"SNK-1細(xì)胞：人NK/T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：NK/T細(xì)胞淋巴瘤；女性
細(xì)胞形態(tài)：淋巴母細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：懸浮
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：懸浮
購(gòu)買(mǎi)細(xì)胞注意事項(xiàng)：１)收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系；２)仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等；３)用７５%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落，將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過(guò)夜，隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁，若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定細(xì)胞活力，如果證實(shí)細(xì)胞活力正常，請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無(wú)活力，請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們聯(lián)系，信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次；４)建議客戶(hù)收到細(xì)胞后前３天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和公司技術(shù)部溝通交流。【細(xì)胞傳代操作步驟】一、貼壁細(xì)胞傳代：１)提前將培養(yǎng)基、PBS放入３７℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用７５%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)；２)吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞；３)加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，３７℃孵育，每隔２~３min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用；４)用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡；５)將細(xì)胞懸液分別接種到另外的２~３個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置３７℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。二、懸浮細(xì)胞傳代：１)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，１０００rpm離心５min；２)棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液；３)將細(xì)胞懸液分別接種到另外的２~３個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置３７℃溫箱培養(yǎng)。
凍存和復(fù)蘇的原則：慢凍快融》當(dāng)細(xì)胞冷到零度以下，可以產(chǎn)生以下變化：細(xì)胞器脫水，細(xì)胞中可溶性物質(zhì)濃度升高，并在細(xì)胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細(xì)胞逐步脫水，細(xì)胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶；相反，結(jié)晶就大，大結(jié)晶會(huì)造成細(xì)胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復(fù)蘇過(guò)程應(yīng)快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結(jié)晶。慢凍程序》1.標(biāo)準(zhǔn)程序：采用細(xì)胞凍存器》當(dāng)溫度在-25℃以上時(shí)，1~2℃/min；當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí)，5~10℃/min；當(dāng)溫度達(dá)-100℃時(shí)，可迅速放入液氮中。2.簡(jiǎn)易程序：將冷凍管（管口要朝上）放入紗布袋內(nèi)，紗布袋系以線(xiàn)繩，通過(guò)線(xiàn)繩將紗布袋固定于液氮罐罐口，按每分鐘溫度下降1~2℃的速度，在40min內(nèi)降至液氮表面過(guò)夜，次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序：冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時(shí)（或隔夜）→液氮槽長(zhǎng)期儲(chǔ)存。細(xì)胞凍存方法：1.預(yù)先配制凍存液》（1）8%DMSO+細(xì)胞生長(zhǎng)液（92%血清）2.取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞，經(jīng)胰酶消化后，加入適量?jī)龃嬉?，用吸管吹打制成?xì)胞懸液（1×10(6)~5×10(6)細(xì)胞/ml）。3.加入1ml細(xì)胞于凍存管中，密封后標(biāo)記冷凍細(xì)胞名稱(chēng)和冷凍日期。液氮長(zhǎng)期保存。保存細(xì)胞的復(fù)蘇方法：1.快速解凍》凍存細(xì)胞從液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動(dòng)冷凍管，使其在1分鐘內(nèi)全部融化（不要超過(guò)3分鐘）。2.解凍后的細(xì)胞可直接接種到含完全生長(zhǎng)培養(yǎng)液的細(xì)胞培養(yǎng)瓶中直接進(jìn)行培養(yǎng)，24小時(shí)后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO。3.如果細(xì)胞對(duì)冷凍保護(hù)劑特別敏感解凍后的細(xì)胞應(yīng)先通過(guò)離心去除冷凍保護(hù)劑，然后再接種到含完全生長(zhǎng)培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。
細(xì)胞傳代時(shí)消化的問(wèn)題：可以這樣說(shuō)，對(duì)于需要消化傳代的細(xì)胞，每一次的消化都是對(duì)這個(gè)細(xì)胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過(guò)這個(gè)問(wèn)題，自己養(yǎng)的細(xì)胞開(kāi)始的幾代長(zhǎng)的還挺好的，可是穿過(guò)幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞，狀態(tài)越來(lái)越差勁了。對(duì)于這個(gè)問(wèn)題，可以非?？隙ǖ卣f(shuō)，你的消化環(huán)節(jié)出問(wèn)題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以，越長(zhǎng)越差。在消化的過(guò)程中，你加入胰酶后，所有細(xì)胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個(gè)問(wèn)題就是，細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)是不一樣的，每一個(gè)細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒(méi)有那么牢固的，所以，讓所有的細(xì)胞消化同樣的時(shí)間對(duì)細(xì)胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會(huì)有脾氣啊。我后來(lái)對(duì)消化的方法進(jìn)行了改良。爭(zhēng)取做到因材施教呵呵。我稱(chēng)之為“四步消化法”。（以難消化細(xì)胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類(lèi)盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來(lái)。