"SNK-1 Lymphoblastoid cells人NK/T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:NK/T細(xì)胞淋巴瘤;女性
細(xì)胞形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟:常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn):(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-196℃,使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時(shí),要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo),使液氮直達(dá)瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時(shí)更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時(shí),再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時(shí),再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時(shí),最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
Pro-5 Lec1.3c細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH28細(xì)胞、VM Cub 1細(xì)胞、HS-294T細(xì)胞
H446細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUIT 2細(xì)胞、OV-CA 432細(xì)胞、SF 767細(xì)胞
NCIH2126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM05862細(xì)胞、H1954細(xì)胞、HS-766T細(xì)胞
細(xì)胞生長:懸浮
SNK-1 Lymphoblastoid cells人NK/T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞復(fù)蘇基本方法:1.從液氮罐中取出安剖;有時(shí)因安剖未封嚴(yán),浸入了液氮,取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸,因此應(yīng)帶有防護(hù)眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時(shí)搖動(dòng),盡快解凍。3.剪開紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺(tái)上打開蓋,用吸管吸出細(xì)胞懸液,裝入離心管中,再補(bǔ)加10ml培養(yǎng)液,吹打使細(xì)胞懸浮。4.低速離心(500~1000轉(zhuǎn)/分)5分鐘,取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。5.加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后,再移裝入培養(yǎng)瓶中,置溫箱培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T25 flask細(xì)胞時(shí),處理方式為:在寄送過程中,為避免起泡造成細(xì)胞脫落死亡,T25 flask均加滿培養(yǎng)基。請(qǐng)檢查flask外觀,并于顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象,若有任何問題,不要打開蓋子,請(qǐng)立即通知細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室。將原封之T25 flask靜置于37°C,5%CO2培養(yǎng)箱中,使細(xì)胞回溫至37°C,并讓運(yùn)送過程中少數(shù)脫落的細(xì)胞可再附著生長。隔天后,于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用),僅留約5-10ml培養(yǎng)基于flask內(nèi),依一般培養(yǎng)方式再將細(xì)胞置入培養(yǎng)箱中,或細(xì)胞已長滿盤,則將細(xì)胞做傳代培養(yǎng)。
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
LM2-4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Spodoptera frugiperda clone 9細(xì)胞、MHCC97細(xì)胞、T-98G細(xì)胞
SKOV-433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1703細(xì)胞、Hs 729.T細(xì)胞、MC-26細(xì)胞
8402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMCUB1細(xì)胞、BMDC細(xì)胞、WM 2664細(xì)胞
VM-CUB-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHIN-3細(xì)胞、HFL 1細(xì)胞、HOS(TE85)細(xì)胞
NCIH2196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT/Taxo1細(xì)胞、CAOV4細(xì)胞、RKO_AS45細(xì)胞
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
SNK-1 Lymphoblastoid cells人NK/T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性:懸浮
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代?體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長接觸抑制的特性,也就是說當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候,它就會(huì)停止生長,及時(shí)傳代后,細(xì)胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染;試劑保存不當(dāng);比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度;讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補(bǔ)加谷酷肢或生長因子等;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測(cè)支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺(tái)操作細(xì)胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí),必須注意安全,預(yù)防冷凍管爆裂。
NB-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LYR細(xì)胞、HEM細(xì)胞、HEK-AD 293細(xì)胞
Case 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2106細(xì)胞、BGC823細(xì)胞、H1666細(xì)胞
C-28I2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPPVEC細(xì)胞、H-1650細(xì)胞、NCI-H1993細(xì)胞
ISHI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF17細(xì)胞、MC-26細(xì)胞、NCI-SNU-387細(xì)胞
SEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-a2細(xì)胞、OC-3-VGH細(xì)胞、WM115細(xì)胞
HUT-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-815細(xì)胞、Hut292細(xì)胞、NMCG1細(xì)胞
IOSE-29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-a-2細(xì)胞、SNU-C2B細(xì)胞、MAntle cell VERona-1細(xì)胞
P3-Jiyoye細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-NFS-60細(xì)胞、SHZ-88細(xì)胞、SK-RC-39細(xì)胞
SK 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo-206F細(xì)胞、SW 756細(xì)胞、Hep 3B2細(xì)胞
BCaP 37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA-N-1細(xì)胞、PC615.3細(xì)胞、AG06814-N細(xì)胞
SNK-1 Lymphoblastoid cells人NK/T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞系
SK Mel 24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Earle's L cells細(xì)胞、SNK-6細(xì)胞、Mono Mac 6細(xì)胞
GM 2132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM04154B細(xì)胞、GI-1細(xì)胞、EFM-192A細(xì)胞
HEK (AD293)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WI 38細(xì)胞、HT 1197細(xì)胞、BAEC細(xì)胞
Dakiki細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS411N細(xì)胞、DU 145細(xì)胞、U031細(xì)胞
DMS114細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LL/2細(xì)胞、Nb 2細(xì)胞、HCC-9204細(xì)胞
IM-95細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-204細(xì)胞、AMJ2-C8細(xì)胞、JB6 Cl 30-7b細(xì)胞
