"RFL-6 Cell:大鼠成纖維細胞系
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：胚肺；成纖維細胞；SD大鼠
NK-92 MI細胞系相關產品：H2291細胞、GP293細胞、BE(2)M17細胞
NCIH1568細胞系相關產品：THEECs細胞、118 MG細胞、RPMC細胞
HLEB3細胞系相關產品：McA-RH 7777細胞、2780CP細胞、NRK-52E細胞
UCW 100細胞系相關產品：RPTEC/TERT 1細胞、SW839細胞、TCam 2細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
RFL-6 Cell:大鼠成纖維細胞系
細胞消化過程總結：其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞（絕大部分１min不到）。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質材料的附著已經消失了，細胞之間的附著也已經消失了，細胞已經獨立分布了（雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個時候應該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液（不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開）。細胞只要能從基質上脫離下來，這個時候即使是成片的（比如Calu-３細胞），吹打不超過２０次后（一般１０次即可），成小規(guī)模聚集（１０個細胞左右），是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞（潤洗方法５min還不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散；３)取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細胞密度達到８０%以后重復１項操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化，請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
RSMC細胞系相關產品：SU-DH-L5細胞、TKB1細胞、UWB1.289細胞
H-929細胞系相關產品：C3H/10T1/2 CL8細胞、ZR751細胞、NCI-H661細胞
TFK-1細胞系相關產品：PNT1A細胞、MES-SA-Dx5細胞、MDA PCa 2b細胞
MDA435細胞系相關產品：NUGC-3細胞、MFE280細胞、JEG3細胞
BC3H-1細胞系相關產品：769P細胞、ETCC007細胞、GEO細胞
細胞生長特性：貼壁
RFL-6 Cell:大鼠成纖維細胞系
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細胞始脫落時，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細胞施加胰酶選擇，因為總是貼壁不牢的細胞先脫落，對腫瘤細胞來說，這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點，直接加酶消化應該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積１/１０v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很好并且不損失細胞！
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
SW-527細胞系相關產品：293E細胞、Capan-1細胞、PASMCS細胞
H187細胞系相關產品：NCI-H748細胞、TE-7細胞、H2342細胞
COLO-205細胞系相關產品：NCI-H1105細胞、COV 434細胞、NMCG-1細胞
H1666_DA細胞系相關產品：RK13細胞、NCI-SNU-387細胞、ARO細胞
H1993細胞系相關產品：Calu-1細胞、U20-S細胞、Centre Antoine Lacassagne-39細胞
TE-14細胞系相關產品：A-20細胞、C33A細胞、HEC1A細胞
RMS 13細胞系相關產品：NCI-H1793細胞、EBC1細胞、LC-1Sq細胞
RFL-6 Cell:大鼠成纖維細胞系
PC10細胞系相關產品：MIMVEC細胞、BNCL2細胞、NCI-H2106細胞
HTh 74細胞系相關產品：MDA-MB-415細胞、GM00637細胞、IOSE-Mar細胞
KM-H2細胞系相關產品：HMC-1細胞、CaSki細胞、KP-2細胞
PC-9細胞系相關產品：CWR-22rv1細胞、V79-GalK1細胞、JJN3細胞
A-101D細胞系相關產品：OCI/AML-3細胞、FRTL-5 Cl 2細胞、TE-15細胞
R3/1細胞系相關產品：JS1細胞、NK-10A細胞、HSC2細胞
PaTu 8988 S細胞系相關產品：Panc 02細胞、PLC細胞、NCTC clone 929細胞
UACC893細胞系相關產品：H-841細胞、HEK-293FT細胞、CCRF-CEM/S細胞
