"TK-1細胞:小鼠T淋巴瘤細胞系
細胞背景資料:淋巴瘤;AKR/Cum
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
細胞生長:懸浮
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性:懸浮
細胞培養(yǎng)實驗基本操作:①進無菌室前要徹底洗手,按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。②操作者動作要輕,安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應在火焰近處并經(jīng)過燒灼進行。但要注意,金屬器械不能在火焰中長時間燒灼,以防退火;燒過的器械要冷卻后才能使用;已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼,因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會產(chǎn)生有害物質(zhì),吸管再用時會將其帶到培養(yǎng)液中;膠塞、橡皮乳頭及塑料的細胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時間太長,以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體,危害培養(yǎng)細胞,同時塑料細胞培養(yǎng)用品也會產(chǎn)生變形影響使用。③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶,開瓶后的培養(yǎng)液應保持斜位,避免直立,以防止下落細菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應立即封閉瓶口,培養(yǎng)的細胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。④操作時盡量不要談話,咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。⑤吸取培養(yǎng)液、細胞懸液時,應專管專用,一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應棄去,以防止污染擴大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。⑥操作完畢后應整理好工作臺面,用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面;防止細胞交叉污染:所有從別處轉(zhuǎn)來的或是自己所建的細胞系都要早期留有的充足的凍存儲備,一旦懷疑發(fā)生交叉污染,可做細胞遺傳學方面的鑒定,如發(fā)現(xiàn)原有的細胞遺傳物發(fā)生改變,可以復蘇早期凍存的細胞使用。重要細胞系的傳代工作應由兩人獨立進行;無菌室的徹底消毒①新潔爾滅全面徹底擦洗無菌室。使用前應稀釋即配即用。新潔爾滅和酒精相比,的優(yōu)點是便宜,而且可以稀釋50倍用,而同樣量的酒精價格可能是新潔爾滅的幾十倍。②甲醛熏蒸法:甲醛是一種廣譜滅菌劑菌,其水溶液和氣體對各種細菌、芽孢及真菌等微生物均有殺滅作用。甲醛價廉,熏蒸消毒時不損壞衣服、家具、皮革、橡膠等。市售的甲醛水溶液中一般含37-40%的甲醛。
公司細胞庫凍存并保種有2300多種各類細胞系。針對每種不同的細胞系,公司摸索并積累了大量細胞培養(yǎng)條件和優(yōu)化參數(shù),為您的細胞實驗保駕護航。細胞培養(yǎng)是生命科學研究中最基礎(chǔ)、也是最常用的實驗手段。從凍存→復蘇→傳代→實驗,在每一次細胞培養(yǎng)的過程中我們都是精心呵護,小心培養(yǎng),心里都是默默承諾:我要護你一世周全!可是可是……無數(shù)次細胞都因污染而離我而去,投入的不只是我們貌美如花的青春,還有那一去不復返的經(jīng)費!在細胞生物學,生物化學,免疫學,神經(jīng)生物學,病理學……只要涉及細胞的研究領(lǐng)域,都面臨著支原體污染的威脅。在眾多污染物中,也就屬支原體最狡猾了,他最善于隱藏自己,因為被支原體污染的細胞不會馬上死亡,但會改變細胞的新陳代謝,甚至會改變細胞的基因表達譜,我們就這樣被欺騙了無數(shù)次,誰讓我們就是個看“顏值”的花癡了??墒俏覀兺ㄟ^被虐了幾百次的經(jīng)驗中總結(jié)出來,當你的細胞出現(xiàn)了這些癥狀時:生長速率改變;活性減弱;形態(tài)改變;染色體畸變;轉(zhuǎn)染效率顯著降低;細胞復蘇后存活率降低……。那你就得千萬小心了,也許你的細胞已經(jīng)被支原體欺凌了!
