"B16細胞：小鼠黑色素瘤細胞系
細胞背景資料：該細胞源于C５７BL/６J小鼠黑色素瘤，可以產(chǎn)生黑色素，同基因小鼠體內(nèi)移植可成瘤
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：３傳代，２-３天換液一次
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁生長
接收細胞相關(guān)問題：如不能在收到細胞后及時操作細胞，T２５及離心管發(fā)貨的細胞將可以消毒后在３７度過夜，血清發(fā)貨的細胞在室溫下靜置１-２天(注意不要放冰箱)，干冰發(fā)貨的可以在確認干冰未完全升華時將細胞直接放回液氮或者-８０度冰箱，若干冰完全升華，請即刻復蘇細胞。T２５瓶及離心管在培養(yǎng)箱平衡是為了讓細胞盡快適應(yīng)培養(yǎng)箱環(huán)境，同時使部分因運輸導致脫落的細胞貼壁，此步驟非常必要。T２５瓶如果在顯微鏡下可以看到部分不貼壁的細胞，可以收集上清后離心(１２００rpm，５min)后，將沉淀用新的培養(yǎng)基重懸后接種至新的培養(yǎng)瓶或皿中。部分細胞在運輸過程中，由于不斷震蕩及環(huán)境不適，可能導致細胞破碎死亡，從而使培養(yǎng)基中漂浮很多細胞碎片及顆粒狀物質(zhì)。這種情況下，平衡后，貼壁細胞用PBS洗兩遍再加新的培養(yǎng)基培養(yǎng)或者傳代至新瓶中培養(yǎng)即可；懸浮細胞可以離心(１０００rpm，３min)收集細胞，并用PBS重懸后再離心一次，再用新的培養(yǎng)基重懸并接種細胞。
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞傳代培養(yǎng)(消化法)標準操作規(guī)程【原理】細胞在培養(yǎng)瓶長成致密單層后，已基本上飽和，為使細胞能繼續(xù)生長，同時也將細胞數(shù)量擴大，就必須進行傳代(再培養(yǎng))。傳代培養(yǎng)也是一種將細胞種保存下去的方法。同時也是利用培養(yǎng)細胞進行各種實驗的必經(jīng)過程。懸浮型細胞直接分瓶就可以，而貼壁細胞需經(jīng)消化后才能分瓶?！静牧虾驮噭浚?無菌生理緩沖液(PBS)；２)胰酶-EDTA溶液(０.０５%胰酶-０.５３mM EDTA-４Na): 以１０ml分裝于１５ ml無菌離心管中，保存于–２０℃，使用前放在３７℃水槽回溫；３)新鮮培養(yǎng)基；４)無菌吸管/離心管/培養(yǎng)瓶【傳代前準備操作】１)預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入３７℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱；２)用７５％酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手；３)正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且可減少污染；４)點燃酒精燈：注意火焰不能太小；５)準備好將要使用的消毒后的空培養(yǎng)瓶；６)取出預(yù)熱好的培養(yǎng)用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺內(nèi)；７)從培養(yǎng)箱內(nèi)取出細胞：注意取出細胞時要旋緊瓶蓋，用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺面，再在鏡下觀察細胞；８)打開瓶口：將各瓶口一一打開，同時要在酒精燈上燒口消毒。
LN-18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SLK細胞、RH30SJ細胞、WM 266-4細胞
SNU398細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G 401細胞、SKUT-1細胞、SK-N-BE(2)-C細胞
SKUT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tn5 B1-4細胞、Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞、HepG2細胞
Mo 59J細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA-10 clone 4細胞、HuTu 80細胞、Ca759細胞
MKN-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H820細胞、Japanese Tissue Culture-39細胞、HTh 74細胞
130-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G361-mel細胞、Pt-K2細胞、SUM 159PT細胞
TE15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N-Tera-2細胞、PAEC細胞、4T1-LUC細胞
NHLF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：149PT細胞、A-1847細胞、Anglne細胞
HCC9204細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL 7402細胞、RKO_AS45細胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細胞
HOPC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC-893細胞、Normal Rat Kidney細胞、H209細胞
MN-60細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wien133細胞、H-838細胞、HCC1599細胞
P3X63 AG8-653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-CAM2細胞、HMEC細胞、HELF細胞
SK HEP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293-H細胞、HTR8細胞、HTori 3細胞
JTC-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G 292 Clone A 141B1細胞、HSC2細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞
H-920細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JVM3細胞、SNU475細胞、NCIH2052細胞
KYSE 140細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU19-19細胞、SG231細胞、LC1/Sq細胞
KYSE 140細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU19-19細胞、SG231細胞、LC1/Sq細胞
MC3T3-E1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2228細胞、RAW-264.7細胞、Hs 729T細胞
Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan-1細胞、HIT.T15細胞、MB 157細胞
Ramos.G6.C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-3T3細胞、ONS-76細胞、HUC細胞
LS-174細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OLN-93細胞、NCI-H1703細胞、HCC-2279細胞
HELF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BAR-T細胞、MBT-2細胞、CAL-120細胞
COLO680N細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCC-HSF-1細胞、SNU182細胞、LS411N細胞
NCI-H838細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT-RPE-1細胞、R1610細胞、Okayama University Medical School-23細胞
Namalva細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nakata-1細胞、FF-WT-BJ細胞、Tca-83細胞
LU65細胞系相關(guān)產(chǎn)品：130 T細胞、H2405細胞、SW 1573細胞
LTEPsm細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H596細胞、ONS76細胞、LC-1/sq細胞
SBC-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SACC-LM細胞、Soleus clone 8細胞、253J-Bladder-V細胞
