抗體反應(yīng)的因素:
1.電解質(zhì) :抗原抗體特異結(jié)合后,膠體粒便可發(fā)生脫水作用,此時(shí)易受電解質(zhì)影響,產(chǎn)品僅用于科研如有適當(dāng)濃度的電解質(zhì)存在就會(huì)使它們失去部分負(fù)電荷而相互凝聚,于是出現(xiàn)明顯的凝集或沉淀現(xiàn)象。
2.酸堿度:合適的pH為6-8。
3.溫度:37℃通常是抗原體反應(yīng)最適溫度。
跨膜蛋白16A/鈣激活氯離子通道抗體 別 名 ANO 1; ANO1; ANO1_HUMAN; Anoctamin 1; Anoctamin 1 calcium activated chloride channel; Anoctamin-1; Anoctamin1; Discovered on gastrointestinal stromal tumors protein 1; DOG 1; FLJ10261; Membrane protein; Oral cancer overexpressed 2; Oral cancer overexpressed protein 2; ORAOV 2; ORAOV2; TAOS 2; TAOS2; TMEM 16A; TMEM16A; Transmembrane protein 16A (eight membrane spanning domains); Transmembrane protein 16A; Tumor amplified and overexpressed sequence 2; Tumor-amplified and overexpressed sequence 2.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse
產(chǎn)品類型 一抗
英文名稱 Anti-DOG-1/TMEM16A
中文名稱 跨膜蛋白16A/鈣激活氯離子通道抗體
研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 細(xì)胞類型標(biāo)志物
蛋白分子量 predicted molecular weight: 114kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human DOG-1/TMEM16A
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產(chǎn)品應(yīng)用 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
實(shí)驗(yàn)步驟:
1、石蠟切片,常規(guī)脫蠟至水
2、蒸餾水沖洗,pbs 浸泡5 分鐘(如需采用抗原修復(fù),在此步驟后進(jìn)行)。
3、3%雙氧水去離子水(無(wú)色液體)孵育15-20 分鐘,以消除內(nèi)源性過(guò)氧物酶活性。
4、滴加試劑A(藍(lán)色液體)室溫孵育15-20 分鐘,傾去,勿洗。
5、滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗,37℃孵育2-3 小時(shí)或4℃過(guò)夜。
6、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
7、滴加試劑B(黃色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
8、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
9、滴加試劑C(橙色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
10、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
11、顯色劑顯色(DAB 或AEC)
12、自來(lái)水充分沖洗。
13、如果需要,可進(jìn)行復(fù)染,脫水,透明。
14、選擇適當(dāng)?shù)姆馄瑒┓馄?/span>
抗體的鑒定:
1)抗體的效價(jià)鑒定:不管是用于診斷還是用于治療,制備抗體的目的都是要求較高效價(jià)。不同的抗原制備的抗體,要求的效價(jià)不一。鑒定效價(jià)的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn),酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價(jià),一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)來(lái)鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識(shí)別能力??贵w的特異性高,它的識(shí)別能力就強(qiáng)。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來(lái)表示。交叉反應(yīng)率可用競(jìng)爭(zhēng)抑制試驗(yàn)測(cè)定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競(jìng)爭(zhēng)抑制曲線,計(jì)算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時(shí)的濃度,并按公式計(jì)算交叉反應(yīng)率。
產(chǎn)品僅用于科研如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無(wú)窮大時(shí),表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0,即該血清的特異性較好。