細胞傳代時消化的問題:可以這樣說,對于需要消化傳代的細胞,每一次的消化都是對這個細胞存活與否,狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題,自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的,可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞,狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題,可以非??隙ǖ卣f,你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以,越長越差。在消化的過程中,你加入胰酶后,所有細胞都在被胰酶消化著,但是我們忽視了一個問題就是,細胞的生長狀態(tài)是不一樣的,每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的,有的貼壁牢固,有的貼壁沒有那么牢固的,所以,讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的,他們受到了差別待遇當然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。(以難消化細胞為例);具體操作:1)首先不加胰酶,倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍,(這是前奏,即為步,目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍,這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍,兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步(你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng),以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了。)3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體,加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍,吸掉棄之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察,待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用,加入新培養(yǎng)基開始吹打,吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(你也可以傳入新瓶培養(yǎng),以與后面及前面的做對比。)這是第三步。4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶,如果你們那比較富裕的話,呵呵。繼續(xù)鏡下觀察,待剩余細胞間隙明顯,細胞獨立開來的時候,吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)(根據(jù)實際情況你自己把握)。這是第四步。其實還可以有第五步,對于特別難消化的細胞和對胰酶特別敏感的細胞的話,你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細胞更好的狀態(tài),更漂亮的樣子,沒辦法,你必須分多批多次消化,這樣才能限度地將胰酶對細胞的損傷降到最低,保證細胞的狀態(tài)能夠。當然了,如果細胞是屬于那種很容易消化的細胞,像RAW264.7,僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實驗中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細胞時把各步消化的細胞分別培養(yǎng)起來做比較,去摸索好細胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實驗的開展。將細胞消化分成這幾步,除了是為了避免胰酶對細胞的損傷之外,還有一個更重要的作用就是,可以程度地把細胞吹打成單個單個的狀態(tài),不成片不連體。
GM04680細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL11細胞、KYSE270細胞、WSU-HN13細胞
SK UT 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU216細胞、HD11細胞、MN60細胞
CAL 12T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS-TE85細胞、SW-1990細胞、MES-SA/Dx-5細胞
HT 144細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE1-LUC細胞、UMC-11細胞、PC-9細胞
MV(4;11)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC12(高分化)細胞、WISH細胞、451-LU細胞
MuM-2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG細胞、KYSE 70細胞、CL34細胞
CAL-62細胞系相關(guān)產(chǎn)品:mRMEC細胞、KYSE180細胞、HS766T細胞
SupB15WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1944細胞、IGROV 1細胞、ME 180細胞
DMS 79細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SH-SY5Y Parental細胞、Cates-1B細胞、HN6細胞
PA-TU-8988S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2286細胞、OVCA 420細胞、MDA1386細胞
HEK-AD 293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H184A1細胞、M059K細胞、CNLMG-B5537SKIN細胞
hTERT RPE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-8226細胞、MHCC97-H細胞、H-2108細胞
Hs840T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BTI-Tn5B14細胞、NCI H548細胞、HT-55細胞
Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1088細胞、NK92-MI細胞、HAEC細胞
PA-TU-8988S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2286細胞、OVCA 420細胞、MDA1386細胞
NCIH2591細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KS-SLK細胞、Mouse Colon 38細胞、Meat Animal Research Center-145細胞
NCIH2591細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KS-SLK細胞、Mouse Colon 38細胞、Meat Animal Research Center-145細胞
201T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fetal Bovine Heart Endothelial細胞、KALS-1細胞、MDBK (NBL-1)細胞
WEHI231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LICR-HN6細胞、McA-RH 7777細胞、VMRC-RCZ細胞
Calu 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAN6細胞、H220細胞、K299細胞
Medical University of Graz-Chordoma 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEH2細胞、CA46細胞、B95-8細胞
MCM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-36細胞、C3H 10T1/2細胞、MFE280細胞
HBE 135-E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SaOS細胞、HPAEpiC細胞、Clone 929細胞
4T1.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHG-44細胞、143 B細胞、Colon26細胞
CATH.a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC 12細胞、NCIADRRES細胞、SUP-M2細胞
MES-SA/Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Glioma-261細胞、B16-F1細胞、HANK1細胞
