PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱：副豬嗜血桿菌(HPS)核酸
英文名稱：詳見說明書
編號： FSP2869
分類：核酸檢測試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線（以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭，從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭，從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 產(chǎn)品僅供科研從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR（見下步），每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
數(shù)據(jù)采集：
具體操作按所用儀器推薦的流程進(jìn)行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時(shí)，吸收光譜在 471nm，結(jié)合 DNA 時(shí)的吸收光譜在 500nm，發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
以 Cps 陽性對照濃度的 log 值為橫軸，以 Ct 值為縱軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測樣品濃度的 log 為橫軸，以 Ct 值為縱軸，通過待測樣品的 Ct 值計(jì)算出樣品 DNA 的濃度。
Human CCL3L1(Chemokine C-C-Motif Ligand 3 Like Protein 1) ELISA KitHuman KYN(Kynurenine) ELISA KitL-脯氨酸糞便DNA分離試劑盒
Human CLL1(Collectin Liver 1) ELISA KitHuman Acetylated p53 ELISA KitL-脯氨酸糞便細(xì)胞DNA分離試劑盒
Human CHD5(Chromodomain Helicase DNA Binding Protein 5) ELISA KitHuman Cleaved CASP9(Cleaved Caspase-9) ELISA KitL-脯氨酸糞便細(xì)菌DNA分離試劑盒
Human CK-13/KRT13(CytokeRatin 13) ELISA KitHuman Cleaved CASP8(Cleaved Caspase-8) ELISA KitL-賴氨酸糞便DNA高質(zhì)純化試劑盒
Human CGα(Chorionic Gonadotropin Alpha Polypeptide) ELISA KitHuman Cleaved BID/TBID(Cleaved BH3-interacting domain death agonist) ELISA KitL-賴氨酸糞便DNA分離＋高質(zhì)純化試劑盒
Human CHGB(Chromogranin B) ELISA KitHuman CD281/TLR1(Toll-like receptor 1) ELISA KitL-賴氨酸石蠟切片DNA分離試劑盒
Human CHRM2(Cholinergic Receptor, Muscarinic 2) ELISA KitHuman Bcl2L2(Bcl-2 Like Protein 2) ELISA KitL-精氨酸石蠟切片DNA高質(zhì)純化試劑盒
Human CK-20/KRT20(CytokeRatin 20) ELISA KitHuman HSP72(Heat Shock Protein 72) ELISA KitL-精氨酸石蠟切片DNA分離＋高質(zhì)純化試劑盒
副豬嗜血桿菌(HPS)核酸牛蒡子苷元6-TAMRA CPG *500 Å*5mg 1008-72-6Rat annexin Ⅴ, ANX-Ⅴ Elisa KitHPLC98%6-TAMRA CPG *500 Å*5mgArg進(jìn)口、國產(chǎn)250英文名稱：Emedastine Difumarate100mg重組人 FSH alpha / TSH alpha / CGA 蛋白 (His 標(biāo)簽)特價(jià)促銷195723-38-796T促甲狀腺素(TSH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%6-TAMRA CPG *500 Å*5mgArg72-19-5高端化學(xué)試劑Human connective tissue growth factor, CTGF Elisa Kit進(jìn)口、國產(chǎn)1ml*10支英文名稱：10mg重組人 CCL4 / MIP1B 蛋白 (His 標(biāo)簽)474893-07-796T促甲狀腺素(TSH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%6-TAMRA CPG *1000 Å*5mgTR72-19-5高端化學(xué)試劑Human Interleukin 18, IL-18 Elisa Kit
6-TAMRA CPG *1000 Å*5mg 1008-72-6Rat annexin Ⅴ, ANX-Ⅴ Elisa KitHPLC98%6-TAMRA CPG *1000 Å*5mgTR進(jìn)口、國產(chǎn)1ml*10支英文名稱：10mg重組人 CCL4 / MIP1B 蛋白 (His 標(biāo)簽)474893-07-796T促甲狀腺素(TSH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%6-TAMRA CPG *1000 Å*5mgTR72-19-5高端化學(xué)試劑Human Interleukin 18, IL-18 Elisa Kit 進(jìn)口、國產(chǎn)250英文名稱：5mg重組人 ENPEP / Aminopeptidase A 蛋白 (His 標(biāo)簽)特價(jià)供應(yīng)195735-16-196T抗精子抗體(AsAb)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%6-TAMRA 亞酰胺5mgTPI632-20-2高端化學(xué)試劑Human Interleukin 18, IL-18 Elisa Kit