3)抗體親和力:是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫(kù)侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol??贵w親和力的測(cè)定對(duì)抗體的篩選,確定抗體的用途,驗(yàn)證抗體的均一性等均有重要意義。
抗體反應(yīng)特點(diǎn):
1.高度特異性,特異性是抗原抗體反應(yīng)的最主要特征,特定抗原決定簇只與特定抗體結(jié)合;
2.可逆性:抗原與抗體結(jié)合形成抗原抗體復(fù)合物的過(guò)程是一種動(dòng)態(tài)平衡, 其反應(yīng)式為:Ag+AbAg·Ab;
3.適當(dāng)濃度和比例;
4.敏感性:在測(cè)定血清中某一物質(zhì)的含量時(shí),化學(xué)比色法的敏感度為mg/ml水平,酶反應(yīng)測(cè)定法的敏感度約為5~10μg/ml,免疫測(cè)定中凝膠擴(kuò)散法的敏感度與酶反應(yīng)法相仿。
含試劑:
1、一抗(應(yīng)用:IHC-P=1:400-800 IHC-F=1:400-800 )
2、無(wú)色試劑:內(nèi)源性過(guò)氧化物酶阻斷劑
3、試劑A:封閉用正常山羊血清工作液
4、試劑B:生物素標(biāo)記二抗工作液:生物素標(biāo)記羊抗兔IgG
5、試劑C:辣根酶標(biāo)記鏈酶卵白素工作液
6、顯色液D液 (棕色) 1ml
7、顯色液E液(白色)20ml
蟾毒靈;蟾酥靈英文名稱:Bufalin; of Venenum Bufonis保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支互養(yǎng)蛋白2一抗
鹽黃連英文名稱:Huang Lianjian hydrochloride保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支互養(yǎng)蛋白3一抗
鹽加替沙星英文名稱:Gatifloxacin hydrochloride含量:暫不提供保存:20℃,避光規(guī)格:100mg互養(yǎng)蛋白1,2,3一抗
利福昔明英文名稱:Rifaximin含量:暫不提供保存:20℃,避光規(guī)格:100mg化認(rèn)知缺陷突觸相關(guān)蛋白SynGAP一抗
利福噴英文名稱:Rifapentine含量:暫不提供保存:20℃,避光規(guī)格:100mg碳?xì)溻c協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4A4突變型一抗
利福B英文名稱:Rifamycin B含量:暫不提供保存:20℃,避光規(guī)格:100mg骨形態(tài)發(fā)生抑制蛋白SOST一抗
利福S英文名稱:Rifamycin S含量:暫不提供保存:20℃,避光規(guī)格:100mg生長(zhǎng)抑素一抗
7ACA(7頭孢)英文名稱:7 ACA (7 amino cephalosporanic acid)含量:暫不提供保存:20℃,避光規(guī)格:50mg化突觸融合蛋白1一抗
鹽左氧氟沙星英文名稱:Levofloxacin hydrochloride含量:暫不提供保存:20℃,避光規(guī)格:100mg上皮鈉離子通道蛋白D/δENaC一抗
加替沙星英文名稱:Gatifloxacin mesylate含量:暫不提供保存:20℃,避光規(guī)格:100mg腫瘤抑制蛋白18一抗
克拉維鉀英文名稱:Potassium clavulanate含量:暫不提供保存:20℃,避光規(guī)格:50mg線粒體鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2一抗
侖西林英文名稱:Lenampicillin含量:暫不提供保存:20℃,避光規(guī)格:100mg鋅指轉(zhuǎn)錄蛋白Sall1一抗
頭孢孟多英文名稱:Cefamandole Nafate保存:20℃,避光規(guī)格:100mg轉(zhuǎn)錄因子SOX17一抗
加替沙星·3/2H2O英文名稱:Gatifloxacin 3/2H2O保存:20℃,避光規(guī)格:50mg分選連接蛋白5一抗
頭孢肟英文名稱:Cefmenoxime保存:20℃,避光規(guī)格:100mg分選連接蛋白2一抗
頭孢肟英文名稱:Cefepime保存:20℃,避光規(guī)格:100mg分選連接蛋白7一抗
頭孢脒英文名稱:Cefathiamidine保存:20℃,避光規(guī)格:100mg核轉(zhuǎn)錄因子一抗
內(nèi)毒素受體抗體8-Methyleugenitol中文名:別名:分子式:C12H12O4
細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子抗體Demethoxy-7-O-methylcapillarisin中文名:別名:分子式:C16H12O6
白介素2受體a鏈抗體 IL-2Ra1,7-Bis(4-hydroxyphenyl)-3-hydroxy-1,3-heptadien-5-one中文名:別名:分子式:C19H18O4
B和T淋巴細(xì)胞衰減蛋白抗體Bisdemethoxycurcumin中文名:二脫甲氧基姜黃素別名:BDMC分子式:C19H16O4
血小板內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子-1抗體1,7-Bis(4-hydroxyphenyl)hepta-4,6-dien-3-one中文名:別名:分子式:C19H18O3
跨膜蛋白16A/鈣激活氯離子通道抗體 Microlunatusphosphovorus種屬:Microlunatusphosphovorus
分離基物:活性污泥,日本
安全等級(jí):1
模式菌株:no
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:182
生長(zhǎng)條件:30℃Microlunatusphosphovorus