TMD8細胞系相關產品：UMNSAH/DF-1細胞、H-1915細胞、SNU387細胞
TMD8細胞系相關產品：UMNSAH/DF-1細胞、H-1915細胞、SNU387細胞
HEY-A8細胞系相關產品：H1395細胞、SNU520細胞、CHO cell clone K1細胞
SKNBE-2細胞系相關產品：Laboratory of Allergic Diseases 2細胞、IMCD3細胞、SCL I細胞
NCIH1573細胞系相關產品：CT26細胞、KYSE50細胞、MOVAS細胞
RK13細胞系相關產品：CCLP1細胞、AMJ2C8細胞、H-2444細胞
HSC-1細胞系相關產品：293 H細胞、HOP 62細胞、WI-38細胞
PANC-02-03細胞系相關產品：HEK-293-EBNA細胞、MSTO211H細胞、MeWo細胞
CTLL-2細胞系相關產品：M14細胞、CemT4細胞、KLM-1細胞
THP-1細胞系相關產品：OVCAR420細胞、P388-D1細胞、High Five細胞
H128細胞系相關產品：Caco2BBe細胞、MBVP細胞、MGH-U3 (RN)細胞
HL1細胞系相關產品：EM-3細胞、KU-812F細胞、Human Foreskin Fibroblast細胞
X63-Ag8-653細胞系相關產品：CemT4細胞、C-4-I細胞、NCIH1155細胞
HNE-1細胞系相關產品：SP-2細胞、DMS 79細胞、NCI-SNU-119細胞
MDAPCa-2b細胞系相關產品：TOV-112D細胞、U-373MG細胞、HS-683細胞
RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞系相關產品：HPDE細胞、TOV-21G細胞、H-2107細胞
TE-4細胞系相關產品：GOS-3細胞、Hs 675.T細胞、SNT-8細胞
HTori3細胞系相關產品：GM637A細胞、MDA330細胞、P30/Ohkubo細胞
MCF7ADR細胞系相關產品：SNU-5細胞、A549ATCC細胞、BrCL12細胞
293細胞系相關產品：NPA87細胞、HT-144細胞、A875細胞
MESSA/Dx5細胞系相關產品：KM12-SM細胞、HLEC-B3細胞、MEG01細胞
H1781細胞系相關產品：MAC1細胞、mREC細胞、HEC151細胞
Hs-27細胞系相關產品：SKNBE2細胞、NTERA2-D1細胞、SNU5細胞
Hs 274細胞系相關產品：CFPAC-1細胞、TK-10細胞、AML 12細胞
OK-WT細胞系相關產品：BBE細胞、AML-193細胞、PLA-801C細胞
SG231細胞系相關產品：K7M2細胞、32Dc3細胞、MRMT-1細胞
CAL51細胞系相關產品：MDA-MB231細胞、HEK/293細胞、HSC細胞
OCI AML2細胞系相關產品：MKN-45細胞、SUNE1細胞、GM00346B細胞
ARH-77細胞系相關產品：RFL-6細胞、NCI-N87細胞、HEK/EBNA細胞
Ramos-2G6-4C10細胞系相關產品：BT 549細胞、PANC0327細胞、COS7細胞
MNNG/HOS細胞系相關產品：H2195細胞、Hs-852-T細胞、OCI-LY-3細胞
CL1-5細胞系相關產品：HuH-1細胞、HEp-2細胞、SW 626細胞
T98G細胞系相關產品：RS4:11細胞、130T細胞、NSI/1-Ag4-1細胞
ChaGo-K1細胞系相關產品：U-118 MG細胞、MDA-330細胞、alpha TC1.6細胞
ANA-1細胞系相關產品：RBE4細胞、Rat 2細胞、NCI-460細胞
RFL-6 Cell:大鼠成纖維細胞系
alpha TC1 clone 6細胞系相關產品：Leukemic 1210細胞、COLO-320-HSR細胞、H19-7細胞
RPMI 6666細胞系相關產品：TOV-112細胞、Fetal Human Colon細胞、NCI-H1437細胞
Jurkat E6.1細胞系相關產品：H-1869細胞、H2291細胞、NCI522細胞
NCIH1568細胞系相關產品：THEECs細胞、118 MG細胞、RPMC細胞
HCC0070細胞系相關產品：NCIH1395細胞、TO 175.T細胞、DHL-16細胞
H1299細胞系相關產品：C-4-I細胞、Jurkat細胞、T8細胞
NCI-H1299細胞系相關產品：COR-L23細胞、Madison 109細胞、C643細胞
OVCAR5細胞系相關產品：SK-NSH細胞、C3H10T1/2 clone8細胞、H524細胞
P30-OHKUBO細胞系相關產品：BALB/3T3 (clone A31)細胞、SW13細胞、Renal Carcinoma細胞
HUT 28細胞系相關產品：NCIH1666細胞、SNU-475細胞、MEG-01細胞
HEL-92.1.7細胞系相關產品：H-35 Reuber細胞、SW620細胞、H-1836細胞
LTEPsm細胞系相關產品：NCI-H596細胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞、C57 Mouse Tumor 64細胞
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關鍵字： RFL-6 Cell:大鼠成纖維細胞系
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