6-TAMRA 亞酰胺5mg 1008-88-4Rat anti-endothelial cell antibody, AECA Elisa KitHPLC98%6-TAMRA 亞酰胺5mgTPI進(jìn)口、國產(chǎn)250英文名稱：5mg重組人 ENPEP / Aminopeptidase A 蛋白 (His 標(biāo)簽)特價(jià)供應(yīng)195735-16-196T抗精子抗體(AsAb)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%6-TAMRA 亞酰胺5mgTPI632-20-2高端化學(xué)試劑Human Interleukin 18, IL-18 Elisa Kit 進(jìn)口、國產(chǎn)250英文名稱：25mg重組人 CCL16 / HCC-4 / NCC4 蛋白 (His 標(biāo)簽)現(xiàn)貨促銷51828-10-596T抗子宮內(nèi)膜抗體(Anti-EMAb)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%BHQ-1 CPG *500 Å*5mgNURR1632-20-2高端化學(xué)試劑Human mucosae associated epithelia chemokine, MEC Elisa Kit
BHQ-1 CPG *500 Å*5mg 1008-88-4Rat anti-endothelial cell antibody, AECA Elisa KitHPLC98%BHQ-1 CPG *500 Å*5mgNURR1進(jìn)口、國產(chǎn)250英文名稱：25mg重組人 CCL16 / HCC-4 / NCC4 蛋白 (His 標(biāo)簽)現(xiàn)貨促銷51828-10-596T抗子宮內(nèi)膜抗體(Anti-EMAb)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%BHQ-1 CPG *500 Å*5mgNURR1632-20-2高端化學(xué)試劑Human mucosae associated epithelia chemokine, MEC Elisa Kit進(jìn)口、國產(chǎn)250英文名稱：Amiodarone Related Compound H20mg重組人 CCL16 / HCC-4 / NCC4 蛋白 (His 標(biāo)簽)特價(jià)促銷2749-28-296T脂聯(lián)素(ADP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%BHQ-1 CPG *1000 Å*5mgPAIT1632-20-2高端化學(xué)試劑Human mucosae associated epithelia chemokine, MEC Elisa Kit
BHQ-1 CPG *1000 Å*5mg 1008-89-5Rat intact Parathormone , i-PTH Elisa Kit HPLC98%BHQ-1 CPG *1000 Å*5mgPAIT1進(jìn)口、國產(chǎn)250英文名稱：Amiodarone Related Compound H20mg重組人 CCL16 / HCC-4 / NCC4 蛋白 (His 標(biāo)簽)特價(jià)促銷2749-28-296T脂聯(lián)素(ADP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%BHQ-1 CPG *1000 Å*5mgPAIT1632-20-2高端化學(xué)試劑Human mucosae associated epithelia chemokine, MEC Elisa Kit進(jìn)口、國產(chǎn)250英文名稱：Potassium Bitartrate (AS)3g重組人 Interferon alpha-B / IFNA8 蛋白 (His 標(biāo)簽)5631-68-596T腫瘤壞死因子α(TNFα)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%對硝基苯酸二鈉鹽5mgMDH632-20-2高端化學(xué)試劑Human mucosae associated epithelia chemokine, MEC Elisa Kit
對硝基苯酸二鈉鹽5mg 1008-89-5Rat intact Parathormone , i-PTH Elisa Kit HPLC98%對硝基苯酸二鈉鹽5mgMDH進(jìn)口、國產(chǎn)250英文名稱：Potassium Bitartrate (AS)3g重組人 Interferon alpha-B / IFNA8 蛋白 (His 標(biāo)簽)5631-68-596T腫瘤壞死因子α(TNFα)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%對硝基苯酸二鈉鹽5mgMDH632-20-2高端化學(xué)試劑Human mucosae associated epithelia chemokine, MEC Elisa Kit進(jìn)口、國產(chǎn)250英文名稱：Sodium Lactate 200mg重組人 KIAA1279 蛋白特價(jià)供應(yīng)60125-23-796T表面活性物質(zhì)關(guān)聯(lián)蛋白A(SPA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%對硝基苯酸二鈉鹽5mgβ Manase80-68-2高端化學(xué)試劑Human mucosae associated epithelia chemokine, MEC Elisa Kit
對硝基苯酸二鈉鹽5mg 1008-89-5Rat Calf Intestine Alkaline Phosphatase, CIAP Elisa KitHPLC98%對硝基苯酸二鈉鹽5mgβ Manase進(jìn)口、國產(chǎn)250英文名稱：Sodium Lactate 200mg重組人 KIAA1279 蛋白特價(jià)供應(yīng)60125-23-796T表面活性物質(zhì)關(guān)聯(lián)蛋白A(SPA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%對硝基苯酸二鈉鹽5mgβ Manase80-68-2高端化學(xué)試劑Human mucosae associated epithelia chemokine, MEC Elisa Kit進(jìn)口、國產(chǎn)250英文名稱：Carprofen Related Compound A50mg重組人 GABARAP / Apg8p1 蛋白 (His & MBP 標(biāo)簽)現(xiàn)貨促銷10210-17-096T轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGFβ1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%螢火蟲熒光素酶5mgβ Manase80-68-2高端化學(xué)試劑Human B cell activation factorr from the tumor necrosis factor family receptor, BAFF-R Elisa Kit