IM-95細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-204細(xì)胞、AMJ2-C8細(xì)胞、JB6 Cl 30-7b細(xì)胞
293/EBNA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK_N_FI細(xì)胞、Ly3細(xì)胞、U2-OS細(xì)胞
SNB-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LP1細(xì)胞、CCD18細(xì)胞、SKOV3細(xì)胞
HEL299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKOV3細(xì)胞、SK.OV.3細(xì)胞、TGBC11T細(xì)胞
SK N SH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCC MSB1細(xì)胞、Hopkins-92細(xì)胞、H-1341細(xì)胞
RetroPack PT67細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAD109細(xì)胞、CAL78細(xì)胞、T84細(xì)胞
8305C_1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2087細(xì)胞、P-815細(xì)胞、H345細(xì)胞
HOC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC 25細(xì)胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細(xì)胞、H-2023細(xì)胞
APRE-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuTu-80細(xì)胞、RAW2647細(xì)胞、OCI-LY-1細(xì)胞
BV173細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGC-5細(xì)胞、RBL.2H3細(xì)胞、HS-445細(xì)胞
HCT.116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SO-Rb 50細(xì)胞、P3-X63-Ag8-653細(xì)胞、SHSY-5Y細(xì)胞
Normal Rat Kidney-52E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-138-MG細(xì)胞、MDA-MB157細(xì)胞、Wayne State University-Head and Neck 13細(xì)胞
H446細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUIT 2細(xì)胞、OV-CA 432細(xì)胞、SF 767細(xì)胞
786-0WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PATU-S細(xì)胞、BXPC3細(xì)胞、TW 01細(xì)胞
NK92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC5細(xì)胞、PC-9/S1細(xì)胞、N1S1細(xì)胞
HFLS-OA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFF-1細(xì)胞、L5178-R細(xì)胞、COV 434細(xì)胞
NCIH2342細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RTMC細(xì)胞、ssMCF-7細(xì)胞、CAL148細(xì)胞
H920細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HG2855細(xì)胞、SPCA-1細(xì)胞、MA-c細(xì)胞
Panc_05_04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JIMT1細(xì)胞、H2172細(xì)胞、McARH7777細(xì)胞
QGY 7701細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H23細(xì)胞、HOPC細(xì)胞、MS1細(xì)胞
Emory University-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI747細(xì)胞、CHP100細(xì)胞、Capan-2細(xì)胞
IOSE-Van細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VM Cub 1細(xì)胞、Potorous tridactylus Kidney 1細(xì)胞、HMO6細(xì)胞
LS 513細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H292細(xì)胞、Molm14細(xì)胞、XuanWei Lung Cancer-05細(xì)胞
SKNDZ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:751-NA-15細(xì)胞、HCC366細(xì)胞、PFSK-1細(xì)胞
FL83B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H847細(xì)胞、SW 837細(xì)胞、WM266-4細(xì)胞
N2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPP89細(xì)胞、Gejiu Lung Carcinoma-82細(xì)胞、SNU16細(xì)胞
TCC-SUP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2/D1細(xì)胞、COLO824細(xì)胞、SK-RC-20細(xì)胞
16-HBEo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Normal Rat Kidney-49F細(xì)胞、OSC-19細(xì)胞、NCIH1915細(xì)胞
RMG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:V79-GalK1細(xì)胞、LOU-NH-91細(xì)胞、OSC-19細(xì)胞
BT483細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN-12C細(xì)胞、RPMI8226/S細(xì)胞、NCI-H1648細(xì)胞
HT1197細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:190PT細(xì)胞、MKN1細(xì)胞、A-375細(xì)胞
KP-N-RT-BM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCIAML3細(xì)胞、KAT5細(xì)胞、578T細(xì)胞
KYSE70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TF-1細(xì)胞、H-1838細(xì)胞、52PE細(xì)胞
6T-CEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-449細(xì)胞、MALME 3M細(xì)胞、Cattle chondrocytes細(xì)胞
H-2081細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK 15細(xì)胞、NuTu-19細(xì)胞、HCC-1569細(xì)胞
RS 4;11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPC5細(xì)胞、H-1404細(xì)胞、D-341 Med細(xì)胞
GB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DLD-1細(xì)胞、RPVSMC細(xì)胞、MOLT3細(xì)胞
X63.Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH211細(xì)胞、GC9811-P細(xì)胞、NCI-BL1339細(xì)胞
CHP100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH:OVCAR-5細(xì)胞、NCI-1155細(xì)胞、PLB985細(xì)胞
NCI-H1876細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-647細(xì)胞、RBL細(xì)胞、RKO細(xì)胞
DH 82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549/DDP細(xì)胞、MEG01細(xì)胞、IMR 32細(xì)胞
BC-024細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGH-UI細(xì)胞、SUM 159細(xì)胞、MV-1-Lu細(xì)胞
NTERA-2 clone D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H226細(xì)胞、H-226細(xì)胞、C81-61細(xì)胞
SVEC 4-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-711細(xì)胞、RMG-1細(xì)胞、GLC-82細(xì)胞
HUT 226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-2185細(xì)胞、HCoEpiC細(xì)胞、CMT 167細(xì)胞
SNK-1 Lymphoblastoid cells人NK/T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞系
H-2107細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:rUCMSCs細(xì)胞、HDQP1細(xì)胞、H-1688細(xì)胞
NUGC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-735細(xì)胞、HuLEC-5a細(xì)胞、KAT5細(xì)胞
SV40 MES 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DITNC1細(xì)胞、MN 60細(xì)胞、B16 subline B78細(xì)胞
C-28I2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPPVEC細(xì)胞、PIG1細(xì)胞、P3-X63Ag8.653細(xì)胞
"