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過(guò)的細(xì)胞對(duì)比觀察看誰(shuí)長(zhǎng)的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對(duì)胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶?jī)?nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤(rùn)洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時(shí)置于顯微鏡下觀察，待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時(shí)候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開(kāi)始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對(duì)比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來(lái)的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話(huà)，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細(xì)胞間隙明顯，細(xì)胞獨(dú)立開(kāi)來(lái)的時(shí)候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實(shí)際情況你自己把握）。這是第四步。其實(shí)還可以有第五步，對(duì)于特別難消化的細(xì)胞和對(duì)胰酶特別敏感的細(xì)胞的話(huà)，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒(méi)辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷降到最低，保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了，如果細(xì)胞是屬于那種很容易消化的細(xì)胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒(méi)必要第三步第四步了。這個(gè)是需要你在實(shí)驗(yàn)中能夠自己用心去體會(huì)的。建議你接受一個(gè)新細(xì)胞時(shí)把各步消化的細(xì)胞分別培養(yǎng)起來(lái)做比較，去摸索好細(xì)胞對(duì)胰酶的要求。便于你后續(xù)實(shí)驗(yàn)的開(kāi)展。將細(xì)胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷之外，還有一個(gè)更重要的作用就是，可以程度地把細(xì)胞吹打成單個(gè)單個(gè)的狀態(tài)，不成片不連體。
HL-60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-813細(xì)胞、CX-1細(xì)胞、KNS62細(xì)胞
IMR-32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BpRcl細(xì)胞、SKNF1細(xì)胞、Hs729T細(xì)胞
JHH-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03671細(xì)胞、Hs_578t細(xì)胞、HBE 135-E6E7細(xì)胞
Pa16C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：F9細(xì)胞、Panc02-H0細(xì)胞、HO-8910 PM細(xì)胞
SCLC-21H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SPCA-1細(xì)胞、NCIH2107細(xì)胞、231-luc細(xì)胞
KYSE-150細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJA-B細(xì)胞、74Int細(xì)胞、Ly1細(xì)胞
PVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-5178-Y細(xì)胞、MDAMB453細(xì)胞、HeLaS3細(xì)胞
A-375SM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCa/16A3-F細(xì)胞、NCIH1355細(xì)胞、NR8383細(xì)胞
RPMI-7951細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDQP1細(xì)胞、SBC-3細(xì)胞、TC-1 [Mouse lung]細(xì)胞
H128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco2BBe細(xì)胞、MBVP細(xì)胞、MGH-U3 (RN)細(xì)胞
MESSADX5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MALME 3M細(xì)胞、CHL/IU細(xì)胞、P3-X63.Ag8.653細(xì)胞
D-283MED細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293 Ad5細(xì)胞、KMS-18細(xì)胞、P3-NS1/1-Ag4-1細(xì)胞
GEO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1373細(xì)胞、BSC-40細(xì)胞、OCI-LY-7細(xì)胞
HO8910/PM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bac12F5細(xì)胞、U-118-MG細(xì)胞、MUS-M1細(xì)胞
FRhK4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH508細(xì)胞、CCLP-1細(xì)胞、Tn 5B1-4細(xì)胞
SNU475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH661細(xì)胞、BEL7402細(xì)胞、SJRH30細(xì)胞
SNU475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH661細(xì)胞、BEL7402細(xì)胞、SJRH30細(xì)胞
WM 239細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PAEC細(xì)胞、DLD-1細(xì)胞、HCT8細(xì)胞
BC3 H1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-27細(xì)胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細(xì)胞、LAC細(xì)胞
G 401細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-9細(xì)胞、HO8910細(xì)胞、HEB細(xì)胞
T/G HA-VSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-433細(xì)胞、PLC/PRF5細(xì)胞、NCI-H1563細(xì)胞
N-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK15細(xì)胞、MSF細(xì)胞、CG4細(xì)胞
Jiyoye (P-2003)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1299細(xì)胞、COS1細(xì)胞、HMCB細(xì)胞
HTori 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3.653細(xì)胞、MEC1細(xì)胞、PGLH7細(xì)胞
NALM-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCCJF細(xì)胞、NIH:OVCAR3細(xì)胞、MCF.7細(xì)胞
PECAPJ34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT細(xì)胞、C518細(xì)胞、Hs611T細(xì)胞
H446細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUIT 2細(xì)胞、OV-CA 432細(xì)胞、SF 767細(xì)胞
SCC154細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Plaepi 34細(xì)胞、VM-CUB1細(xì)胞、BHT101細(xì)胞
MARC 145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CoCL2細(xì)胞、CP70細(xì)胞、T-T細(xì)胞
TMK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMEC細(xì)胞、NCIH1819細(xì)胞、RSC-96細(xì)胞
HTSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIM-1215細(xì)胞、Ej138細(xì)胞、HTori-3細(xì)胞
SKNBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PZ-HPV-7細(xì)胞、L-132細(xì)胞、H-446細(xì)胞
H-146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1359細(xì)胞、H64細(xì)胞、KALS1細(xì)胞
Walker-256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR4-IP細(xì)胞、HCC0366細(xì)胞、HEL-92_1_7細(xì)胞
3T3 Swiss Albino細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVTOKO細(xì)胞、BNL CL2細(xì)胞、CCK81細(xì)胞
IGROV-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G361細(xì)胞、PC-9/GR細(xì)胞、RPE-1細(xì)胞
RT-BM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUC-1細(xì)胞、HCC1806細(xì)胞、GM 2132細(xì)胞
OEC33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR-75-1細(xì)胞、HPF細(xì)胞、Wien133細(xì)胞
H-520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGP-1細(xì)胞、UPCI-SCC090細(xì)胞、CPAE細(xì)胞
LYR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL6細(xì)胞、XuanWei Lung Cancer-05細(xì)胞、HSC6細(xì)胞
Hs852細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FDCP1細(xì)胞、OCI-AML4細(xì)胞、PC-3M細(xì)胞
BEL 7402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR-8/SVneo細(xì)胞、SW403細(xì)胞、NT-2細(xì)胞
OVCAR5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-NSH細(xì)胞、C3H10T1/2 clone8細(xì)胞、H524細(xì)胞
Nb2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-4I細(xì)胞、C32-mel細(xì)胞、U-251MG細(xì)胞
VMRCRCZ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE(2)-C細(xì)胞、SL1細(xì)胞、NU-GC-3細(xì)胞
AM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFLS-RA細(xì)胞、GLC-15細(xì)胞、HO1N1細(xì)胞
CZ-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ST細(xì)胞、EFO-27細(xì)胞、HMC細(xì)胞
SKM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGMC細(xì)胞、GM00637H細(xì)胞、L cells細(xì)胞
NCI-128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SL1細(xì)胞、SW 48細(xì)胞、NCIH1651細(xì)胞
Panc5.04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs281T細(xì)胞、H2342細(xì)胞、TOV21細(xì)胞
P3-X63-Ag 8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1618細(xì)胞、NBLS細(xì)胞、TGW細(xì)胞
GP2-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AM38細(xì)胞、COLO320-DM細(xì)胞、NCI-H1944細(xì)胞
Rat 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMrSV5細(xì)胞、NCI-H1792細(xì)胞、ACT-1細(xì)胞
Transformed Human Liver Epithelial-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OKT3細(xì)胞、MOLM-13細(xì)胞、RAW264細(xì)胞
RPMI8226/S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFL-1細(xì)胞、SMA-560細(xì)胞、BEL7404細(xì)胞
LAN6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-8細(xì)胞、AD-293細(xì)胞、U373細(xì)胞
NCI-SNU-119細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK clone 49F細(xì)胞、MDAMB134細(xì)胞、H-2172細(xì)胞
RCC 7860細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-205細(xì)胞、WEHI231細(xì)胞、CAKI 2細(xì)胞
ABE8.1/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bovine ENDometrial cells細(xì)胞、RC-K8細(xì)胞、FL 62891細(xì)胞
MDA-MB453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD966SK細(xì)胞、NCI-H1734細(xì)胞、NCIH2135細(xì)胞
AtT-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1436細(xì)胞、HConEpic細(xì)胞、A-253細(xì)胞
NKL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細(xì)胞、C4-2 B細(xì)胞、SW 1222細(xì)胞
VK-2/E6E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-445細(xì)胞、HT(H9)細(xì)胞、GLC82細(xì)胞
M-07e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP-2細(xì)胞、TGW-nu-1細(xì)胞、NCI-H2108細(xì)胞
COLO_320DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HANK-1細(xì)胞、SUDHL-8細(xì)胞、H22細(xì)胞
BV173細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGC-5細(xì)胞、RBL.2H3細(xì)胞、HS-445細(xì)胞
OVCAR 433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO394細(xì)胞、SMMC7721細(xì)胞、RPMI 8226細(xì)胞
H740細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Neuro2a細(xì)胞、SUM-190細(xì)胞、IOSE80細(xì)胞
TE-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wien-133細(xì)胞、Daudi細(xì)胞、Wien 133細(xì)胞
DI TNC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2172細(xì)胞、HREC細(xì)胞、ATDC5細(xì)胞
Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L 540細(xì)胞、RGC6細(xì)胞、NIE-115細(xì)胞
HEC-251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM17346細(xì)胞、C38細(xì)胞、H-64細(xì)胞
JHH-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRC-9細(xì)胞、D562細(xì)胞、RBE細(xì)胞
KM-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFD-1細(xì)胞、NCI-H820細(xì)胞、P388D1細(xì)胞
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