抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、產(chǎn)品僅用于科研進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復)
英文名稱 Anti-DAG1/Alpha Dystroglycan
中文名稱 肌萎縮相關蛋白DAG1抗體
別 名 AGRNR; Alpha-DG; Beta-DG; Beta-dystroglycan; beta Dystroglycan; DAG; Dag1; DAG1_HUMAN; Dystroglycan 1 (dystrophin-associated glycoprotein 1); Dystroglycan; Dystrophin-associated glycoprotein 1; 156DAG; A3a.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Horse, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
研究領域 免疫學 神經(jīng)生物學 信號轉(zhuǎn)導 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 細胞骨架 細胞外基質(zhì)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 98kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human DAG1 (501-550aa)
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.產(chǎn)品僅用于科研用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
下列是肌萎縮相關蛋白DAG1抗體 的相關熱銷產(chǎn)品:
鹽克侖特羅英文名稱:Clenbuterol hydrochloride保存:20℃,避光規(guī)格:50mg離子轉(zhuǎn)運相關蛋白SLC7A9一抗
鹽可樂定英文名稱:Clonidine hydrochloride保存:20℃,避光規(guī)格:100mg核蛋白相互作用蛋白1一抗
鹽多巴英文名稱:Dopamine hydrochloride保存:20℃,避光規(guī)格:200mgFHOD3蛋白一抗
鹽多塞平英文名稱:Doxepin hydrochloride保存:20℃,避光規(guī)格:100mg監(jiān)理蛋白一抗
鹽多沙普侖英文名稱:Do Schaap Leon hydrochloride保存:20℃,避光規(guī)格:50mg溶質(zhì)載體蛋白家族20成員2一抗
鹽海索英文名稱:Benzhexol hydrochloride保存:20℃,避光規(guī)格:100mg肺表面活性蛋白A一抗
鹽海拉明英文名稱:Diphenhydramine hydrochloride保存:20℃,避光規(guī)格:100mg單羧轉(zhuǎn)運蛋白2一抗
鹽英文名稱:Amiodarone hydrochloride保存:20℃,避光規(guī)格:100mg線粒體二羧載體蛋白一抗
洋地黃毒苷英文名稱:Digitoxin保存:20℃,避光規(guī)格:50mg運動神經(jīng)元生存蛋白1
雌二英文名稱:Estradiol valerate保存:20℃,避光規(guī)格:100mg溶質(zhì)轉(zhuǎn)運蛋白家族44成員1一抗
維生素D3英文名稱:Vitamin D3保存:20℃,避光規(guī)格:100mg轉(zhuǎn)運蛋白家族39成員7一抗
酞安英文名稱:Tai Dingan保存:20℃,避光規(guī)格:50mg突觸結(jié)合蛋白1一抗
美法英文名稱:Melphalan保存:20℃,避光規(guī)格:100mg化突觸結(jié)合蛋白1一抗
乳糖英文名稱:Lactose保存:20℃,避光規(guī)格:300mg突觸結(jié)合蛋白5一抗
乳果糖英文名稱:Lactulose保存:20℃,避光規(guī)格:1gSYF2蛋白一抗
鹽羅哌卡因右旋體(鹽羅哌卡因雜質(zhì)B)英文名稱:Ropivacaine hydrochloride dextroisomer (ropivacaine hydrochloride impurity B)保存:20℃,避光規(guī)格:20mg外紡錘體極樣蛋白1一抗
鹽羅哌卡因英文名稱:Ropivacaine hydrochloride保存:20℃,避光規(guī)格:100mg膽固醇?;D(zhuǎn)移酶2一抗
血小板內(nèi)皮細胞黏附分子1抗體Alnusdiol中文名:赤楊二醇別名:分子式:C19H22O4
CD36抗體Hannokinol中文名:別名:分子式:C19H24O4
神經(jīng)細胞粘附分子1抗體Protosappanin A dimethyl acetal中文名:別名:分子式:C17H18O6
CD68抗體Mulberrofuran G pentaacetate中文名:別名:分子式:C44H36O13
胞漿-5´-核苷酸酶-Ⅱ抗體Isorhapontigenin中文名:異丹葉大黃素別名:分子式:C15H14O4
肌萎縮相關蛋白DAG1抗體 Paenibacillus alvei種屬:Paenibacillus alvei
安全等級:1
模式菌株:no
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:104
生長條件:30℃蜂房類芽孢桿菌