東北貫眾素螢火蟲熒光素酶5mg 1009-36-5Rat Calf Intestine Alkaline Phosphatase, CIAP Elisa KitHPLC98%螢火蟲熒光素酶5mgβ Manase進(jìn)口、國產(chǎn)250英文名稱：Carprofen Related Compound A50mg重組人 GABARAP / Apg8p1 蛋白 (His & MBP 標(biāo)簽)現(xiàn)貨促銷10210-17-096T轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGFβ1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%螢火蟲熒光素酶5mgβ Manase80-68-2高端化學(xué)試劑Human B cell activation factorr from the tumor necrosis factor family receptor, BAFF-R Elisa Kit進(jìn)口、國產(chǎn)250英文名稱：10mg重組人 Annexin A8 / ANXA8 蛋白 (His 標(biāo)簽)特價(jià)促銷24513-51-796T組胺(HIS)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%D-蟲熒光素游離酸5mgPIGR80-68-2高端化學(xué)試劑Human B cell activation factorr from the tumor necrosis factor family receptor, BAFF-R Elisa Kit
D-蟲熒光素游離酸5mg 1009-36-5associated protein A, SP-A Elisa KitHPLC98%D-蟲熒光素游離酸5mgPIGR進(jìn)口、國產(chǎn)250英文名稱：10mg重組人 Annexin A8 / ANXA8 蛋白 (His 標(biāo)簽)特價(jià)促銷24513-51-796T組胺(HIS)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%D-蟲熒光素游離酸5mgPIGR80-68-2高端化學(xué)試劑Human B cell activation factorr from the tumor necrosis factor family receptor, BAFF-R Elisa Kit進(jìn)口、國產(chǎn)250英文名稱：50mg重組人 ADPRH / ARH1 蛋白 (His 標(biāo)簽)263844-79-796T內(nèi)皮素1(EDN1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%D-蟲熒光素游離酸5mgNetrin-480-68-2高端化學(xué)試劑Human Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 2, VEGFR-2/Flk-1 Elisa Kit
D-蟲熒光素游離酸5mg 1009-36-5associated protein A, SP-A Elisa KitHPLC98%D-蟲熒光素游離酸5mgNetrin-4進(jìn)口、國產(chǎn)250英文名稱：50mg重組人 ADPRH / ARH1 蛋白 (His 標(biāo)簽)263844-79-796T內(nèi)皮素1(EDN1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%D-蟲熒光素游離酸5mgNetrin-480-68-2高端化學(xué)試劑Human Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 2, VEGFR-2/Flk-1 Elisa Kit 進(jìn)口、國產(chǎn)250英文名稱：50mg重組人 DCUN1D2 蛋白 (His 標(biāo)簽)特價(jià)供應(yīng)17245-30-696T維生素D2(VD2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%D-蟲熒光素游離酸5mgAPCA2592-18-9高端化學(xué)試劑Human Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 2, VEGFR-2/Flk-1 Elisa Kit
儲(chǔ)存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
關(guān)鍵字： 副豬嗜血桿菌(HPS);核酸;48T;FSP2869;
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.，China)是一家生物企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷售。主營產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細(xì)胞株、原代細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.，China)先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué)，暨南大學(xué)，南京工業(yè)大學(xué)，曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機(jī)研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒，種屬標(biāo)本齊全,有專門針對人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標(biāo)本的試劑盒；另有針對各種動(dòng)物（鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚）的科研試劑。
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