H1650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2171細胞、PLB-985細胞、HCCLM6細胞
ZR-75-30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBC-1/original細胞、SiHa細胞、EAC-E2G8細胞
PE/CA-PJ-34細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-OV-433細胞、SUM52細胞、S-16細胞
LS 174 T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WILL2細胞、HepG2-luc細胞、MPP89細胞
HN4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA4細胞、MDA361細胞、H-1618細胞
MDBK (NBL-1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H378細胞、RIN-m細胞、COR-L23/P細胞
H735細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 934.T細胞、IPLB-Sf21AE細胞、CAL 12細胞
MX-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFE-145細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞、N-2a細胞
SW48細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2452細胞、LAN5細胞、RS4:11細胞
Liver-02細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-4細胞、GM00637F細胞、Ca-Ski細胞
MES13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FTC-133細胞、COLO201細胞、A-2780細胞
RMS 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1793細胞、EBC1細胞、LC-1Sq細胞
293-FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-NS1/1Ag 4.1細胞、H-2066細胞、LADMAC細胞
NCIH1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS 1034細胞、IEC18細胞、Opossum Kidney細胞
HFE-145細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VSMC細胞、H1876細胞、T 84細胞
Tb1.Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CPA47細胞、H-1869細胞、L363細胞
184A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep 3B2_1-7細胞、BALB/c 3T3 clone A31細胞、RK13細胞
MiaPaca.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGHU1細胞、L-428細胞、MDA-MB-330細胞
MPP-89細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Adeno-293細胞、COLO 738細胞、IBRS2細胞
OCI-LY-18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ROS17/2.8細胞、MCA38細胞、HCC-9724細胞
MC-116細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SBC3細胞、NPA87-1細胞、H-510細胞
OAW 42細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMG-I細胞、ME-180細胞、RPMI no 8226細胞
SCL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNCL-2細胞、LNCaP subline C4-2細胞、PIG3細胞
Hs-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE2細胞、NTERA2-D1細胞、SNU5細胞
MDA-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS(TE85)細胞、MNNG/HOS Clone F-5細胞、OC 316細胞
ACHN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCV 29細胞、BrCL18細胞、MDA-MB-468細胞
4175細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR433細胞、MDCK II細胞、Human Melanoma Cell Bowes細胞
TGBC-11-TKB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI7951細胞、J82 COT細胞、LC-1 sq細胞
NCI-H2444細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPC-5細胞、NCI-H2009細胞、KPL4細胞
H-EMC-SS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BSC-40細胞、HS 683T細胞、U-373 MG細胞
Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NFHIOSE-29細胞、A 2058細胞、H-2347細胞
CORL105細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-29細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞、MDA-MB 361細胞
95-D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Line 870 Emory University-4細胞、SHP77細胞、SCI1細胞
SKOV-433細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1703細胞、Hs 729.T細胞、MC-26細胞
H716細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo16細胞、BRL 3A細胞、NCI-H1666細胞
Anip[973]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16BL6細胞、WTRL1細胞、293-EBNA細胞
Wien-133細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-322細胞、NL20細胞、NCIH2030細胞
SW-527細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293E細胞、Capan-1細胞、PASMCS細胞
C26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS123細胞、TNC-1B12B4細胞、H9c2細胞
OUMS-23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:210RCY3-Ag1.2.3細胞、SF 763細胞、COLO206F細胞
NCI-H740細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA-N-6細胞、AM細胞、Panc_08_13細胞
MIA-Pa-Ca-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:451-LU細胞、JEG-3細胞、Panc 08.13細胞
U138細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EJ-1細胞、SW-1353細胞、EC-9706細胞
rRMECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NEC-8細胞、751-NA細胞、U 937細胞
NCI-H-69細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL-8細胞、NCI-H295細胞、H1993細胞
NIE 115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16-F10-BL6細胞、H-2444細胞、HPAF細胞
CAL 12T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS-TE85細胞、T8細胞、HaCaT細胞
H-2073細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞、H1623細胞、Kasumi-1細胞
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