)胞類似產(chǎn)品：：F-36P細(xì)胞、SK-RC 52細(xì)胞、SK-MEL5細(xì)胞

PT-67細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞、C666-1細(xì)胞、NCI-SNU-620細(xì)胞

CAL-33細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COLO 678細(xì)胞、WM451細(xì)胞、hTERT-HPNE細(xì)胞

NCI-SNU-668細(xì)胞類似產(chǎn)品：：B16-BL6細(xì)胞、PATU-S細(xì)胞、L2細(xì)胞

Hs940.T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：293 HEK細(xì)胞、UMNSAH-DF 1細(xì)胞、IGROV細(xì)胞

COLO684細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GP5d細(xì)胞、MDA134細(xì)胞、SNUC1細(xì)胞

NALM6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Ramos (RA)細(xì)胞、IPEC-J2細(xì)胞、CTV1細(xì)胞

CHG-5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW1573細(xì)胞、A375.S2細(xì)胞、CL 1-5細(xì)胞

Institute for Medical Research-90細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CACO2細(xì)胞、NCIH2009細(xì)胞、NCI-H322T細(xì)胞

C8161細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1238細(xì)胞、H196細(xì)胞、FO [Mouse myeloma]細(xì)胞

SKNO1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-175VII細(xì)胞、HCC-1937細(xì)胞、CT26細(xì)胞

MV3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TE7細(xì)胞、IHH-4細(xì)胞、RD-2細(xì)胞

Tj-905細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GH 3細(xì)胞、COLO678細(xì)胞、mousepodocyte細(xì)胞

M-20細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCCC9810細(xì)胞、CAL148細(xì)胞、MUVEC細(xì)胞

MV 3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDAMB361細(xì)胞、UCLA SO M21細(xì)胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細(xì)胞

NCI-H2052細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KYSE 180細(xì)胞、H22細(xì)胞、16HBE140細(xì)胞

NCI-H441細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC-366細(xì)胞、MN 60細(xì)胞、DITNC1細(xì)胞

SUM-190細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1355細(xì)胞、FL62891細(xì)胞、Oka-C1細(xì)胞

OCI-Ly 3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：32Dc3細(xì)胞、LA 4細(xì)胞、SR-786細(xì)胞

CF-1 MEF Cell|小鼠胚胎成纖維細(xì)胞

PL-12細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MOLT-3細(xì)胞、NCIH747細(xì)胞、NIE-115細(xì)胞

Ly18細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH28細(xì)胞、TC-1 [Mouse lung]細(xì)胞、P3.times.63 Ag8.653細(xì)胞

U266B1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OV433細(xì)胞、EO771細(xì)胞、OV1063細(xì)胞

NCIH1618細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CFSC-2G細(xì)胞、LAN1細(xì)胞、KP-N-YN細(xì)胞

SMA 560細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HPAF-II細(xì)胞、H2444細(xì)胞、I90細(xì)胞

NCIH208細(xì)胞類似產(chǎn)品：：L6565細(xì)胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4細(xì)胞、M-G63細(xì)胞

RMS 13細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1793細(xì)胞、EBC1細(xì)胞、LC-1Sq細(xì)胞

MLMEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U-266細(xì)胞、GDM-1細(xì)胞、HuT-78細(xì)胞

MLMEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U-266細(xì)胞、GDM-1細(xì)胞、HuT-78細(xì)胞

MUS-M1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KE-37細(xì)胞、PCI-4M細(xì)胞、BNCL2細(xì)胞

L細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PMVEC細(xì)胞、DU-4475細(xì)胞、NCI-SNU-668細(xì)胞

End1/E6E7細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Vero E6細(xì)胞、HECCL-1細(xì)胞、H1869細(xì)胞

HS-5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEK293-F細(xì)胞、HEK293細(xì)胞、TN5B14細(xì)胞

HCC-15細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MRMT-1細(xì)胞、Swiss 3T3細(xì)胞、OCI-Ly1細(xì)胞

HCE-T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Panc-8_13細(xì)胞、CBRH-7919細(xì)胞、HTh-74細(xì)胞

MF2059細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WM266mel細(xì)胞、HBL 100細(xì)胞、SU.86細(xì)胞

6-T CEM細(xì)胞類似產(chǎn)品：：1.1B4細(xì)胞、TR146細(xì)胞、Walker256細(xì)胞

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