624-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞、aNK細胞、NUGC-2細胞
GM02219D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMa-bm細胞、WSU-DLCL2細胞、HFT8810細胞
MES-23.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3J.HR1K細胞、TMD-8細胞、RT4細胞
SkMel31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CWR22R-V1細胞、LS-174細胞、32D:cl3細胞
HEL-299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EoL-1細胞、TE3A細胞、NCIH810細胞
GM07404細胞系相關(guān)產(chǎn)品：639-V細胞、Pa017C細胞、OCI/AML-5細胞
PCI-04B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 39細胞、SUM 190PT細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞
KBM-7/Hap8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEP3B2細胞、GCT0404細胞、4T1-A細胞
NCIH69細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RD 2細胞、H-1963細胞、ASPC1細胞
H 9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tadarida brasiliensis 1 lung細胞、BE(2)C細胞、P3/NS1/1-Ag4.1細胞
SK Mel 24細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Earle's L cells細胞、SNK-6細胞、Mono Mac 6細胞
A204細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuT 102細胞、KY-270細胞、TK10細胞
GC-2spd(ts)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞、TMD8細胞、SKNBE-1細胞
CAL33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-1846細胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞、F-81細胞
G-292, clone A141B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 766.T細胞、SCC-1395細胞、MT4細胞
HCA 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-292細胞、GC1-SPG細胞、AR4-IP細胞
COLO-357細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU449細胞、S91細胞、MM1.S細胞
SU-DHL-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SL-1細胞、H2227細胞、B-CPAP細胞
MDA-MB-468-RED細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM346細胞、Medical Research Council cell strain-5細胞、Me Wo細胞
Gejiu Lung Carcinoma-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1395細胞、87 MG細胞、OCILY-3細胞
WILL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-128細胞、CORL279細胞、OVCAR-4細胞
Duke University 145細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M619細胞、D-283 Med細胞、Japanese Tissue Culture-39細胞
TE-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 741細胞、GM06141B細胞、SuperTube細胞
HAC-84細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-3_27細胞、KNS62細胞、Hs-729-T細胞
MKN28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV112細胞、D324細胞、SKLU1細胞
COLO-680N細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293FT細胞、KP 4細胞、HGSMC細胞
RIN14B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFSC-8B細胞、SCC-15細胞、LC-1-sq細胞
RT-BM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUC-1細胞、HCC1806細胞、GM 2132細胞
Sup T-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA-2 cl.D1細胞、MC116細胞、SK-MEL-MeWo細胞
AHH1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GOTO細胞、DKMG細胞、NCI-HUT-596細胞
HS852.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-299細胞、NCIH1915細胞、Fetal Rhesus Kidney-4細胞
RFL-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNUC2B細胞、PG13細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞
OCI AML4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF細胞、H-1770細胞、T-HEECs細胞
Jurkat clone A3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LL/2 (LLC1)細胞、RTMC細胞、RIN m5F細胞
P3J-HR-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFF1細胞、HIEC6細胞、MCF7-GFP細胞
PTK 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Medical Research Council cell strain-9細胞、SKRC-42細胞、SHI-1細胞
Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI-4B細胞、KATO III細胞、GFP-Olig2細胞
RPMI 6666細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV-112細胞、Fetal Human Colon細胞、NCI-H1437細胞
CLL-CII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW13細胞、H-441細胞、D341Med細胞
D 407細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT 15細胞、293 HEK細胞、ECC12細胞
THP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBVP細胞、WM115-mel細胞、MUTZ3細胞
SU-DHL-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RH8994細胞、NPC-TW 01細胞、H184A1細胞
BEL/FU細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KOSC-2 cl3-43細胞、HGF-1細胞、H-295R細胞
TFK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNT1A細胞、WEHI-231細胞、MADB 106細胞
SKUT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tn5 B1-4細胞、CCLP-1細胞、KCL-22細胞
HEL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPF細胞、MC-4細胞、GM02131A細胞
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